蘇州細(xì)胞支原體去除試劑價(jià)格

來源： 發(fā)布時(shí)間：2024-06-30

對(duì)于同一個(gè)樣品，如果一步法恒溫試劑盒檢測(cè)結(jié)果為陽性，而PCR檢測(cè)為陰性，可能的原因包括：
1. 檢測(cè)的支原體種類不同：一步法恒溫試劑盒可能檢測(cè)的支原體種類更多，例如可以涵蓋27種支原體，而PCR檢測(cè)可能只針對(duì)常見的12種支原體進(jìn)行檢測(cè)。因此，如果樣品中污染的支原體種類不在PCR檢測(cè)的范圍內(nèi)，就可能出現(xiàn)一步法檢測(cè)為陽性而PCR檢測(cè)為陰性的情況。
2. 靈敏度的差異：PCR方法的靈敏度可能高于一步法恒溫檢測(cè)法。PCR可以檢測(cè)到低至單個(gè)拷貝的支原體，而一步法恒溫檢測(cè)可能需要更高的支原體拷貝數(shù)，例如10^3^個(gè)拷貝。如果樣品中支原體的數(shù)量低于一步法檢測(cè)的靈敏度閾值，PCR檢測(cè)可能無法檢測(cè)到，導(dǎo)致陰性結(jié)果。
3. 樣品中可能含有抑制PCR反應(yīng)的物質(zhì)：如果樣品中存在PCR反應(yīng)的抑制物，可能會(huì)影響PCR的擴(kuò)增效率，導(dǎo)致即使存在支原體，PCR檢測(cè)也可能呈現(xiàn)陰性結(jié)果。
4. 試劑盒的特異性和交叉反應(yīng)：一步法恒溫試劑盒可能具有更高的特異性，減少了與其他微生物的交叉反應(yīng)，從而在PCR檢測(cè)為陰性時(shí)仍能準(zhǔn)確檢測(cè)到支原體的存在。
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體為什么難以徹底消滅？蘇州細(xì)胞支原體去除試劑價(jià)格

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根據(jù)提供的信息，支原體去除試劑是一種混合制劑，通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關(guān)蛋白合成來取得良好的支原體清*效果，同時(shí)對(duì)細(xì)胞無傷害。它被設(shè)計(jì)為對(duì)細(xì)胞毒性小，不影響后續(xù)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，包括細(xì)胞活力檢測(cè)和細(xì)胞轉(zhuǎn)染等。這表明使用支原體去除試劑去除支原體后，理論上不應(yīng)該對(duì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率產(chǎn)生負(fù)面影響。
此外，支原體污染本身會(huì)對(duì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率產(chǎn)生負(fù)面影響。研究表明，與未污染的細(xì)胞相比，支原體污染的細(xì)胞轉(zhuǎn)染后具有較低的基因表達(dá)水平。因此，去除支原體后，可以預(yù)期細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率會(huì)得到改善，因?yàn)橐瞥擞绊懠?xì)胞正常功能的污染物。
上海細(xì)胞培養(yǎng)支原體檢測(cè)時(shí)間細(xì)胞培養(yǎng)為什么建議使用支原體檢測(cè)？

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在科研中，支原體檢測(cè)是確保細(xì)胞培養(yǎng)純凈性的重要環(huán)節(jié)。以下是一些在科研中常見的支原體檢測(cè)方法：
1. 支原體培養(yǎng)法：這是一種傳統(tǒng)的檢測(cè)方法，通過將細(xì)胞培養(yǎng)物接種到特定的培養(yǎng)基中，觀察是否有支原體生長。這是直接的檢測(cè)方法，但耗時(shí)較長，通常需要數(shù)周時(shí)間。
2. DNA染色法：使用熒光染料（如Hoechst或DAPI）染色細(xì)胞核，然后通過熒光顯微鏡觀察。這種方法操作簡便，可以快速得到結(jié)果，但特異性不高，可能會(huì)有假陽性。
3. 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）法：這是一種分子生物學(xué)技術(shù)，通過設(shè)計(jì)特異性的引物，擴(kuò)增支原體DNA，從而檢測(cè)支原體的存在。PCR法具有高靈敏度和特異性，已成為日常細(xì)胞培養(yǎng)維護(hù)的可靠方法。
4. 核酸擴(kuò)增技術(shù)（NAT）：NAT技術(shù)通過擴(kuò)增并檢測(cè)特定的支原體基因組保守序列來進(jìn)行支原體污染檢測(cè)，具有快速、簡便的特點(diǎn)。

