3).無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細(xì)胞貧血(sicklecellanemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及。而有效的無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測(cè)孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí),可以100%的檢測(cè)出HBB基因突變[3],可以說(shuō)是相當(dāng)厲害了。Nacia數(shù)字PCRNaica數(shù)字PCR系統(tǒng)——簡(jiǎn)便、快速地完成3通道檢測(cè)Naica數(shù)字PCR系統(tǒng)是法國(guó)Stilla公司開(kāi)發(fā)的下一代核酸定量技術(shù)。使用cutting-edge微流體創(chuàng)新型芯片——Sapphire芯片作為數(shù)字PCR過(guò)程的耗材。樣品通過(guò)毛細(xì)通道網(wǎng)格以30,000個(gè)微滴的形式進(jìn)入2D芯片中,可稱作Crystal微滴。Naica數(shù)字PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)在芯片上實(shí)現(xiàn)。對(duì)微滴成像用以檢測(cè)包含擴(kuò)增片段的微滴。一步是對(duì)陽(yáng)性微滴計(jì)數(shù)從而得到的核酸數(shù)量。Naica數(shù)字PCR,結(jié)合了強(qiáng)大的圖像分析技術(shù)和直觀可視的檢測(cè)功能,從而達(dá)到了數(shù)字PCR定量的置信水平,獲得的數(shù)據(jù)真實(shí)可信。 PCR儀是為了解決在體外特異性地?cái)U(kuò)增某個(gè)基因的問(wèn)題,從而滿足對(duì)核酸的體外研究和應(yīng)用。國(guó)產(chǎn)核酸定量PCR儀規(guī)格有哪些
一對(duì)引物的Tm值相差盡量不超過(guò)2~3攝氏度,同時(shí)引物和產(chǎn)物的Tm值也不要相差太大,20攝氏度范圍內(nèi)較好。④引物的額外序列與退火溫度若有額外的序列信息要加到引物中,例如T7RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)、限制酶切位點(diǎn)或者GC發(fā)夾結(jié)構(gòu)可以使用加長(zhǎng)的引物。一般說(shuō)來(lái),引物5’端添加無(wú)關(guān)序列不會(huì)影響引物特異序列的退火。有時(shí)候,引物中添加了大量與模板不配對(duì)的堿基,可以在較低退火溫度的條件下進(jìn)行4到5個(gè)擴(kuò)增循環(huán);然后在假定引物5’端序列已經(jīng)加入到模板中,計(jì)算得出的退火溫度下進(jìn)行其余的循環(huán)。在引物上添加限制酶位點(diǎn)時(shí)一個(gè)重要的考慮是大多數(shù)限制酶的有效切割要求在它們的識(shí)別序列的5’端有2至3個(gè)非特異的額外堿基,這樣就會(huì)增加引物的非模板特異序列的長(zhǎng)度。長(zhǎng)引物序列的另一個(gè)缺點(diǎn)是影響溶解溫度的精確計(jì)算,而這對(duì)于確定PCR反應(yīng)時(shí)的退火溫度又是必須的。對(duì)于低于20個(gè)堿基的引物,Tm值可以根據(jù)Tm=4(G+C)+2(A+T)計(jì)算。而對(duì)于較長(zhǎng)的引物,Tm值需要考慮動(dòng)力學(xué)參數(shù)、從“近鄰位”的計(jì)算方式得到,現(xiàn)有的PCR引物設(shè)計(jì)軟件大多數(shù)都采用這種方式。⑤引物的3’末端核苷酸組成引物3’末端和模板的堿基完全配對(duì)對(duì)于獲得好的結(jié)果是非常重要的。 力康實(shí)時(shí)熒光PCR儀銷售價(jià)格實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀,由熒光定量系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)組成,用來(lái)監(jiān)測(cè)循環(huán)過(guò)程的熒光。
