PCR基因擴(kuò)增法在遺傳性疾病產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用,遺傳病是由于遺傳物變化而引起的機(jī)體某一功能或缺陷或異常所致的疾病,其根本變化在于遺傳物質(zhì)。地中海貧血(Thalassemia)是一種遺傳性慢性溶血性貧血病,是世界上常見(jiàn)且發(fā)病比高的一種單基因遺傳病。在兩廣、貴州、四川等地發(fā)病率較高,在廣西等地高達(dá)15%。地中海貧血是由于基因突變?cè)斐芍榈鞍椎牟黄胶?,使結(jié)構(gòu)正常的肽鏈合成量減少甚至沒(méi)有合成表現(xiàn)為溶血性貧血。接受累基因種類分為α、β、γ等,其中以α、β地貧為常見(jiàn),危害了大。珠蛋白基因簇位于人6號(hào)染色短臂上,有兩個(gè)重復(fù)基因基因位于α1、α2、兩個(gè)α基因及其旁側(cè)序列有很大的同源性,易出現(xiàn)染色體不等交換,導(dǎo)致α基因缺失-α地貧。α地貧基因部分缺失有α1基因部分缺失、α2基因缺失、α1及α2基因同時(shí)缺失及非缺失型地貧??梢詰?yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增α1、α2基因從而檢測(cè)這些基因是否缺失、突變等,從而對(duì)α型地中海貧血作出診斷。β地中海貧血基因缺陷主要表現(xiàn)為基因序列中單一核苷酸的突變,或少數(shù)堿基的缺失、插入,使正常β珠蛋白肽鏈合成減注或缺失。應(yīng)用位點(diǎn)特異性寡核苷探針(Aso)進(jìn)行PCR產(chǎn)物斑點(diǎn)雜交即可對(duì)其作出診斷。 PCR儀是利用DNA聚合酶進(jìn)行專一性的連鎖復(fù)制。上海國(guó)產(chǎn)PCR儀近期價(jià)格
儀器制冷部件可以在完成擴(kuò)增后降溫至4℃,保存樣品過(guò)夜。缺點(diǎn):管內(nèi)反應(yīng)液溫度比鋁塊顯示溫度滯后;須使用特制且與鋁塊凹孔形狀緊密吻合的薄壁耐熱反應(yīng)管;變溫時(shí)難以快速克服鋁塊的熱容量;壓縮機(jī)制冷啟動(dòng)慢、重量大、滯后時(shí)間長(zhǎng)。2.水浴式PCR儀儀器本身有3個(gè)不同溫度的水浴,用機(jī)械裝置將帶有反應(yīng)管的架子移位和升降溫度,使溫度循環(huán)。優(yōu)點(diǎn):水為傳熱介質(zhì),溫度易恒定,熱容量大;反應(yīng)管形狀無(wú)特殊要求,溫度轉(zhuǎn)換較快擴(kuò)增效果穩(wěn)定;具有較高的運(yùn)行效率,擴(kuò)增產(chǎn)物特異性好。缺點(diǎn):高溫浴不穩(wěn)定,水面需用液體石蠟覆蓋;改變水浴溫度所需時(shí)間較長(zhǎng),不易實(shí)施復(fù)雜程序(如套式PCR)的操作,儀器體積較大;室溫影響溫度下限。3.變溫式流式PCR儀依據(jù)空氣流的動(dòng)力學(xué)原理,以冷熱氣流為介質(zhì)升降溫度。優(yōu)點(diǎn):變溫迅速,擴(kuò)增效果好,適合于微量、快速PCR;反應(yīng)器不受形狀限制,管外無(wú)需涂液體石蠟;測(cè)定管內(nèi)液體溫度作為控溫依據(jù),顯示溫度真實(shí)可靠;易于用微電腦設(shè)定復(fù)雜的變溫程序;易于制成重量較輕的便攜式儀器,適合外出作業(yè)。缺點(diǎn):以室溫為溫度下限,低溫難控制,對(duì)空氣流的動(dòng)力學(xué)要求較高,需精心設(shè)計(jì)才能使各管溫度均勻。 高校科研實(shí)驗(yàn)室國(guó)產(chǎn)PCR儀銷售電話只要樣本有一個(gè)病原體存在,PCR就可以檢測(cè)到。
