基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)又稱PCR實(shí)驗(yàn)，其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加，PCR是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的常規(guī)方法，應(yīng)用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域，例如:特定基因的檢測(cè)和診斷，DNA指紋、個(gè)體識(shí)別、親子鑒定及法醫(yī)物證，動(dòng)、植物檢疫，動(dòng)物及其衍生產(chǎn)品檢測(cè)，動(dòng)物飼料、化妝品、食品衛(wèi)生檢測(cè)，轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因微生物檢測(cè)等。PCR實(shí)驗(yàn)室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域并設(shè)有走廊，各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間，工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔的，各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志，不能直通，如果緊密相連，需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)，擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開。實(shí)驗(yàn)材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等，只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，即從試劑準(zhǔn)備區(qū)→樣品制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，不得逆向流動(dòng)。實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，不得逆向流動(dòng)。各工作區(qū)頂部應(yīng)安裝紫外燈，紫外燈的波長(zhǎng)為254nm，每20㎡一支40W的紫外燈。實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀主要應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)檢測(cè)、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等。PCR儀價(jià)格行情
實(shí)驗(yàn)室各區(qū)功能及主要設(shè)備：1、試劑準(zhǔn)備區(qū):主要進(jìn)行試劑的制備、分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過(guò)其它區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。本區(qū)主要設(shè)備有天平、冰箱、離心機(jī)、加樣器、振蕩器等。對(duì)于氣流壓力的控制，本區(qū)并沒(méi)有嚴(yán)格的要求。2、樣品制備區(qū):主要進(jìn)行樣品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定DNA的合成。本區(qū)主要設(shè)備有冰箱、生物安全柜、離心機(jī)、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎?，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。3、擴(kuò)增區(qū):主要進(jìn)行DNA擴(kuò)增。此外，已制備的DNA模板(來(lái)自樣品制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。本區(qū)主要設(shè)備有:擴(kuò)增儀、冰箱、離心機(jī)、加樣器等。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。4、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定。本區(qū)主要設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等。本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。上海力康實(shí)時(shí)熒光PCR儀參考價(jià)格PCR可用于檢測(cè)特定細(xì)胞或生物體中等位基因的序列差異。