力康GM05智能梯度基因擴(kuò)增儀(控溫儀)性能特點(diǎn):高清晰超大7寸液晶顯示屏-可選鍍金/鍍銀模塊,提高熱傳導(dǎo)效率,使實(shí)驗(yàn)更高效;方便靈活的模塊更換裝置,輕松更換模塊;熱蓋旋鈕無(wú)級(jí)可調(diào),適用各型號(hào)試管;樣品座工作區(qū)域全密閉設(shè)計(jì),可確保低溫保存干燥清潔;可任意角度定位熱蓋;具備斷電記憶功能;環(huán)境溫度自動(dòng)讀取,自動(dòng)修正溫控誤差;支持用戶實(shí)驗(yàn)預(yù)約設(shè)定,鬧鐘提醒功能;支持程序搜索功能,支持常用程序優(yōu)先選擇功能;支持多重嵌套循環(huán);支持梯度PCR、TouchdownPCR、LongPCR設(shè)定;可外接移動(dòng)硬盤(pán)和鼠標(biāo),支持觸摸和鼠標(biāo)操作;可實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程故障判斷;具有TM值計(jì)算功能,可更好地幫助用戶進(jìn)行引物設(shè)計(jì);可單獨(dú)配備PC機(jī)操作軟件,PC機(jī)與主機(jī)可分別各自控制,并實(shí)現(xiàn)一機(jī)多控。
基因?qū)嶒?yàn)室與PCR實(shí)驗(yàn)室的規(guī)劃布局要求:1、環(huán)境要求通風(fēng)、溫度和濕度實(shí)驗(yàn)室的長(zhǎng)期使用,有毒、有害等污濁氣體不及時(shí)排出會(huì)危害室內(nèi)操作人員健康。實(shí)驗(yàn)室良好的通風(fēng)環(huán)境是必要前提。除了實(shí)驗(yàn)室建筑選址的朝向和所處地域的氣候特征,實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)也是必須考慮的問(wèn)題。通風(fēng)柜作為保持實(shí)驗(yàn)室內(nèi)安全、衛(wèi)生的重要柜體,是建立一個(gè)科學(xué)實(shí)驗(yàn)室必不可少的組成部分。潔凈度實(shí)驗(yàn)室的潔凈,除了實(shí)驗(yàn)室地面、實(shí)驗(yàn)室器具的清潔,還要考慮實(shí)驗(yàn)室內(nèi)空氣的潔凈度。不良的空氣質(zhì)量會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行,擴(kuò)散到空氣中的有害物質(zhì)也會(huì)危害到人體健康。2、設(shè)施要求給排水、排污系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范的實(shí)驗(yàn)室,都會(huì)配置有供水、排水和排污系統(tǒng),實(shí)驗(yàn)臺(tái)配置水池、滴水架、排水槽,通風(fēng)柜與通風(fēng)柜管道聯(lián)通。3、實(shí)驗(yàn)室工作人員要求PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作人員必須參加由國(guó)家衛(wèi)生部或各省臨床檢驗(yàn)中心舉辦的臨床基因擴(kuò)增培訓(xùn)班,并持證上崗。PCR實(shí)驗(yàn)室通過(guò)驗(yàn)收,實(shí)驗(yàn)室至少必須應(yīng)有兩個(gè)以上持有“臨床基因檢測(cè)上崗證”。PCR實(shí)驗(yàn)室必須建立嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理制度、建立標(biāo)準(zhǔn)化操作程序(SOP)、建立系列質(zhì)量管理文件等,確保實(shí)驗(yàn)室日常運(yùn)行符合國(guó)家衛(wèi)生部的要求,確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、確保實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生安全。由于PCR簡(jiǎn)便易行、靈敏度高等有點(diǎn),該技術(shù)被應(yīng)用于多數(shù)分子實(shí)驗(yàn)的研究中。
PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈,低溫(經(jīng)常是60°C左右)時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合,再調(diào)溫度至DNA聚合酶適反應(yīng)溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈。PCR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備,能在95℃,55℃,72℃之間很好地進(jìn)行溫度控制。PCR擴(kuò)增儀又稱為PCR基因擴(kuò)增儀、PCR核酸擴(kuò)增儀、聚合酶鏈反應(yīng)核酸擴(kuò)增儀,是利用PCR(Polymerasechainreaction,聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)對(duì)特定DNA擴(kuò)增的一種儀器設(shè)備,被運(yùn)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中,例如用于判斷檢體中是否會(huì)表現(xiàn)某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復(fù)制以及親子鑒定等。 目前,PCR已成為實(shí)驗(yàn)室中的一項(xiàng)常規(guī)技術(shù),是分子生物學(xué)家們不可缺少的工具.梯度PCR儀批發(fā)價(jià)
PCR擴(kuò)增過(guò)程中,熒光定量PCR儀通過(guò)熒光信號(hào),對(duì)PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)。國(guó)產(chǎn)核酸定量PCR儀規(guī)格有哪些
引物設(shè)計(jì)時(shí)使合成的寡核苷酸鏈(18~24聚物)適用于多種實(shí)驗(yàn)條件仍不失為明智之舉。②引物的二級(jí)結(jié)構(gòu)包括引物自身二聚體、發(fā)卡結(jié)構(gòu)、引物間二聚體等。這些因素會(huì)影響引物和模板的結(jié)合從而影響引物效率。對(duì)于引物的3’末端形成的二聚體,應(yīng)控制其ΔG大于,因?yàn)榇朔N情形的引物二聚體有進(jìn)一步形成更穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的可能性,引物中間或5’端的要求可適當(dāng)放寬。引物自身形成的發(fā)卡結(jié)構(gòu),也以3’端或近3’端對(duì)引物-模板結(jié)合影響更大;影響發(fā)卡結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性的因素除了堿基互補(bǔ)配對(duì)的鍵能之外,與莖環(huán)結(jié)構(gòu)形式亦有很大的關(guān)系。應(yīng)盡量避免3’末端有發(fā)卡結(jié)構(gòu)的引物。③引物GC含量和Tm值PCR引物應(yīng)該保持合理的GC含量。含有50%的G+C的20個(gè)堿基的寡核苷酸鏈的Tm值大概在56~62℃范圍內(nèi),這可為有效退火提供足夠熱度。一對(duì)引物的GC含量和Tm值應(yīng)該協(xié)調(diào)。協(xié)調(diào)性差的引物對(duì)的效率和特異性都較差,因?yàn)榻档土薚m值導(dǎo)致特異性的喪失。這種情況下引物Tm值越高,其錯(cuò)誤引發(fā)的機(jī)率也越大。若采用太高的退火溫度,Tm值低的引物對(duì)可能完全不發(fā)揮作用。在從一批在特定序列范圍內(nèi)已合成好的寡核苷酸中選擇一對(duì)新的引物時(shí),這種GC含量和Tm值的協(xié)調(diào)非常關(guān)鍵。一般來(lái)說(shuō)。 國(guó)產(chǎn)核酸定量PCR儀規(guī)格有哪些
力新儀器(上海)有限公司主營(yíng)品牌有力康,Heal Force,發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大,該公司貿(mào)易型的公司。公司是一家外商獨(dú)資企業(yè)企業(yè),以誠(chéng)信務(wù)實(shí)的創(chuàng)業(yè)精神、專業(yè)的管理團(tuán)隊(duì)、踏實(shí)的職工隊(duì)伍,努力為廣大用戶提供***的產(chǎn)品。公司業(yè)務(wù)涵蓋數(shù)字化手術(shù)室,實(shí)驗(yàn)室儀器,新生兒科設(shè)備,ICU重癥產(chǎn)品,價(jià)格合理,品質(zhì)有保證,深受廣大客戶的歡迎。力新儀器自成立以來(lái),一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,得到了廣大客戶及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持。