熒光定量PCR儀因操作方便、運(yùn)行速度快、實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確,受到越來(lái)越多的分子生物學(xué)研究者青睞。在實(shí)驗(yàn)技術(shù)成熟的現(xiàn)今,難得不是實(shí)驗(yàn)技術(shù)上的問(wèn)題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實(shí)驗(yàn)室成員的意見(jiàn)、分析實(shí)驗(yàn)室目前乃至將來(lái)的需求、平衡實(shí)驗(yàn)室的預(yù)算,更要詳細(xì)研究各種極富誘惑力的宣傳資料。面對(duì)各種不同性能的產(chǎn)品,您又該如何選擇呢?首先建議大家走出認(rèn)識(shí)熒光定量PCR的兩個(gè)誤區(qū):誤區(qū)一:儀器通道越多越好隨著PCR技術(shù)的成熟運(yùn)用,多重?cái)U(kuò)增越來(lái)越熱鬧,熒光定量PCR儀也不能幸免。在使用有些廠家5通道的熒光定量?jī)x時(shí),為了確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精確性和準(zhǔn)確性都要在實(shí)驗(yàn)中使用ROX(一種熒光染料)或Referencedye,這些熒光染料都必須單獨(dú)使用一個(gè)檢測(cè)通道。這樣以來(lái),真正能檢測(cè)多重PCR熒光信號(hào)的有效通道只有4個(gè),而且使用校正染料可能會(huì)增加后期的使用成本。考慮多重?zé)晒舛縋CR的通道數(shù)的時(shí)候也應(yīng)該從實(shí)驗(yàn)室實(shí)際情況出發(fā),多重PCR并非人人適用、人人可用,因?yàn)樗箤?shí)驗(yàn)復(fù)雜化了。誤區(qū)二:real-timePCR儀無(wú)需梯度功能對(duì)于使用染料法的定量PCR反應(yīng),雖然有各種各樣的PCR引物設(shè)計(jì)軟件或者經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算熔解溫度(Tm值),但運(yùn)用的公式不同、引物序列不同。
在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個(gè)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)的PCR儀稱作熒光定量PCR儀。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同,只是PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過(guò)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號(hào)連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果輸出。把這種PCR儀叫做實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(qPCR儀)。熒光定量PCR儀有單通道、雙通道和多通道。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時(shí)候,選用單通道,有多熒光標(biāo)記的時(shí)候用多通道。單通道也可以檢測(cè)多熒光的標(biāo)記的目的基因表達(dá)產(chǎn)物,因?yàn)橐淮沃荒軝z測(cè)一種目的基因的擴(kuò)增量,需多次擴(kuò)增才能檢測(cè)完不同目的基因片段的量。主要用于醫(yī)學(xué)臨床檢測(cè)、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等機(jī)構(gòu)。根據(jù)DNA擴(kuò)增時(shí)升溫介質(zhì)的不同可以將PCR儀分為:變溫鋁塊式PCR儀、水浴式PCR儀和變溫式流式PCR儀。1.變溫鋁塊式PCR儀熱源用電阻絲、導(dǎo)電熱膜、熱泵式珀?duì)柼雽?dǎo)體元件制作,讓帶有凹孔的鋁塊升溫,用自來(lái)水、制冷壓縮機(jī)或半導(dǎo)體降溫。優(yōu)點(diǎn):溫度傳導(dǎo)快,各管的擴(kuò)增一致性好;反應(yīng)管規(guī)格一致時(shí)無(wú)須外涂石蠟油;可用微電腦調(diào)節(jié)溫度轉(zhuǎn)換。 PCR可用于檢測(cè)特定細(xì)胞或生物體中等位基因的序列差異。
