作為時下的熱點技術(shù)，數(shù)字PCR是將核酸樣品分配到大量單獨、平行的微反應(yīng)單元（nL，納升級別）中，使得每個反應(yīng)單元中盡可能含有1個模板分子，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行擴(kuò)增、檢測和分布統(tǒng)計，從而實現(xiàn)靶標(biāo)分子的比較 計數(shù)。（圖：數(shù)字PCR技術(shù)原理）根據(jù)微反應(yīng)單元的不同形式，數(shù)字PCR產(chǎn)品可分為微板式、微滴式和芯片式等。目前，市場上主要的數(shù)字PCR產(chǎn)品主要是基于微滴式和芯片式，如Bio-Rad公司的QX200微滴式系統(tǒng)和ThermoFisher公司的QuantStudio系統(tǒng)等。與一、二代PCR技術(shù)相比，數(shù)字PCR具有很多優(yōu)勢：一是特異性、靈敏性均有顯著提高；二是在不依賴內(nèi)參和標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提下，可直接得到比較 量化指標(biāo)；三是微反應(yīng)單元相互獨立、封閉，避免了PCR抑制劑及不同核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物間的相互干擾，準(zhǔn)確度和可重復(fù)性較高。Drop-off數(shù)字PCR檢測方法的**主要優(yōu)勢是能夠能夠在一個反應(yīng)中檢測到基因組序列范圍短的同源基因突變。數(shù)字PCR油滴制造
基于微滴的QX100dPCR儀，利用油包水技術(shù)，將樣品平均分配到20000個微滴油包水中，利用微滴分析儀對微滴進(jìn)行分析。2012年RainDance公司推出了RainDropdPCR儀，在高壓氣體驅(qū)動下，將每個標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系分割成包含100萬至1000萬個皮升級別微滴的反應(yīng)乳液。數(shù)字PCR就形成了2大派別，芯片式和微滴式。不論是哪種數(shù)字PCR，其原理都是有限稀釋，終點PCR和泊松分布。將含有核酸模板的標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)體系，平均分配成幾萬個PCR反應(yīng)，分配到芯片或微滴中，使每個反應(yīng)中盡可能含有一個模板分子，進(jìn)行單分子模板PCR反應(yīng)，通過讀取熒光信號的有或無進(jìn)行計數(shù)，經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)泊松分布的校準(zhǔn)進(jìn)行定量。美國國產(chǎn)數(shù)字PCR解決方案dPCR可直接溯源SI國際單位制摩爾，適合單一、雙重及多重轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究，一次可識別不同的轉(zhuǎn)基因區(qū)域。
二項式分布是一個離散概率分布，它給出了m次試驗中k次成功的可能性，每次試驗的概率為p，例如當(dāng)擲骰子時，二項分布給出了在10次試驗中恰好有7次擲出4的概率。在數(shù)字PCR的情況中，投擲骰子類似于將一個目標(biāo)實體隨機(jī)“投擲”到一組分區(qū)中，當(dāng)目標(biāo)落在選定的分區(qū)中時，就是成功。如果有n個分區(qū)，并且分區(qū)過程是完全隨機(jī)的，則目標(biāo)出現(xiàn)在所選分區(qū)中的概率為1/n。該試驗重復(fù)m次，樣品中的每個分子一次。更多關(guān)于PCR的相關(guān)信息，歡迎咨詢廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司。
基于數(shù)字PCR技術(shù)平臺，塔歌生物成功地開發(fā)了胎兒染色體非整倍體(T21,T18和T13)無創(chuàng)產(chǎn)前篩查試劑盒（數(shù)字PCR-NIPT），并已完成數(shù)百例臨床樣本驗證。數(shù)字PCR-NIPT的陽性檢出率和NGS相似，且成本接近血清學(xué)，可以在上述應(yīng)急策略中取代血清學(xué)作為靈敏度和特異性更高的初篩方法，以有效提高陽性檢出率，降低需要復(fù)篩的假陽性樣本數(shù)和節(jié)省總的篩查成本。數(shù)字PCR應(yīng)用前景廣闊，可用于病原微生物檢測、基因檢測、無創(chuàng)產(chǎn)前篩查、測序結(jié)果驗證等領(lǐng)域。但目前，大多數(shù)醫(yī)院采購的數(shù)字PCR儀器是用于科研層面，在臨床應(yīng)用上仍處于起步階段，未得到普遍應(yīng)用。檢測結(jié)果部分為陽性，部分為陰性，之后進(jìn)行分子數(shù)統(tǒng)計，不需做標(biāo)曲。
