冷凍電鏡技術(shù)近年來獲得了迅猛的發(fā)展，取得了許多具有重大意義的成果。冷凍電鏡將生物分子進行冷凍便可進行高分辨率成像，還具有分辨率高、更接近天然狀態(tài)、適用研究對象普遍等優(yōu)勢。同時，系統(tǒng)地綜述了冷凍電鏡技術(shù)在科學研究中的應(yīng)用，并展望冷凍電鏡技術(shù)未來的發(fā)展。冷凍電鏡（...

冷凍電鏡技術(shù)之冷凍掃描電鏡：掃描電鏡工作者都面臨著一個不能回避的事實，就是所有生命科學以及許多材料科學的樣品都含有液體成分。很多動植物組織的含水量達到98%，這是掃描電鏡工作者比較難對付的樣品問題。冷凍掃描電鏡(Cryo-SEM)技術(shù)是克服樣品含水問題的一個快...

單顆粒冷凍電鏡技術(shù)二維圖像分析——顆粒圖像的匹配與分類：二維顆粒圖像的分類是獲取三維結(jié)構(gòu)過程的第一步。對二維圖像的分析包括兩部分：顆粒圖像的匹配和顆粒圖像的分類。匹配的過程通常會對顆粒圖像應(yīng)用一些變換操作，通過關(guān)聯(lián)函數(shù)去判斷不同顆粒圖像之間的相似程度。圖像匹配...

冷凍電鏡技術(shù)究竟是什么呢？一直以來，科學家們不斷進行基礎(chǔ)生命科學的探究，探究細胞內(nèi)的生命規(guī)律，為人類健康及其他學科提供借鑒。而分子是生命體中行使功能的較小單元，生命科學研究也逐步發(fā)展到了微觀生物分子的結(jié)構(gòu)與功能研究階段，以期逐步加深對生命過程的認知。充分的基礎(chǔ)...

冷凍電子顯微鏡技術(shù)之樣品成像：低劑量輻照成像，普通的樣品材料在進行TEM表征時，電子劑量越高，成像質(zhì)量越好。但生物樣品受到的輻照損傷卻是和累積的輻照總劑量相關(guān)的。更詳細一點說，隨著輻照劑量的增加，輻照損傷對高分辨細節(jié)的破壞更嚴重。因此，為了盡可能地獲得更多的細...

冷凍電子顯微技術(shù)主要包括單顆粒冷凍電鏡技術(shù)和冷凍電子斷層掃描技術(shù)。單顆粒冷凍電鏡技術(shù)首先捕獲大量隨機分布的同一種生物樣品的二維圖像，然后通過圖像處理算法解析其三維結(jié)構(gòu)。近年來，隨著冷凍電鏡設(shè)備和計算機軟硬件的快速發(fā)展，特別是隨著直接電子探測器在冷凍電鏡中的應(yīng)用...

冷凍電鏡技術(shù)也正在成為助力醫(yī)藥研發(fā)的有力手段。依托對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的理解，科學家正在開發(fā)更有效的治Ca藥、打菌素、止痛藥、麻醉劑等。中國過去10多年里，建成了世界上較大的冷凍電鏡設(shè)施。中國的科學家，也在冷凍電鏡領(lǐng)域取得了很多舉世矚目的成就，引起了世界的普遍關(guān)注。比...

冷凍電子顯微技術(shù)主要包括單顆粒冷凍電鏡技術(shù)和冷凍電子斷層掃描技術(shù)。單顆粒冷凍電鏡技術(shù)首先捕獲大量隨機分布的同一種生物樣品的二維圖像，然后通過圖像處理算法解析其三維結(jié)構(gòu)。近年來，隨著冷凍電鏡設(shè)備和計算機軟硬件的快速發(fā)展，特別是隨著直接電子探測器在冷凍電鏡中的應(yīng)用...

