使用ddPCR的一個(gè)主要優(yōu)點(diǎn)在于,定量不是相對(duì)的。微滴式數(shù)字PCR計(jì)算事件的數(shù)量,因此可以確定檢測(cè)極限和比較低起始量,以便達(dá)到所需的靈敏度。在連續(xù)監(jiān)控或比較不同患者的效果時(shí),這可以更準(zhǔn)確地比較負(fù)荷,因?yàn)樗鶞y(cè)得的豐度不是相對(duì)的。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí),ddPCRKRASG12/G13ScreeningKit也能夠檢測(cè)患者cfDNA樣品中的KRAS突變(圖2)。這些患者的血漿樣品購(gòu)自ConversantBio和ProMedDx,之前已通過(guò)FFPE基因分型被分為KRAS突變陽(yáng)性或陰性。歡迎咨詢(xún)廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司。檢測(cè)結(jié)果部分為陽(yáng)性,部分為陰性,之后進(jìn)行分子數(shù)統(tǒng)計(jì),不需做標(biāo)曲。上海進(jìn)口數(shù)字PCR系統(tǒng)
數(shù)字PCR產(chǎn)品的發(fā)展,為不同場(chǎng)景下的多樣化核酸檢測(cè)需求提供了新的思路,尤其是在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)方面,在 性疾病早期檢測(cè)、病癥的液體活檢、無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢查等領(lǐng)域展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。實(shí)現(xiàn) 性疾病早期高效檢測(cè)——以病毒為例,有病毒檢測(cè)、和臨床樣本病毒載量評(píng)估He監(jiān)測(cè)環(huán)境病毒載量;二代熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)是目前病毒檢測(cè)的"金標(biāo)準(zhǔn)",但由于病毒探針結(jié)合位點(diǎn)突變、樣本病毒載量不足等原因,在臨床檢測(cè)過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)假陰性結(jié)果,由于數(shù)字PCR具有更高的靈敏度、精細(xì)度,以及其適合痕量樣本檢測(cè)的特性,能夠檢測(cè)出熒光定量PCR檢測(cè)過(guò)程中錯(cuò)過(guò)的 ,可作為后者的補(bǔ)充。在人群篩查及臨床診療中,為科學(xué)選取采樣方式,需要評(píng)估不同臨床樣本病毒載量,如鼻咽拭子、血尿、糞便、肺泡灌洗液等,由于數(shù)字PCR可提供一定程度上量化指標(biāo),為采樣方法的選取提供了參考,從而提高檢出率。在外防輸入的戰(zhàn)略要求下,環(huán)境病毒檢測(cè)工作尤為重要,數(shù)字PCR可對(duì)低核酸豐度樣本進(jìn)行有效檢測(cè),包括從不同環(huán)境中取樣的樣本,如病房、醫(yī)院衛(wèi)生間、實(shí)驗(yàn)室等等,在病情防控中起到了不可忽視的作用。此外,數(shù)字PCR的應(yīng)用場(chǎng)景還有病程不同階段的病毒載量評(píng)估、核酸參考品制備、抗病毒藥物研發(fā)等環(huán)節(jié)。法國(guó)國(guó)產(chǎn)數(shù)字PCR分析應(yīng)用數(shù)字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一種核酸分子定量技術(shù)。
