力康實(shí)時(shí)定量PCR儀廠家直供

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-11-08

    PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn),是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA的片段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng),能迅速掌握生物體內(nèi)的病毒含量,其精確度高達(dá)納米級(jí)別。PCR實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的條件1、必須擁有標(biāo)準(zhǔn)的的PCR熒光實(shí)驗(yàn)室實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)AppliedBiosystems公司推出,由于該技術(shù)不實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn),目前已得到廣泛應(yīng)用。2、檢測(cè)設(shè)備必須符合標(biāo)準(zhǔn)PCR熒光實(shí)驗(yàn)室設(shè)置要求熒光定量PCR儀+實(shí)時(shí)熒光定量試劑+通用電腦+自動(dòng)分析軟件,構(gòu)成PCR-DNA/RNA實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)系統(tǒng)。3、必須通過(guò)國(guó)家臨床檢驗(yàn)中心的驗(yàn)收和認(rèn)證;4、檢測(cè)人員必須通過(guò)國(guó)家臨檢中心業(yè)務(wù)培訓(xùn)并取得合格證書(shū)。PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作人員必須參加由國(guó)家衛(wèi)生部或各省臨床檢驗(yàn)中心舉辦的臨床基因擴(kuò)增培訓(xùn)班,并持證上崗。PCR實(shí)驗(yàn)室通過(guò)驗(yàn)收,實(shí)驗(yàn)室至少必須應(yīng)有兩個(gè)以上持有“臨床基因檢測(cè)上崗證”。PCR實(shí)驗(yàn)室必須建立嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理制度、建立標(biāo)準(zhǔn)化操作程序(SOP)、建立系列質(zhì)量管理文件等。確保實(shí)驗(yàn)室日常運(yùn)行符合國(guó)家衛(wèi)生部的要求,確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、確保實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生安全。梯度PCR儀多應(yīng)用于科研、教學(xué)機(jī)構(gòu)。力康實(shí)時(shí)定量PCR儀廠家直供

    一對(duì)引物的Tm值相差盡量不超過(guò)2~3攝氏度,同時(shí)引物和產(chǎn)物的Tm值也不要相差太大,20攝氏度范圍內(nèi)較好。④引物的額外序列與退火溫度若有額外的序列信息要加到引物中,例如T7RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)、限制酶切位點(diǎn)或者GC發(fā)夾結(jié)構(gòu)可以使用加長(zhǎng)的引物。一般說(shuō)來(lái),引物5’端添加無(wú)關(guān)序列不會(huì)影響引物特異序列的退火。有時(shí)候,引物中添加了大量與模板不配對(duì)的堿基,可以在較低退火溫度的條件下進(jìn)行4到5個(gè)擴(kuò)增循環(huán);然后在假定引物5’端序列已經(jīng)加入到模板中,計(jì)算得出的退火溫度下進(jìn)行其余的循環(huán)。在引物上添加限制酶位點(diǎn)時(shí)一個(gè)重要的考慮是大多數(shù)限制酶的有效切割要求在它們的識(shí)別序列的5’端有2至3個(gè)非特異的額外堿基,這樣就會(huì)增加引物的非模板特異序列的長(zhǎng)度。長(zhǎng)引物序列的另一個(gè)缺點(diǎn)是影響溶解溫度的精確計(jì)算,而這對(duì)于確定PCR反應(yīng)時(shí)的退火溫度又是必須的。對(duì)于低于20個(gè)堿基的引物,Tm值可以根據(jù)Tm=4(G+C)+2(A+T)計(jì)算。而對(duì)于較長(zhǎng)的引物,Tm值需要考慮動(dòng)力學(xué)參數(shù)、從“近鄰位”的計(jì)算方式得到,現(xiàn)有的PCR引物設(shè)計(jì)軟件大多數(shù)都采用這種方式。⑤引物的3’末端核苷酸組成引物3’末端和模板的堿基完全配對(duì)對(duì)于獲得好的結(jié)果是非常重要的。 力康國(guó)產(chǎn)PCR儀廠家報(bào)價(jià)由于PCR簡(jiǎn)便易行、靈敏度高等有點(diǎn),該技術(shù)被應(yīng)用于多數(shù)分子實(shí)驗(yàn)的研究中。

力康方艙P(yáng)CR實(shí)驗(yàn)室,通過(guò)集裝箱模塊化組裝,裝配有較為完整的實(shí)驗(yàn)室儀器系統(tǒng),可解決各大醫(yī)療機(jī)構(gòu)改擴(kuò)建限制問(wèn)題,也縮短了裝配安裝周期,能夠迅速就位,展開(kāi)核酸檢測(cè)工作。在有限空間內(nèi),方艙核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室高度集成了較為完整的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,能夠安全、快速、省力的進(jìn)行COVID-19的應(yīng)急檢測(cè),適用于還不具備核酸檢測(cè)條件或需要快速提升檢測(cè)能力的地區(qū)。配置紫外燈空氣消毒和無(wú)間斷消殺系統(tǒng)模塊,傳染性醫(yī)療廢物高溫滅菌處理,避免交叉?zhèn)魅静⑶也晃廴经h(huán)境。