對(duì)于同一個(gè)樣品，如果PCR檢測(cè)結(jié)果為陽性而一步法恒溫檢測(cè)試劑盒結(jié)果為陰性，可能的原因包括：

1. 靈敏度差異：PCR方法通常具有較高的靈敏度，可以檢測(cè)到單個(gè)拷貝的支原體DNA。相比之下，一步法恒溫檢測(cè)試劑盒可能需要更高的支原體拷貝數(shù)才能檢測(cè)出陽性結(jié)果，例如需要10^3個(gè)拷貝。如果樣品中的支原體數(shù)量低于一步法試劑盒的檢測(cè)閾值，就可能出現(xiàn)PCR陽性而一步法陰性的情況。
2. 檢測(cè)范圍：PCR檢測(cè)可以針對(duì)特定的支原體序列設(shè)計(jì)引物，如果樣品中的支原體種類或序列與一步法試劑盒的檢測(cè)范圍不完全匹配，可能導(dǎo)致一步法檢測(cè)不出。
3. 樣品處理和提取：一步法恒溫檢測(cè)試劑盒可能對(duì)樣品的處理和DNA提取有特定的要求。如果樣品處理不當(dāng)或DNA提取效率不高，可能會(huì)影響一步法試劑盒的檢測(cè)結(jié)果。
4. 試劑盒特異性：一步法恒溫檢測(cè)試劑盒可能設(shè)計(jì)用于檢測(cè)特定的支原體種類，如果樣品中的支原體與試劑盒的特異性不匹配，可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
5. 抑制物的影響：PCR檢測(cè)可能對(duì)樣品中的某些抑制物不那么敏感，而一步法恒溫檢測(cè)試劑盒可能更容易受到這些抑制物的影響，從而降低檢測(cè)的靈敏度。
細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染怎么去除？

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支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)中普遍的問題之一，細(xì)胞庫中或正在使用的細(xì)胞中，支原體的污染率約為15%-35%。并對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的生理和代謝造成諸多影響：
01/ 爭奪營養(yǎng)：支原體的污染會(huì)阻礙細(xì)胞生長和增殖 
02/ 改變蛋白質(zhì)、RNA 或 DNA 合成的水平 
03/ 改變基因表達(dá)、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和形態(tài) 
04/ 損害膜和細(xì)胞器 
05/ 導(dǎo)致突變和染色體變化 
06/ 時(shí)間、金錢和有價(jià)值的細(xì)胞丟失：支原體的污染會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失以及研究時(shí)間損失
07/ 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不可靠性 
08/ 生物安全問題
支原體檢測(cè)假陽性的原因？蘇州細(xì)胞培養(yǎng)支原體去除試劑貨期

支原體去除之后對(duì)細(xì)胞檢測(cè)有無影響？蘇州細(xì)胞支原體去除試劑價(jià)格

支原體污染后的細(xì)胞是否應(yīng)該直接丟棄還是嘗試重新培養(yǎng)，這取決于多種因素，包括細(xì)胞的重要性、污染的程度、以及是否有有效的方法來清*支原體。以下是一些處理支原體污染的常見方法：
1. 直接丟棄：對(duì)于非重要的細(xì)胞，如果培養(yǎng)中的細(xì)胞、WCB的細(xì)胞等，可以采取直接將培養(yǎng)物與用過的培養(yǎng)基滅活后丟棄的方式。
2. 使用支原體清除劑：支原體清除劑處理細(xì)胞，作用濃度為25μg/ml，兩周可以清*支原體。
3. 使用支原體清*培養(yǎng)基：每2~3天更換一次新鮮培養(yǎng)液，并用無菌的PBS洗滌細(xì)胞，處理15天后進(jìn)行支原體檢測(cè)，以確定支原體是否被完全去除。
4. 支原體去除試劑：這是一種混合制劑，可以通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關(guān)蛋白合成來取得良好的支原體清*效果，且對(duì)細(xì)胞無傷害
蘇州細(xì)胞支原體去除試劑價(jià)格

標(biāo)簽： 免疫沉淀 支原體