對(duì)于檢測(cè)需要高靈敏度以及技術(shù)確認(rèn)的情況下,數(shù)字PCR技術(shù)也可以發(fā)揮重要作用。技術(shù)數(shù)據(jù)表明,數(shù)字PCR技術(shù)對(duì)的比較低檢測(cè)下限可到2copies/ml,比qPCR靈敏度提升了100倍。經(jīng)測(cè)試,數(shù)字PCR在檢測(cè)和診斷的某些方面優(yōu)于金標(biāo)準(zhǔn)qPCR,尤其是在低病毒載量樣本中,相比起qPCR,數(shù)字PCR特異性、靈敏度、重現(xiàn)性和檢測(cè)限受影響更小。因此,未來(lái)預(yù)計(jì)數(shù)字PCR技術(shù)也將在類(lèi)疾病中得到更加廣的應(yīng)用。數(shù)字PCR的應(yīng)用甚廣,除了可應(yīng)用于進(jìn)行突變的檢測(cè)以外,也可運(yùn)用于基因擴(kuò)增的檢測(cè)。通過(guò)數(shù)字PCR技術(shù)可建立多重?zé)晒怏w系,用于同時(shí)檢測(cè)比如非小細(xì)胞肺中常見(jiàn)的MET和HER2耐藥擴(kuò)增。有研究報(bào)道,使用數(shù)字PCR技術(shù)對(duì)436例非小細(xì)胞肺樣品進(jìn)行檢測(cè),并挑選樣本驗(yàn)證了數(shù)字PCR與RNA fish的檢測(cè)一致性。結(jié)果表明,該數(shù)字PCR技術(shù)在保證了基因擴(kuò)增檢測(cè)準(zhǔn)確性的同時(shí),還節(jié)約了檢測(cè)時(shí)間。
基于數(shù)字PCR技術(shù)平臺(tái),塔歌生物成功地開(kāi)發(fā)了胎兒染色體非整倍體(T21,T18和T13)無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查試劑盒(數(shù)字PCR-NIPT),并已完成數(shù)百例臨床樣本驗(yàn)證。數(shù)字PCR-NIPT的陽(yáng)性檢出率和NGS相似,且成本接近血清學(xué),可以在上述應(yīng)急策略中取代血清學(xué)作為靈敏度和特異性更高的初篩方法,以有效提高陽(yáng)性檢出率,降低需要復(fù)篩的假陽(yáng)性樣本數(shù)和節(jié)省總的篩查成本。數(shù)字PCR應(yīng)用前景廣闊,可用于病原微生物檢測(cè)、基因檢測(cè)、無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查、測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證等領(lǐng)域。但目前,大多數(shù)醫(yī)院采購(gòu)的數(shù)字PCR儀器是用于科研層面,在臨床應(yīng)用上仍處于起步階段,未得到普遍應(yīng)用。國(guó)產(chǎn)dPCR企業(yè)在上述應(yīng)用領(lǐng)域不斷與伯樂(lè)、賽默飛、羅氏、凱杰、因美納等頭部企業(yè)展開(kāi)競(jìng)爭(zhēng),搶占市場(chǎng)份額。
3D數(shù)字PCR為液體活檢提供技術(shù)支持液體活檢是一種非侵入性的檢測(cè)基因及臨床效果的一種方法,目前可能正在開(kāi)展有關(guān)3D數(shù)字PCR在在液體活檢中的療效,為后期臨床提供更多可靠的指導(dǎo)作用。報(bào)道稱(chēng)“無(wú)創(chuàng)傷性肺檢測(cè)技術(shù)即將登陸中國(guó)”。隨著基因檢測(cè)技術(shù),如類(lèi)似3D數(shù)字PCR技術(shù)的發(fā)展,推動(dòng)我們將進(jìn)入了“DNA的應(yīng)用商城”這樣的新時(shí)代,如23andme、華大基因等專(zhuān)業(yè)的檢測(cè)服務(wù)機(jī)構(gòu),提供更加專(zhuān)業(yè)的基因檢測(cè)結(jié)果,經(jīng)基因報(bào)告解讀師或遺傳咨詢(xún)師進(jìn)行通俗的解讀,讓我們每一個(gè)人都能夠了解自己的基因,擁有自己的“生命之書(shū)”,讓我們更加健康的生活。精細(xì)醫(yī)療其實(shí)本質(zhì)是應(yīng)用生物學(xué)信息與大數(shù)據(jù)科學(xué)的交叉發(fā)展的新型醫(yī)學(xué)概念與醫(yī)療模式。對(duì)于精細(xì)醫(yī)療,重點(diǎn)在于“精細(xì)”,不僅只是簡(jiǎn)單的基因測(cè)序如此簡(jiǎn)單,更需要精細(xì)的診斷與精細(xì)的。經(jīng)過(guò)PCR循環(huán)之后,有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào),沒(méi)有模板的反應(yīng)器就沒(méi)有熒光信號(hào)。廣東醫(yī)療系統(tǒng)認(rèn)證數(shù)字PCR熒光通道