選擇該物種使用頻率高的密碼子,以降低引物的簡(jiǎn)并性。③應(yīng)努力避免3’末端的簡(jiǎn)并,對(duì)于大多數(shù)氨基酸殘基來(lái)說(shuō),意味著引物3’末端不要位于密碼子的第三位。④在一些多義位置使用脫氧次黃嘌呤(dI)代替簡(jiǎn)并堿基。4.測(cè)序引物設(shè)計(jì)當(dāng)然,測(cè)序引物的設(shè)計(jì)一般都由測(cè)序公司來(lái)完成,如果需要自己設(shè)計(jì)的話;那么除了按照上面所提到的引物設(shè)計(jì)通用標(biāo)準(zhǔn)外,還需要注意兩點(diǎn):①測(cè)序引物的特異性的標(biāo)準(zhǔn)掌握應(yīng)該更嚴(yán)格一些,也就是說(shuō)設(shè)計(jì)時(shí)更優(yōu)先考慮特異性。因?yàn)樵跍y(cè)序反應(yīng)中,如果引物與模板在非預(yù)期位置退火并引發(fā)鏈延伸,會(huì)對(duì)結(jié)果對(duì)來(lái)很大的干擾甚至造成結(jié)果無(wú)法識(shí)讀。②測(cè)序引物的Tm值適當(dāng)高一些。現(xiàn)在大部分測(cè)序反應(yīng)均選用耐熱的測(cè)序級(jí)DNA聚合酶來(lái)催化,并采用PCR的熱循環(huán)程序。選用的測(cè)序引物的Tm值稍高一些,有助于使反應(yīng)順利跨過(guò)待測(cè)模板的二級(jí)結(jié)構(gòu)區(qū),也有助于降低非特異反應(yīng)。5.探針的設(shè)計(jì)探針的設(shè)計(jì),根據(jù)不同的用途各有其設(shè)計(jì)特點(diǎn),這里只是就通用的原則進(jìn)行討論:①探針的長(zhǎng)短一般在20-50核苷酸之間,過(guò)長(zhǎng)合成成本高,且易出現(xiàn)聚合酶合成錯(cuò)誤,雜交時(shí)間長(zhǎng)。太短則特異性下降。②注意G和C的含量努力控制在40-60%,同時(shí)一種堿基連續(xù)重復(fù)不超過(guò)4個(gè),以免非特異性雜交產(chǎn)生。 PCR實(shí)驗(yàn)室在儀器設(shè)備等硬件上要滿足開(kāi)展臨床檢驗(yàn)的條件,包括生物安全柜和PCR儀。力康實(shí)時(shí)定量PCR儀價(jià)格便宜
熒光定量PCR是近年發(fā)展起來(lái)的實(shí)時(shí)定量檢測(cè)特定核酸技術(shù),是核酸探針,熒光共振能量傳遞和PCR技術(shù)的有機(jī)結(jié)合.上海國(guó)產(chǎn)PCR儀近期價(jià)格
隨著科學(xué)技術(shù)發(fā)展,醫(yī)藥冷鏈物流技術(shù)不斷涌現(xiàn),同時(shí)在我國(guó)高度重視下,冷鏈物流標(biāo)準(zhǔn)逐漸完善。但我國(guó)醫(yī)藥健康仍存在體系不完善、物流成本高和技術(shù)、設(shè)施落后的問(wèn)題。在市場(chǎng)機(jī)遇與現(xiàn)存問(wèn)題面前,如何把握醫(yī)藥健康未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)顯得尤為重要。在《2019年本》鼓勵(lì)類條目中增加了“數(shù)字化手術(shù)室,實(shí)驗(yàn)室儀器,新生兒科設(shè)備,ICU重癥產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)”。在中藥產(chǎn)業(yè)領(lǐng)域,增加了“中藥飲片炮制技術(shù)傳承與創(chuàng)新,中藥經(jīng)典名方的開(kāi)發(fā)與生產(chǎn),中藥創(chuàng)新的研發(fā)與生產(chǎn)”等內(nèi)容。自2015年以來(lái),健康科技成為醫(yī)藥健康外商獨(dú)資企業(yè)增長(zhǎng)**快的領(lǐng)域。