1．一般性原則(1)長(zhǎng)度：一般引物互補(bǔ)區(qū)的長(zhǎng)度為16-25bp，引物互補(bǔ)區(qū)的4×(G十C)十2×(A十T)不要沒(méi)有必要大于70，一般也不要低于50(2)G十c含量：好在45％一55％之間，但有時(shí)受模板限制，無(wú)法理想化。但在有幾種選擇時(shí)，可以把G十c含量接近50%作為參數(shù)之一(3)堿基分布的隨機(jī)性：應(yīng)避免連續(xù)出現(xiàn)4個(gè)以上的單一堿基。尤其是不應(yīng)在其3’端出現(xiàn)超過(guò)3個(gè)的連續(xù)G或C，否則會(huì)使引物在G十C富集序列區(qū)錯(cuò)誤引發(fā)。(4)引物自身：不能含有很長(zhǎng)的牢固的自身互補(bǔ)序列，尤其是引物3‘端回折形成的發(fā)夾不要一般超過(guò)3堿基，否則會(huì)影響引物與模板的結(jié)合(5)引物之間：兩個(gè)引物之間不應(yīng)有很長(zhǎng)的牢固的互補(bǔ)或同源堿基，尤應(yīng)避免3’端的互補(bǔ)重疊。2.具體原則①引物長(zhǎng)度；特異性一般通過(guò)引物長(zhǎng)度和退火溫度控制。如果PCR的退火溫度設(shè)置在近于引物Tm值（引物/模板雙鏈體的解鏈溫度）幾度的范圍內(nèi)，18到24個(gè)堿基的寡核苷酸鏈?zhǔn)怯泻芎玫男蛄刑禺愋缘摹Ｒ镌介L(zhǎng)，擴(kuò)增退火時(shí)被引發(fā)的模板越少。為優(yōu)化PCR反應(yīng)，使用確保溶解溫度不低于54℃的短的引物，可獲得好的效率和特異性?？偟膩?lái)說(shuō)，好在特異性允許的范圍內(nèi)尋求安全性。每增加一個(gè)核苷酸，引物特異性提高4倍；這樣，大多數(shù)應(yīng)用的短引物長(zhǎng)度為18個(gè)核苷酸。
血友病是一組**為常見的遺傳性凝血障礙，根據(jù)因子缺陷的不同分為甲、乙兩型，（Ⅷ、Ⅸ因子缺陷），也有復(fù)合型血友病，但不常見。甲型血友病發(fā)病率為1/10000，Ⅷ因子基因位于G6PD基因附近，全長(zhǎng)186Kb，大范圍的基因重排（缺失、插入、重復(fù)）導(dǎo)致甲型血友病的病例很少，*為Ⅷ因子缺陷的5%，大部分病人表現(xiàn)為單個(gè)或少數(shù)堿基的突變。由于Ⅷ因子基因長(zhǎng)度為186Kb，突變位點(diǎn)多，而且新生突變頻率高，從臨床角度講不能對(duì)每一個(gè)突變都檢測(cè)，可對(duì)**為常見的幾種突變類型進(jìn)行檢測(cè)，主要的檢測(cè)手段是PCR結(jié)合RELP分析。乙型血友病發(fā)病率占血友病的20%，其基因變化及檢測(cè)方法與甲型血友病類似。區(qū)別雄性及雌性的物質(zhì)基礎(chǔ)是性染色體，哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育中，雌性表型不需要任何調(diào)節(jié)，而雄性表型則由多因素決定，位于Y染色體上的指導(dǎo)雄性性別分ss化的基因命名為睪丸決定因子（TDF）?，F(xiàn)代研究表明，SRY（Sex-determiningregionofYchromosome）基因是TDF基因，位于Y染以體短臂末端。SRY區(qū)缺失易導(dǎo)致46XY核型個(gè)體發(fā)育成女性。進(jìn)行基因檢測(cè)可以檢出SRY基因組的易位及缺失，從而診斷性別發(fā)育異常，這一探索性別異常的研究非常熱門。另外還有一種46XY核型異常的病人即睪丸女性化，這是用于雄***受體。 PCR也被應(yīng)用于目標(biāo)DNA的片段克隆，該技術(shù)被稱為 PCR 克隆。
PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶適反應(yīng)溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈。PCR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備，能在95℃，55℃，72℃之間很好地進(jìn)行溫度控制。PCR擴(kuò)增儀又稱為PCR基因擴(kuò)增儀、PCR核酸擴(kuò)增儀、聚合酶鏈反應(yīng)核酸擴(kuò)增儀，是利用PCR(Polymerasechainreaction，聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)對(duì)特定DNA擴(kuò)增的一種儀器設(shè)備，被運(yùn)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中，例如用于判斷檢體中是否會(huì)表現(xiàn)某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復(fù)制以及親子鑒定等。 PCR一般指聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。檢驗(yàn)室國(guó)產(chǎn)PCR儀價(jià)格比較
PCR反應(yīng)的特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性。PCR儀價(jià)格行情
Heal Force集研發(fā)、制造、銷售、服務(wù)為一體，專注于為您提供完善的醫(yī)療及實(shí)驗(yàn)室解決方案，力新儀器（上海）有限公司是集團(tuán)下屬銷售運(yùn)營(yíng)中心。經(jīng)過(guò)三十年的持續(xù)創(chuàng)新和高速發(fā)展，集團(tuán)逐步實(shí)現(xiàn)了從貿(mào)易起步，向多元化發(fā)展的質(zhì)的跨越。集團(tuán)包括醫(yī)療、保健和實(shí)驗(yàn)室等專業(yè)領(lǐng)域，持續(xù)衍生出各類成熟的產(chǎn)品線。自有品牌“Heal Force”在業(yè)內(nèi)享盛譽(yù)，現(xiàn)有OR手術(shù)室系列、ICU重癥麻醉系列、Maternal&Infant 圍產(chǎn)產(chǎn)品系列、Rehabilitation康復(fù)醫(yī)療系列、Laboratory生命科學(xué)儀器系列、Healthcare家用健康產(chǎn)品多條產(chǎn)品線。PCR儀價(jià)格行情
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