可以通過pas染色計算糖原含量嗎:PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì).具體現(xiàn)象例舉:陽性反應(yīng),胞漿呈紅色,陰性反應(yīng),胞漿呈無色;在正常血片中RBC不染色;PLT染成深紅色;中性粒細胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細胞有陽性顆粒;單核細胞的胞漿染成淡紅色,可含有細小或粗大陽性顆粒;少數(shù)淋巴細胞的胞漿內(nèi)含有少許小的淡紅色或紅色顆粒;正常骨髓的幼稚細胞和有核RBC都不染色;巨核細胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.巨核細胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.顏色深淺與濃度相關(guān)。對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍有異染性。江蘇咨詢糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
纖維染色:彈力纖維是結(jié)締組織發(fā)生形成較晚的一種纖維,在創(chuàng)傷修復(fù)中一般在4—5周才有較明顯的彈力纖維形成。彈力纖維艱固、較小而彈性較大,容易伸展,在結(jié)締組織起彈性作用。彈力纖維由彈性蛋白組成,新鮮時呈黃色又稱黃纖維。彈力纖維纖維分枝連成網(wǎng),折光性強,含量多時在HE染片上呈折光性強的粉紅色,量少的不顯色。故量多時與膠原纖維不易區(qū)別,量少則不能觀察。彈力纖維染色主要用于觀察彈力纖維有無增生、腫脹、斷裂、破碎及萎縮或缺如等病變。安徽哪家提供糖原染色試劑盒報價操作簡單方便,1h內(nèi)即可完成反應(yīng)。
糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng)。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO42H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,一般可用3個月,變黃則失效。
糖原及粘液染色法注意事項:1、糖原的固定要及時,而且標(biāo)本要新鮮。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧?。其次考慮堿性品紅本身,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,但不同批號,其效果就可能不同,應(yīng)特別引起注意糖原染色顯示在肝或心肌細胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。
染色的一般原則:1.熒光素產(chǎn)品一般為微量試劑,取用前請離心集液,以及避光保存和使用。建議您在收到產(chǎn)品之后,分裝為小份避光保存于-20℃,即用即取。2.式細胞儀只可檢測單細胞懸液,如使用組織樣本,首先必須制備成單細胞懸液,細胞數(shù)量不應(yīng)低于1X106/ml。3.推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測??蓪⒁让赶蠹毎谋4嬖诤?%BSA的PBS中,防止進一步的損傷。對臨床樣本進行染色,以便樣本的進一步篩查和檢測。福建提供糖原染色試劑盒廠家直銷
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糖原D-PAS染色液注意事項:1、切片脫蠟應(yīng)盡量干冷,否則影響染色效果。需使用一張陽性對照片驗證酶的活性。2、過碘酸氧化時間不宜過久,氧化時溫度以18~22℃較佳。3、試劑(A)、試劑(B)、試劑(C)、應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時避免接觸過多的陽光和空氣,使用前較好提前取出恢復(fù)到在室溫后,避光暗處使用。4、酸性乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,其分化時間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和酸性乙醇分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠。5、在過碘酸溶液和SchiffReagent中作用時間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織類別等決定。6、況冶切片染色時間盡量要短。江蘇咨詢糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)