事實(shí)上,根據(jù)硅谷銀行的分析,有風(fēng)投支持的健康科技行業(yè)募資次數(shù)在這段時(shí)間增長(zhǎng)了25%,硅谷銀行與其中大約40%的歐美公司進(jìn)行了合作。三類:6815注射穿刺器械,6821醫(yī)用電子儀器設(shè)備(不含植入類重點(diǎn)監(jiān)管),6822醫(yī)用光學(xué)器具、儀器及內(nèi)窺鏡設(shè)備(不含植入類重點(diǎn)監(jiān)管),6823醫(yī)用超聲儀器及有關(guān)設(shè)備,6824醫(yī)用激光儀器設(shè)備,6825醫(yī)用高頻儀器設(shè)備,6826物理***及康復(fù)設(shè)備,6828醫(yī)用磁共振設(shè)備,6830醫(yī)用x射線設(shè)備,6832醫(yī)用高能射線設(shè)備,6833醫(yī)用核素設(shè)備,6845體外循環(huán)及血液處理 設(shè)備,6854手術(shù)室、急救室、診療室設(shè)備及器具,6858醫(yī)用冷療、低溫、冷藏設(shè)備及器具,6864醫(yī)用衛(wèi)生材料及敷料,6866醫(yī)用高分子材料及制品(不含重點(diǎn)監(jiān)管),6870軟件,6877介入器材(不含重點(diǎn)監(jiān)管)***是我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)重要組成部分之一,具有高產(chǎn)出、高危險(xiǎn)、高技術(shù)密集型特點(diǎn),有很強(qiáng)的技術(shù)壁壘。而且對(duì)于保護(hù)和增進(jìn)大家健康、提高生活質(zhì)量,為計(jì)劃生育、救災(zāi)防疫、**戰(zhàn)備以及促進(jìn)經(jīng)濟(jì)發(fā)展和社會(huì)進(jìn)步均具有十分重要的作用。上海國(guó)產(chǎn)PCR儀近期價(jià)格
力新儀器(上海)有限公司一直專注于三類:6815注射穿刺器械,6821醫(yī)用電子儀器設(shè)備(不含植入類重點(diǎn)監(jiān)管),6822醫(yī)用光學(xué)器具、儀器及內(nèi)窺鏡設(shè)備(不含植入類重點(diǎn)監(jiān)管),6823醫(yī)用超聲儀器及有關(guān)設(shè)備,6824醫(yī)用激光儀器設(shè)備,6825醫(yī)用高頻儀器設(shè)備,6826物理***及康復(fù)設(shè)備,6828醫(yī)用磁共振設(shè)備,6830醫(yī)用x射線設(shè)備,6832醫(yī)用高能射線設(shè)備,6833醫(yī)用核素設(shè)備,6845體外循環(huán)及血液處理 設(shè)備,6854手術(shù)室、急救室、診療室設(shè)備及器具,6858醫(yī)用冷療、低溫、冷藏設(shè)備及器具,6864醫(yī)用衛(wèi)生材料及敷料,6866醫(yī)用高分子材料及制品(不含重點(diǎn)監(jiān)管),6870軟件,6877介入器材(不含重點(diǎn)監(jiān)管)***,是一家醫(yī)藥健康的企業(yè),擁有自己**的技術(shù)體系。一批專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),是實(shí)現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)的基礎(chǔ),是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動(dòng)力。誠(chéng)實(shí)、守信是對(duì)企業(yè)的經(jīng)營(yíng)要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造***的數(shù)字化手術(shù)室,實(shí)驗(yàn)室儀器,新生兒科設(shè)備,ICU重癥產(chǎn)品。公司深耕數(shù)字化手術(shù)室,實(shí)驗(yàn)室儀器,新生兒科設(shè)備,ICU重癥產(chǎn)品,正積蓄著更大的能量,向更廣闊的空間、更寬泛的領(lǐng)域拓展。