Heal Force集研發(fā)、制造、銷(xiāo)售、服務(wù)為一體,專(zhuān)注于為您提供完善的醫(yī)療及實(shí)驗(yàn)室解決方案,力新儀器(上海)有限公司是集團(tuán)下屬銷(xiāo)售運(yùn)營(yíng)中心。經(jīng)過(guò)三十年的持續(xù)創(chuàng)新和高速發(fā)展,集團(tuán)逐步實(shí)現(xiàn)了從貿(mào)易起步,向多元化發(fā)展的質(zhì)的跨越。集團(tuán)包括醫(yī)療、保健和實(shí)驗(yàn)室等專(zhuān)業(yè)領(lǐng)域,持續(xù)衍生出各類(lèi)成熟的產(chǎn)品線。自有品牌“Heal Force”在業(yè)內(nèi)享盛譽(yù),現(xiàn)有OR手術(shù)室系列、ICU重癥麻醉系列、Maternal&Infant 圍產(chǎn)產(chǎn)品系列、Rehabilitation康復(fù)醫(yī)療系列、Laboratory生命科學(xué)儀器系列、Healthcare家用健康產(chǎn)品多條產(chǎn)品線。在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)中,pcr儀對(duì)傳染疾病的診斷意義尤為重要。

    1.一般性原則(1)長(zhǎng)度:一般引物互補(bǔ)區(qū)的長(zhǎng)度為16-25bp,引物互補(bǔ)區(qū)的4×(G十C)十2×(A十T)不要沒(méi)有必要大于70,一般也不要低于50(2)G十c含量:好在45%一55%之間,但有時(shí)受模板限制,無(wú)法理想化。但在有幾種選擇時(shí),可以把G十c含量接近50%作為參數(shù)之一(3)堿基分布的隨機(jī)性:應(yīng)避免連續(xù)出現(xiàn)4個(gè)以上的單一堿基。尤其是不應(yīng)在其3’端出現(xiàn)超過(guò)3個(gè)的連續(xù)G或C,否則會(huì)使引物在G十C富集序列區(qū)錯(cuò)誤引發(fā)。(4)引物自身:不能含有很長(zhǎng)的牢固的自身互補(bǔ)序列,尤其是引物3‘端回折形成的發(fā)夾不要一般超過(guò)3堿基,否則會(huì)影響引物與模板的結(jié)合(5)引物之間:兩個(gè)引物之間不應(yīng)有很長(zhǎng)的牢固的互補(bǔ)或同源堿基,尤應(yīng)避免3’端的互補(bǔ)重疊。2.具體原則①引物長(zhǎng)度;特異性一般通過(guò)引物長(zhǎng)度和退火溫度控制。如果PCR的退火溫度設(shè)置在近于引物Tm值(引物/模板雙鏈體的解鏈溫度)幾度的范圍內(nèi),18到24個(gè)堿基的寡核苷酸鏈?zhǔn)怯泻芎玫男蛄刑禺愋缘?。引物越長(zhǎng),擴(kuò)增退火時(shí)被引發(fā)的模板越少。為優(yōu)化PCR反應(yīng),使用確保溶解溫度不低于54℃的短的引物,可獲得好的效率和特異性??偟膩?lái)說(shuō),好在特異性允許的范圍內(nèi)尋求安全性。每增加一個(gè)核苷酸,引物特異性提高4倍;這樣,大多數(shù)應(yīng)用的短引物長(zhǎng)度為18個(gè)核苷酸。 PCR實(shí)驗(yàn)室在儀器設(shè)備等硬件上要滿足開(kāi)展臨床檢驗(yàn)的條件,包括生物安全柜和PCR儀。力康實(shí)時(shí)定量PCR儀廠家直供

熒光定量PCR是近年發(fā)展起來(lái)的實(shí)時(shí)定量檢測(cè)特定核酸技術(shù),是核酸探針,熒光共振能量傳遞和PCR技術(shù)的有機(jī)結(jié)合.力康實(shí)時(shí)定量PCR儀廠家直供

    PCR基因擴(kuò)增法在遺傳性疾病產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用,遺傳病是由于遺傳物變化而引起的機(jī)體某一功能或缺陷或異常所致的疾病,其根本變化在于遺傳物質(zhì)。苯西酮尿癥(PKU)是一種常染色體隱性遺傳病,患者因苯丙酸羥化酶轉(zhuǎn)化為酷氨酸,使苯氨酸及其代謝物在體內(nèi)大量蓄積,出現(xiàn)腦組損傷及不可逆性智力發(fā)育障礙。PKU患者出生時(shí)正常,新生兒一經(jīng)確診為PKU停止母乳喂養(yǎng)采用低苯丙氨酸欽食療法8—10年,可使患者智力水平發(fā)展維持正常。由于低苯丙氨酸欽食非常昂貴,一般家庭難以承受,因此,施行產(chǎn)前診斷,防止患兒出生是比較好的選擇。PAH只在肝細(xì)胞中表達(dá),不能用血細(xì)胞,成纖維細(xì)胞、羊水、絨毛細(xì)胞進(jìn)行酶活性分析,只能進(jìn)行基因診斷。PKU的基因變化并非全部PAH基因的缺失,而是以點(diǎn)突變?yōu)橹饕憩F(xiàn)形式,而且其突變位點(diǎn)很多。必須使用PCR擴(kuò)增結(jié)合,ASO,SSCP或使用擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(AmpFLA)進(jìn)行檢測(cè),這些技術(shù)都較復(fù)雜,檢驗(yàn)人員須經(jīng)專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)。 力康實(shí)時(shí)定量PCR儀廠家直供

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