菌種培養(yǎng)基

培養(yǎng)基分類有哪些？營養(yǎng)缺陷型：野生型菌株經(jīng)過人工誘變或者自然突變失去合成某種營養(yǎng)（氨基酸，維生素，核酸等）的能力，只有在基本培養(yǎng)基中補充所缺乏的營養(yǎng)因子才能生長，稱為營養(yǎng)缺陷型（auxotroph）。營養(yǎng)缺陷型是一種生化突變株，它的出現(xiàn)是由基因突變引起的。遺傳信息的載體是一系列為酶蛋白編碼的核酸系列，如果核酸系列中某堿基發(fā)生突變，由該基因所控制的酶合成受阻，該菌株也因此不能合成某種營養(yǎng)因子，使正常代謝失去平衡。有機磷細菌培養(yǎng)基不含瓊脂 細胞壁缺陷型細菌培養(yǎng)基YPG培養(yǎng)基有機磷細菌培養(yǎng)基肉湯培養(yǎng)基(測磷細菌菌數(shù))。菌種培養(yǎng)基

培養(yǎng)基按成分分類有哪些？按形態(tài)分類：培養(yǎng)基按其不同的物理狀態(tài)，可分為液體、流體、半固體和固體4類，培養(yǎng)基的物理狀態(tài)取決于培養(yǎng)基中是否加人凝固劑或凝固劑的加入量。1、液體培養(yǎng)基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固劑，常溫下以完全液態(tài)存在的培養(yǎng)基，如肉湯培養(yǎng)基或一般液體增菌培養(yǎng)基。2、流體培養(yǎng)基(semi-liquidmedium)在液體培養(yǎng)基中加入0.05%~0.1%的瓊脂粉，使其具一定黏度，即成流體培養(yǎng)基。加入瓊脂粉增加了培養(yǎng)基的黏度，降低空氣中的氧氣進人培養(yǎng)基的速度，能使培養(yǎng)基保持較長時間的厭氧條件，有利于一般厭氧菌的生長繁殖，如硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基等。一般用于霉菌和厭氧菌檢查的液體培養(yǎng)基中可加人少量瓊脂使其成為流體培養(yǎng)。LES遠藤氏瓊脂培養(yǎng)基PTYG培養(yǎng)基 改良巴爾斯氏培養(yǎng)基基礎不含硫酸亞鐵銨 BM液體培養(yǎng)基 BM固體培養(yǎng)基 PS培養(yǎng)基/消化球菌肉湯培養(yǎng)基。

總體而言，所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機鹽、生長因子、水及能源，但由于微生物營養(yǎng)類型復雜，不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的，因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡單的無機物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復雜的有機物，因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以（或應該）由簡單的無機物組成。例如，培養(yǎng)化能自養(yǎng)型的氧化硫硫桿菌（Thiobacillus thiooxdans）的培養(yǎng)基組成見表3.9。在該培養(yǎng)基配制過程中并未專門加入其他碳源物質(zhì)，而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。

動物細胞培養(yǎng)必需的溶液，平衡鹽水（BSS）：Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎溶液。PH調(diào)整液：3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液（二羥乙基哌嗪乙烷磺酸）細胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。1)青、鏈霉素，每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素。2)卡那霉素：終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液。3）制霉菌素：濃度25U/ml，小瓶分裝，每瓶一次用完。常用的動物血清主要有牛血清和馬血清。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清，前者來源少，價格高；后者要求剛產(chǎn)下尚未哺乳的小牛，因為哺乳后的小牛血清中可能含有更復雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖等。蛋白質(zhì)主要是白蛋白和球蛋白。自誘導SB肉湯培養(yǎng)基 2×YT瓊脂 雙倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液。

培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi)，以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同，一般來講，細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長。值得注意的是，在微生物生長繁殖和代謝過程中，由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累，會導致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化，若不對培養(yǎng)基pH條件進行控制，往往導致微生物生長速度下降或（和）代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此，為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定，通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑，常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽（如KH2PO4和K2HPO4）組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性，KH2PO4溶液呈酸性，兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8。當培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導致H+濃度增加時，H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物，培養(yǎng)基pH不會過度降低；如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加，OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物，培養(yǎng)基pH也不會過度升高。使用說明稱取本品21.5g于1L蒸餾水或去離子水中加熱煮沸至完全溶解分裝115℃高壓滅菌30分鐘冷卻備用.特制霉菌及酵母菌培養(yǎng)基

乳酸菌氯霉素肉湯1 乳酸菌氯霉素瓊脂2 Raka-Ray瓊脂 改良M17培養(yǎng)基AAM培養(yǎng)基 LC瓊脂。菌種培養(yǎng)基

1951年厄爾開發(fā)了供動物細胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當多。合成培養(yǎng)基成分已知，便于對實驗條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比，有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代，因此，細胞培養(yǎng)中使用的基礎合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分，以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復雜，各種生物大小分子混合在一起，有些成分至今尚未搞清楚。血清對細胞生長很有效，但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質(zhì)量的動物血清來源有限，成本高，限制了它的大量使用。無血清培養(yǎng)基不加動物血清，在基礎培養(yǎng)基中加入細胞生長有效因子等。菌種培養(yǎng)基

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