粘液染色法:粘液一般有以下幾點特性:(1)對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。(2)對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。(4)溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,結(jié)果;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,核呈藍(lán)色。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點是能同時顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,水洗。(6)常規(guī)脫水、封片擁有千錘百煉的專業(yè)人才隊伍,保證實驗快速、有效的完成。浙江哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒推薦廠家
特殊染色化學(xué)試劑的選擇:化學(xué)試劑的選擇主要針對自配試劑而言,對于商品化試劑盒則在于染液質(zhì)量。1、一般要求選用很好品牌的化學(xué)試劑,特別是一些染色中關(guān)鍵的試劑。很好的化學(xué)試劑(如Sigma、國藥、阿拉丁、西隴等)是保證高質(zhì)量染液的前提和關(guān)鍵,特別對于染液中的關(guān)鍵試劑尤為重要。如堿性品紅在一些染色液(抗酸、無色品紅、醛品紅等)中均為主要試劑,其質(zhì)量決定了較終的染色效果。如配制無色品紅染液時,所使用的偏重亞硫酸鈉試劑質(zhì)量不合格,則會導(dǎo)致染液配制失敗,無法染出合格的切片。2、純度一般以分析純?yōu)橹鳌U憬募疑a(chǎn)糖原染色試劑盒推薦廠家本試劑盒適用于骨髓細(xì)胞涂片,血液細(xì)胞涂片。
糖原染色法:染色原理細(xì)胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色,沉積在細(xì)胞內(nèi)多糖所在之處。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加過碘酸溶液,氧化5min;3.蒸餾水洗10min;4.滴加Schiff試劑,侵染10-20min;5.傾去Schiff試劑,流水沖洗10min;6.滴加蘇木素染色液,染核1-2min;7.流水沖洗5min;8.酸性乙醇分化液分化~
糖原及粘液染色法注意事項:1、糖原的固定要及時,而且標(biāo)本要新鮮。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧?。其次考慮堿性品紅本身,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,但不同批號,其效果就可能不同,應(yīng)特別引起注意~切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。
糖原染色――檢查項目的注意細(xì)節(jié):其判斷標(biāo)準(zhǔn)隨細(xì)胞不同而異,一般分為5級,即0~4級。糖原染色――檢查項目的一般步驟:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復(fù)染20min,水洗,晾干。糖原染色――檢查項目結(jié)果解讀:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復(fù)染20min,水洗,晾干。再糖原染色,可鑒別是糖原還是其他多糖類物質(zhì)。浙江如何使用糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價
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注意事項:染色前:①切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。②撈片時,較好一張玻片撈一個組織,組織較好位于玻片的中間,美觀的同時也利于脫蠟(有時二甲苯的液面低于組織片的時候,達(dá)不到脫蠟的目的)。③石蠟切片脫蠟到水時,一定要注意組織切片脫蠟務(wù)必要徹底(脫蠟時間不能太少)以使脫蠟后的組織達(dá)到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面,在染色時染色液未能充分與組織接觸,較終導(dǎo)致染色效果不佳,甚至染不上顏色。④在染色過程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙,以避免脫蠟時把標(biāo)簽紙也浸沒,致使標(biāo)簽紙上的膠黏到玻片上,造成染色不佳。浙江哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒推薦廠家