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有的外泌體分離方法需要高速離心,需要使用大型機(jī)器,耗費(fèi)近24小時(shí)的時(shí)間才能獲得,非常不便。而高離心力也可能破壞囊泡。降低樣品的質(zhì)量。這項(xiàng)研究有望解決這一難題。在論文中,研究人員們提供了一種通過(guò)微流體和聲學(xué)的獨(dú)特組合從體液樣品中捕獲外泌體的新穎方法。他們開(kāi)發(fā)的原始聲學(xué)分選裝置由兩個(gè)傾斜的聲學(xué)換能器和一個(gè)微流體通道組成,當(dāng)這些傳感器產(chǎn)生的聲波相互碰撞時(shí),形成產(chǎn)生一系列壓力節(jié)點(diǎn)的駐波。每當(dāng)細(xì)胞或顆粒流過(guò)通道并遇到一個(gè)節(jié)點(diǎn)時(shí),壓力會(huì)將細(xì)胞引導(dǎo)離開(kāi)中心一點(diǎn)點(diǎn)。細(xì)胞移動(dòng)的距離取決于大小和其他屬性(如可壓縮性),這樣,當(dāng)?shù)竭_(dá)通道末尾時(shí),不同大小和性質(zhì)的細(xì)胞就能夠被分離開(kāi)來(lái)。這種方法分離得到的外泌體,基本上不改變其生物或物理特征,為開(kāi)發(fā)評(píng)估人類(lèi)健康以及疾病診斷和進(jìn)展提供了有吸引力的新方法。用無(wú)菌針管吸取上層含有外泌體的液體,置于80℃儲(chǔ)存?zhèn)溆谩:戏收?guī)外泌體提取試劑哪家好
外泌體的提取方法:1.超速離心法(差速離心)。超離法是較常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行,可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡(jiǎn)單,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,但過(guò)程比較費(fèi)時(shí),且回收率不穩(wěn)定(可能與轉(zhuǎn)子類(lèi)型有關(guān)),純度也受到質(zhì)疑;此外,重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害,從而降低其質(zhì)量。2.密度梯度離心。在超速離心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,是一種區(qū)帶分離法。通過(guò)密度梯度離心,樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,但步驟繁瑣,耗時(shí),對(duì)離心時(shí)間極為敏感。外泌體提取試劑報(bào)價(jià)外泌體在免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長(zhǎng)與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。
當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類(lèi)等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過(guò)以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而啟動(dòng)靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,從而啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。有報(bào)道稱(chēng)一些外泌體膜上蛋白在其來(lái)源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。
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人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類(lèi)等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過(guò)以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,從而細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。有報(bào)道稱(chēng)一些外泌體膜上蛋白在其來(lái)源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA獲得的外泌體純度較高,但步驟繁瑣,耗時(shí)。深圳正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷(xiāo)
多聚物沉淀法早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體。合肥正規(guī)外泌體提取試劑哪家好
外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來(lái)的微小囊泡,直徑約為30-200nm,密度在1.13-1.21g/ml,具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu),天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類(lèi)型的細(xì)胞(免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞),都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA,Exosome可通過(guò)細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞,也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA,甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞,參與細(xì)胞間通訊。Exosome在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、血管生成、凋亡、凝血和廢物處理等生理過(guò)程發(fā)揮關(guān)鍵作用,不同細(xì)胞來(lái)源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同,可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物,也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病。miRNA是一類(lèi)22nt左右大小的非編碼分子,它可以通過(guò)外泌體從一個(gè)地方轉(zhuǎn)運(yùn)到另外一個(gè)地方行使基因沉默功能。通過(guò)檢測(cè)外泌體中miRNA表達(dá)變化,可以發(fā)現(xiàn)外泌體中miRNA特異性功能。合肥正規(guī)外泌體提取試劑哪家好