冷凍電鏡技術(shù)之冷凍蝕刻電子顯微鏡：冷凍蝕刻電鏡技術(shù)是從50年代開始發(fā)展起來的一種將斷裂和復(fù)型相結(jié)合的制備透射電鏡樣品技術(shù)，亦稱冷凍斷裂或冷凍復(fù)型，用于細胞生物學等領(lǐng)域的顯微結(jié)構(gòu)研究。冷凍蝕刻電鏡的優(yōu)點：①樣品通過冷凍，可使其微細結(jié)構(gòu)接近于活的狀態(tài);②樣品經(jīng)冷凍...

什么是冷凍電鏡技術(shù)？冷凍電鏡技術(shù)，全稱是冷凍電子顯微鏡技術(shù)，是在低溫下使用透射電子顯微鏡觀察樣品的顯微技術(shù)。冷凍電鏡技術(shù)，是一種重要的結(jié)構(gòu)生物學研究方法，它與X射線晶體學、核磁共振一起構(gòu)成了高分辨率結(jié)構(gòu)生物學研究的基礎(chǔ)。冷凍電鏡技術(shù)的研究，主要是冷凍成像和蛋白...

單顆粒冷凍電鏡技術(shù)的圖像處理技術(shù)：經(jīng)過多年的發(fā)展，目前冷凍電鏡的數(shù)據(jù)處理部分主要包含了以下的流程：(1)襯度傳遞函數(shù)的修正(CTFcorrection)；(2)樣品分子投影數(shù)據(jù)的篩選(particleselection)；(3)二維投影數(shù)據(jù)的分類和降噪(2Da...

如何區(qū)別真假胎牛血清：沉淀，很多血清客戶，會發(fā)現(xiàn)進口血清有沉淀，從而懷疑血清的質(zhì)量問題，這是沒有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對血清質(zhì)量沒有任何影響，沉淀的產(chǎn)生原因很多，和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國產(chǎn)的血清，大多來自北方，由于價格低廉，保存環(huán)...

胎牛血清制備：離心，將準備好的瓶放入離心套筒調(diào)好平衡后，對稱放入離心機，按1800轉(zhuǎn)/分鐘離心50分鐘后，放入4℃冷庫備用。抽血清，取出4℃冷庫離心好的瓶，注意輕抬輕放，以免將下層血塊和血清混層。將經(jīng)過高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接...

胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別？胎牛血清（FoetalBovineSerum，簡稱FBS）：胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后，發(fā)育未完全的胎牛心臟密閉穿刺采的血后，通過一系列工藝處理獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子，一旦胚胎發(fā)育完全這些因子會自動...

如果胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，應(yīng)該如何去除？胎牛血清中的沉淀物出現(xiàn)有很多種原因，但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白在胎牛血清解凍后，也會存在于胎牛血清中，這也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮狀沉淀物，并不影響胎牛血清本...

胎牛血清：胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等，其組成成份大部分已知，但還有一部分尚不清楚，這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因...

胎牛血清的主要成分有哪些？脂聯(lián)素，有人發(fā)現(xiàn)，將牛脂聯(lián)素注射入C57小鼠，可降低循環(huán)血糖水平和在高脂飲食后提高脂肪清理率。持續(xù)注射牛脂聯(lián)素兩周后，胰島素敏感性和葡萄糖耐受性明顯增強，高脂喂養(yǎng)小鼠肝臟脂質(zhì)堆積減少。這些結(jié)果提供了直接的證據(jù)表明內(nèi)源性牛脂聯(lián)素是一種調(diào)...

胎牛血清制備：用止血鉗夾住血管，切開1厘米左右的切口進行插管，插好管后打開血管的止血鉗，讓牛血順采的血管流入另一個潔凈房間內(nèi)的瓶中。采的血瓶采的血前經(jīng)干烤滅菌（180℃2小時）后，按無菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口，于采的血前半小時放入3...