盡管我國dPCR行業(yè)起步較晚，但在國家鼓勵醫(yī)療器械創(chuàng)新的大背景下，以及精細(xì)醫(yī)療和個性化用藥等需求推動下，dPCR成為了近年廣受關(guān)注的熱點領(lǐng)域，保持著穩(wěn)定快速的增長。近年來國內(nèi)誕生了如領(lǐng)航基因、新羿生物、銳訊生物、科維思、永諾生物、泛生子、思納福醫(yī)療等企業(yè)，開始與國外企業(yè)同臺競技。從市場角度看，北美依然是dPCR比較大的主導(dǎo)市場，其次是亞洲和歐洲。由于性疾病和的高發(fā)病率以及患者對這些疾病的早期診斷意識的提高，亞太地區(qū)將成為dPCR增長速度快的市場。伯樂、凱杰、賽默飛、羅氏、因美納等公司紛紛通過收購、投資等方式布局dPCR業(yè)務(wù)。經(jīng)過PCR循環(huán)之后，有一個核酸分子模板的反應(yīng)器就會給出熒光信號，沒有模板的反應(yīng)器就沒有熒光信號。數(shù)字PCR儀器
通過“儀器+試劑”相互配合的方式，打出了數(shù)字PCR檢測的“組合拳”。數(shù)字PCR油滴制造
企業(yè)宗旨：成為數(shù)字PCR的，更好地服務(wù)于體外診斷行業(yè)，讓檢測更簡單！企業(yè)價值觀：用戶，質(zhì)量為本；潛力而為，主動開拓；高效執(zhí)行，負(fù)責(zé)到底。發(fā)展歷程：2016年，企業(yè)成立2017年，數(shù)字PCR系統(tǒng)研制成功2018年，產(chǎn)品線成熟2019年，生產(chǎn)線建成“讓檢測，更簡單”。臻準(zhǔn)生物誠摯邀請您蒞臨展會現(xiàn)場，洽談合作、共贏未來！作為華南地區(qū)備受舉薦的專業(yè)平臺，BTE始終以昂首積極的姿態(tài)迎接數(shù)萬專業(yè)人士，攜手生物技術(shù)行業(yè)從業(yè)者共同探討行業(yè)發(fā)展新機(jī)遇。多年來，BTE始終時刻探索業(yè)界風(fēng)向，吸納行業(yè)前沿資源，不忘宗旨，銳意開拓，正圍繞粵港澳大灣區(qū)生物行業(yè)產(chǎn)業(yè)群的協(xié)同發(fā)展交流與融合打造一個高水平科技創(chuàng)新載體和平臺。數(shù)字PCR油滴制造
廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司正式組建于2015-04-17，將通過提供以數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀等服務(wù)于于一體的組合服務(wù)。業(yè)務(wù)涵蓋了數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀等諸多領(lǐng)域，尤其數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀中具有強(qiáng)勁優(yōu)勢，完成了一大批具特色和時代特征的精細(xì)化學(xué)品項目；同時在設(shè)計原創(chuàng)、科技創(chuàng)新、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范等方面推動行業(yè)發(fā)展。同時，企業(yè)針對用戶，在數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀等幾大領(lǐng)域，提供更多、更豐富的精細(xì)化學(xué)品產(chǎn)品，進(jìn)一步為全國更多單位和企業(yè)提供更具針對性的精細(xì)化學(xué)品服務(wù)。值得一提的是，雙螺旋科學(xué)儀器致力于為用戶帶去更為定向、專業(yè)的精細(xì)化學(xué)品一體化解決方案，在有效降低用戶成本的同時，更能憑借科學(xué)的技術(shù)讓用戶極大限度地挖掘臻準(zhǔn),美國艾科浦,銳訊生物,Sysmex,Eprerdia的應(yīng)用潛能。