數(shù)字PCR具有諸多優(yōu)點(diǎn),但也存在一定的不足,如成本高、儀器操作復(fù)雜、經(jīng)濟(jì)效益低等。上海進(jìn)口數(shù)字PCR系統(tǒng)
PCR常使用目標(biāo)序列的拷貝數(shù)或某一給定樣品中轉(zhuǎn)基因的百分比來(lái)體現(xiàn)方法靈敏度。由于qPCR和dPCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程所用試劑的兼容性較好,在使用dPCR進(jìn)行轉(zhuǎn)基因檢測(cè)時(shí),通常直接參照qPCR的方法。使用不同技術(shù)對(duì)相同樣品檢測(cè)時(shí),兩種方法的靈敏度是否具有可比性成為關(guān)注的問(wèn)題。Burns等21]使用Fluidigm公司的12.765(12板,每板765個(gè)微單元)芯片數(shù)字PCR分析儀測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-AD413檢測(cè)轉(zhuǎn)基因玉米MON810。該小組應(yīng)用dPCR技術(shù)評(píng)估在qPCR定義下的靈敏度數(shù)值,在拷貝數(shù)200-700之間,dPCR與qPCR的測(cè)量結(jié)果具有一致性。但與qPCR的靈敏度相比,dPCR在低于拷貝數(shù)200時(shí)有被低估的風(fēng)險(xiǎn),在高于拷貝數(shù)1000時(shí)有被高估的風(fēng)險(xiǎn)。dPCR在同一陣列上同時(shí)測(cè)量轉(zhuǎn)基因和內(nèi)源性靶點(diǎn)時(shí),需要稀釋內(nèi)源性靶點(diǎn)和轉(zhuǎn)基因靶點(diǎn)在合理拷貝數(shù)范圍內(nèi)以保證dPCR測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。上海進(jìn)口數(shù)字PCR系統(tǒng)
廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司公司是一家專(zhuān)門(mén)從事數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀產(chǎn)品的生產(chǎn)和銷(xiāo)售,是一家服務(wù)型企業(yè),公司成立于2015-04-17,位于廣州市黃埔區(qū)銳豐三街4號(hào)617房。多年來(lái)為國(guó)內(nèi)各行業(yè)用戶(hù)提供各種產(chǎn)品支持。臻準(zhǔn),美國(guó)艾科浦,銳訊生物,Sysmex,Eprerdia目前推出了數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀等多款產(chǎn)品,已經(jīng)和行業(yè)內(nèi)多家企業(yè)建立合作伙伴關(guān)系,目前產(chǎn)品已經(jīng)應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域。我們堅(jiān)持技術(shù)創(chuàng)新,把握市場(chǎng)關(guān)鍵需求,以重心技術(shù)能力,助力精細(xì)化學(xué)品發(fā)展。廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司研發(fā)團(tuán)隊(duì)不斷緊跟數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀行業(yè)發(fā)展趨勢(shì),研發(fā)與改進(jìn)新的產(chǎn)品,從而保證公司在新技術(shù)研發(fā)方面不斷提升,確保公司產(chǎn)品符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和要求。廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司嚴(yán)格規(guī)范數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀產(chǎn)品管理流程,確保公司產(chǎn)品質(zhì)量的可控可靠。公司擁有銷(xiāo)售/售后服務(wù)團(tuán)隊(duì),分工明細(xì),服務(wù)貼心,為廣大用戶(hù)提供滿(mǎn)意的服務(wù)。