如何挑選適合細胞生長的胎牛血清?原代或是正常細胞株建議使用BI特級胎牛血清,對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用特級胎牛血清,或胚胎干細胞胎牛血清。由于血清有批間差異,細胞種類不同,我們建議客戶購買前可先申請試用樣品,通過篩選得到滿意的血清批號,之后根據(jù)項目需求可進行批量囤貨,以保證該項目所需血清質(zhì)量的一致性,可排除不同批號血清對于實驗帶來的影響。如何正確保存胎牛血清?需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請勿超過1個月,若一次無法用完一瓶,建議將血清無菌分裝并冷凍。胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物。杭州優(yōu)等血清哪里有
胎牛血清:胎牛血清參與細胞培養(yǎng),是細胞生長天然的培養(yǎng)基,它為細胞提供生長因子、結(jié)合蛋白、脂質(zhì)、礦物質(zhì)、黏附和鋪展因子等來促進體外細胞培養(yǎng)。透析胎牛血清主要用于可能需要關(guān)注小分子濃度的特殊研究。這主要包括四個領(lǐng)域:蛋白質(zhì)組學(xué)、同位素標(biāo)記、細胞通訊以及報告基因細胞系的篩選,其中有些領(lǐng)域是相互交叉的。以下稍作舉例。將13C或15N標(biāo)記的氨基酸摻入到培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞,來標(biāo)記細胞內(nèi)新合成的蛋白質(zhì),一般培養(yǎng)5-6代,細胞中的蛋白質(zhì)將都被同位素標(biāo)記。然后質(zhì)譜分析,即可比較經(jīng)過不同處理的細胞,其內(nèi)部蛋白質(zhì)豐度的變化。南通標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清胎牛血清含有一些小分子物質(zhì),如氨基酸、糖類、脂類及Hormone類物質(zhì)。
胎牛血清融化:胎牛血清在融化過程中,瓶子里冰塊的底部你會看見亮亮的蛋白絲在下沉,如同蜂蜜溶于水時的亮線,這就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔點高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。(回想一下高級冰淇淋和大棒冰的區(qū)別,你懂得?。┰囅?,如果采用4℃過夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大約需要10小時左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此時就很容易有一些蛋白飽和析出,(大多是脂蛋白和纖連蛋白),這就是血清融化中產(chǎn)生沉淀的重要原因之一。
胎牛血清:在細胞培養(yǎng)過程,質(zhì)量粗糙的FBS可能會導(dǎo)致細胞出現(xiàn)生長速度緩慢、不貼壁、容易老化等現(xiàn)象,從而導(dǎo)致實驗受阻。經(jīng)過質(zhì)量驗證的FBS,則可以十分確定這款FBS對哪些細胞具有良好的培養(yǎng)效果,進而判斷其能否把自己的細胞養(yǎng)好。對于質(zhì)量好的FBS,通常采用血清敏感性細胞(如干細胞)來進行培養(yǎng)驗證,若培養(yǎng)效果良好,則其他常規(guī)細胞系的培養(yǎng)就更不在話下。FBS作為其他行業(yè)的副產(chǎn)品,其生產(chǎn)在本質(zhì)上會受到天氣、食物供應(yīng)、經(jīng)濟條件和牛群規(guī)模等各種因素的影響,導(dǎo)致血清的供應(yīng)可能出現(xiàn)貨源、價格及批次間的不穩(wěn)定性,從而造成實驗的不順甚至實驗失敗。在過去,國內(nèi)外已有多個實驗室出現(xiàn)過因血清批間差異大而導(dǎo)致實驗結(jié)果無法重復(fù)的情況,浪費了巨大的時間和金錢成本。胎牛血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
胎牛血清的功能:胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數(shù)生長的Hormone,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到釋放毒性作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。無錫細胞培養(yǎng)用血清廠家
血清對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內(nèi)皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶。杭州優(yōu)等血清哪里有
用于體外細胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法:包括以下步驟:采集懷孕母牛的胎牛血液獲得血漿,具體步驟如下:采用含有體積含量4-6%葡萄糖的注射液、含有質(zhì)量含量0.2-0.6%檸檬酸鈉的水溶液進行混合,將上述兩者混合后的混合液A置入取血容器內(nèi)充分滋潤容器內(nèi)壁;將胎牛血液置入上述滋潤過的取血容器內(nèi),搖動使其與胎牛血液均勻混合;將混合均勻的含有胎牛血液的混合液B置入采的血試管,保持血液在40℃以下恒溫狀態(tài),然后將采的血試管在離心機中以3000-14000r/min轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)5-30分鐘,分離出血漿、血小板、血球,將所得血漿、血小板、血球分別采用采的血試管分離存放;杭州優(yōu)等血清哪里有
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