胎牛血清應(yīng)該如何保存，可以存放多久？胎牛血清可長期儲存于-20℃冰箱中。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱，請不要超過一個月。如果一次性無法用完一瓶血清，建議將胎牛血清無菌條件下分裝并儲存于-20℃，避免反復(fù)凍融。如何正確地解凍胎牛血清？采用逐步解凍法，將胎牛血清從...

如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?未拆封的血清，一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃，在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用，若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi)，再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使...

胎牛血清是血液凝固后的液體部分，不含血細胞、纖維蛋白及凝集因子等，含有多種對細胞生長必需的營養(yǎng)因子及大分子物質(zhì)。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外，重要的是，胎牛血清中含有大量對細胞生長必需的生長因子。胎牛血清也含有一些小分子物質(zhì)，如氨基酸、糖類、脂類及Ho...

胎牛血清制備：離心，將準備好的瓶放入離心套筒調(diào)好平衡后，對稱放入離心機，按1800轉(zhuǎn)/分鐘離心50分鐘后，放入4℃冷庫備用。抽血清，取出4℃冷庫離心好的瓶，注意輕抬輕放，以免將下層血塊和血清混層。將經(jīng)過高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接...

胎牛血清的處理方法有：熱滅活，F(xiàn)BS的常見處理方法是熱滅活，其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘，偶爾搖晃。目的是滅活FBS中存在的補體系統(tǒng)的任何成分，以及其他潛在的未知細胞生長抑制劑。以前熱滅活也是為了去除支原體污染，這不再是一個問題，因為現(xiàn)在所有的血...

用于體外細胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法：將已存放血漿的試管置入-20~0℃環(huán)境下保存?zhèn)溆?；將血漿分離提取胎牛血清，具體步驟如下：取6-12g氯化鈉、0.1-0.5g磷酸二氫鉀和1.4-2.4g磷酸二氫鉀放入容器中，向其中加入300-700mL去離子水，攪拌均勻...

活性炭處理胎牛血清的應(yīng)用：活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌Hormone相關(guān)的細胞研究實驗。同時活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種Hormone和生長因子，減少了影響細胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類固醇類化合物，3x100nm無菌...

如何挑選適合細胞生長的胎牛血清？原代或是正常細胞株建議使用BI特級胎牛血清，對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用特級胎牛血清，或胚胎干細胞胎牛血清。由于血清有批間差異，細胞種類不同，我們建議客戶購買前可先申請試用樣品，通過篩選得到滿意的血清批號，之后根據(jù)項目需...

如果胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，應(yīng)該如何去除？胎牛血清中的沉淀物出現(xiàn)有很多種原因，但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白在胎牛血清解凍后，也會存在于胎牛血清中，這也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮狀沉淀物，并不影響胎牛血清本...

選購FBS應(yīng)考慮哪些標準？產(chǎn)品檢測，每款FBS在生產(chǎn)上市之前，必須經(jīng)過嚴格的質(zhì)控檢測。質(zhì)控環(huán)節(jié)必不可少，以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格，而血清產(chǎn)品分析證書（COA）就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。在COA中，常規(guī)的檢測指標包括內(nèi)的毒性、總蛋白、細菌、病毒等，另外總...

如何區(qū)別真假胎牛血清：主要技術(shù)指標，1、內(nèi)的毒性，標準為不高于5EU/ml。內(nèi)的毒性是細菌破碎后細胞壁的成分，因此內(nèi)的毒性含量的高低可表現(xiàn)出采的血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前，國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求，很多進口胎牛血清內(nèi)的毒性含量反而更高，只要求...

胎牛血清的生產(chǎn)工藝：透析胎牛血清，顧名思義，需經(jīng)過透析。它是在4°C下用特定的透析膜對血清在0.15MNaCl中透析。由于該透析膜只允許10kDa以下的小分子穿過，在滲透壓的作用下，這些小分子便從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中。10kDa以下的小分子有化...