PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈,低溫(經(jīng)常是60°C左右)時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合,再調(diào)溫度至DNA聚合酶適反應(yīng)溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈。PCR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備,能在95℃,55℃,72℃之間很好地進(jìn)行溫度控制。PCR擴(kuò)增儀又稱為PCR基因擴(kuò)增儀、PCR核酸擴(kuò)增儀、聚合酶鏈反應(yīng)核酸擴(kuò)增儀,是利用PCR(Polymerasechainreaction,聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)對(duì)特定DNA擴(kuò)增的一種儀器設(shè)備,被運(yùn)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中,例如用于判斷檢體中是否會(huì)表現(xiàn)某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復(fù)制以及親子鑒定等。 PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物.國(guó)產(chǎn)實(shí)時(shí)熒光PCR儀批發(fā)廠家
談?wù)剶?shù)字PCR那些事數(shù)字PCR即DigitalPCR(dPCR),它是一種核酸分子定量技術(shù)。相較于qPCR,數(shù)字PCR可讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù),是對(duì)起始樣品的定量。1、PCR之?dāng)?shù)字PCR技術(shù)發(fā)展歷程在定量PCR時(shí),我們常常糾結(jié)一個(gè)問(wèn)題,究竟是相對(duì)定量還是定量呢?如今,你無(wú)需糾結(jié)了,因?yàn)閿?shù)字PCR(digitalPCR)來(lái)了。盡管這兩種技術(shù)有些類似,都是估計(jì)起始樣品中的核酸量,但它們有一個(gè)重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線或參照基因來(lái)測(cè)定核酸量,而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù),是對(duì)起始樣品的定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域:拷貝數(shù)變異、突變檢測(cè)、基因相對(duì)表達(dá)研究(如等位基因不平衡表達(dá))、二代測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證、miRNA表達(dá)分析、單細(xì)胞基因表達(dá)分析等。Nacia數(shù)字PCR2、數(shù)字PCR之dPCR檢測(cè)原理數(shù)字PCR即DigitalPCR(dPCR)是這幾年才迅速發(fā)展起來(lái)的一種核酸定量分析技術(shù),雖然出生的晚,但是潛力不小,因?yàn)閿?shù)字PCR解決了qPCR這么多年懸而未決的問(wèn)題,那就是不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量并且可以將檢測(cè)靈敏度提高至單個(gè)核酸分子。那它是怎么做到的呢?這要從它的檢測(cè)原理說(shuō)起。Nacia數(shù)字PCR數(shù)字PCR通過(guò)將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬(wàn)份,分配到不同的反應(yīng)單元。 上海力康實(shí)時(shí)熒光PCR儀廠家直供目前,PCR已成為實(shí)驗(yàn)室中的一項(xiàng)常規(guī)技術(shù),是分子生物學(xué)家們不可缺少的工具.
PCR儀的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:1、模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;2、模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;3、引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈",而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍(Plateau)。到達(dá)平臺(tái)期所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。在此同時(shí)認(rèn)識(shí)到蛋白質(zhì)是接受RNA的遺傳信息而合成的。50年代Zamecnik等在形態(tài)學(xué)和分離的亞細(xì)胞組分實(shí)驗(yàn)中已發(fā)現(xiàn)微粒體(microsome)是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的部位。
力康方艙P(yáng)CR實(shí)驗(yàn)室,通過(guò)集裝箱模塊化組裝,裝配有較為完整的實(shí)驗(yàn)室儀器系統(tǒng),可解決各大醫(yī)療機(jī)構(gòu)改擴(kuò)建限制問(wèn)題,也縮短了裝配安裝周期,能夠迅速就位,展開核酸檢測(cè)工作。在有限空間內(nèi),方艙核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室高度集成了較為完整的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,能夠安全、快速、省力的進(jìn)行COVID-19的應(yīng)急檢測(cè),適用于還不具備核酸檢測(cè)條件或需要快速提升檢測(cè)能力的地區(qū)。配置紫外燈空氣消毒和無(wú)間斷消殺系統(tǒng)模塊,傳染性醫(yī)療廢物高溫滅菌處理,避免交叉?zhèn)魅静⑶也晃廴经h(huán)境。PCR的特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加。
3).無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細(xì)胞貧血(sicklecellanemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及。而有效的無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測(cè)孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí),可以100%的檢測(cè)出HBB基因突變[3],可以說(shuō)是相當(dāng)厲害了。Nacia數(shù)字PCRNaica數(shù)字PCR系統(tǒng)——簡(jiǎn)便、快速地完成3通道檢測(cè)Naica數(shù)字PCR系統(tǒng)是法國(guó)Stilla公司開發(fā)的下一代核酸定量技術(shù)。使用cutting-edge微流體創(chuàng)新型芯片——Sapphire芯片作為數(shù)字PCR過(guò)程的耗材。樣品通過(guò)毛細(xì)通道網(wǎng)格以30,000個(gè)微滴的形式進(jìn)入2D芯片中,可稱作Crystal微滴。Naica數(shù)字PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)在芯片上實(shí)現(xiàn)。對(duì)微滴成像用以檢測(cè)包含擴(kuò)增片段的微滴。一步是對(duì)陽(yáng)性微滴計(jì)數(shù)從而得到的核酸數(shù)量。Naica數(shù)字PCR,結(jié)合了強(qiáng)大的圖像分析技術(shù)和直觀可視的檢測(cè)功能,從而達(dá)到了數(shù)字PCR定量的置信水平,獲得的數(shù)據(jù)真實(shí)可信。 PCR可用于檢測(cè)特定細(xì)胞或生物體中等位基因的序列差異。上海高校科研PCR儀批發(fā)廠家
通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,加入設(shè)計(jì)引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。國(guó)產(chǎn)實(shí)時(shí)熒光PCR儀批發(fā)廠家
力康GM05智能梯度基因擴(kuò)增儀(控溫儀)性能特點(diǎn):高清晰超大7寸液晶顯示屏-可選鍍金/鍍銀模塊,提高熱傳導(dǎo)效率,使實(shí)驗(yàn)更高效;方便靈活的模塊更換裝置,輕松更換模塊;熱蓋旋鈕無(wú)級(jí)可調(diào),適用各型號(hào)試管;樣品座工作區(qū)域全密閉設(shè)計(jì),可確保低溫保存干燥清潔;可任意角度定位熱蓋;具備斷電記憶功能;環(huán)境溫度自動(dòng)讀取,自動(dòng)修正溫控誤差;支持用戶實(shí)驗(yàn)預(yù)約設(shè)定,鬧鐘提醒功能;支持程序搜索功能,支持常用程序優(yōu)先選擇功能;支持多重嵌套循環(huán);支持梯度PCR、TouchdownPCR、LongPCR設(shè)定;可外接移動(dòng)硬盤和鼠標(biāo),支持觸摸和鼠標(biāo)操作;可實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程故障判斷;具有TM值計(jì)算功能,可更好地幫助用戶進(jìn)行引物設(shè)計(jì);可單獨(dú)配備PC機(jī)操作軟件,PC機(jī)與主機(jī)可分別各自控制,并實(shí)現(xiàn)一機(jī)多控。國(guó)產(chǎn)實(shí)時(shí)熒光PCR儀批發(fā)廠家
力新儀器(上海)有限公司致力于醫(yī)藥健康,是一家貿(mào)易型的公司。公司業(yè)務(wù)涵蓋數(shù)字化手術(shù)室,實(shí)驗(yàn)室儀器,新生兒科設(shè)備,ICU重癥產(chǎn)品等,價(jià)格合理,品質(zhì)有保證。公司將不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力,努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識(shí),遵守行業(yè)規(guī)范,植根于醫(yī)藥健康行業(yè)的發(fā)展。在社會(huì)各界的鼎力支持下,持續(xù)創(chuàng)新,不斷鑄造***服務(wù)體驗(yàn),為客戶成功提供堅(jiān)實(shí)有力的支持。