鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上， pH 左右時可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中，在成膠過程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。 需要的溶液 （均需要無菌、 預(yù)冷） 10mg/L 酚紅用于pH 指示） 0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一 般不用)，雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠...

鼠尾膠原實驗應(yīng)用：鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式，為人鼻腔黏液纖毛運輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片，以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞，培養(yǎng)7天時進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)，應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻，平均厚度約為1mm；HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開；掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形，纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接；同一細(xì)胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的；同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和...

膠原蛋白的功效與作用：1、可以作為一種補(bǔ)鈣食品。膠原蛋白的特征氨基酸羥基脯氨酸是血漿中運輸鈣到骨細(xì)胞的運載工具，骨細(xì)胞中的骨膠原是羥基磷灰石的黏合劑，它與羥摹磷灰石共同構(gòu)成了骨骼的主體。因此，只要攝入足夠的膠原蛋白，就能保證正常機(jī)體鈣質(zhì)的攝入量，膠原蛋白可成制成補(bǔ)鈣的保健食品。2、可以為特殊人群使用。婦科疾病的根源來自于內(nèi)分泌失調(diào)，膠原蛋白能夠改善婦科疾病的困擾，而更年期的婦女更需要膠原蛋白供給身體所需，使得更年期婦女能夠更輕松面對各種不適。酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料，從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿。北京正規(guī)鼠尾膠原利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的...

鼠尾膠原制備詳細(xì)步驟： 1、取大鼠尾巴洗凈，75%酒精浸泡 5 分鐘； 2.將尾巴剪開、去掉皮毛，并剪成小段，抽出銀色的尾鍵 3、將尾腱剪斷置于平皿中，PBS 浸泡； 4、將所有的尾鍵放于 Tris-HCl 中，4 度過夜。 0.05mol/L Tris-bas 的 Tris-HCl 的配制方法。 稱量 6gTris 置于 1L 燒杯中，加入約 800ml 去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙猓瑵恹}酸調(diào)節(jié) PH，高壓滅菌。 5、吸去 Tris-HCl，將尾腱稱重（0.5-1 克）； 6、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中； 7、按每克尾腱 50ml 的比例，加入 0.1%醋酸溶液； 8、搖晃，使尾腱分散...

鼠尾膠原簡介：鼠尾I型膠原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備，純度達(dá)到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被，特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)；也可用于制備三維膠原凝膠，使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：1、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無菌檢驗結(jié)果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞，貼壁及生長正常。4、本品濃度1mg/mL，pH7.0時形成具有一定強(qiáng)度的三維膠原凝膠，NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長正常、PC-12細(xì)胞在三維凝膠...

膠原蛋白的功效與作用：一提起膠原蛋白，女性朋友們眼睛都放光了，因為我們都知道膠原蛋白被稱為我們皮膚的“軟黃金”，層中70%都是膠原蛋白，膠原蛋白含量的多少決定克皮膚的年輕程度！是讓我們皮膚變得有彈性的東西。大部分只知道需要補(bǔ)充膠原蛋白，但是卻不知道什么時候需要補(bǔ)充膠原蛋白，總認(rèn)為自己還年輕不需要補(bǔ)充，其實這是錯誤的觀念，膠原蛋白在女性20歲的時候就已經(jīng)開始流失了，含量逐漸下降，25歲后進(jìn)入流失的高峰期，40歲時的含量不到80歲的一半，所以我們應(yīng)該20歲就開始補(bǔ)充膠原蛋白，以保持皮膚的年輕狀態(tài)。整個操作請于冰上進(jìn)行，因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠。合肥唐山鼠尾膠原膠原蛋白的功效與作用：1、可以作為...

使用方法：1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被：以包被濃度為2μg/cm2為例，用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中，確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。開蓋在超凈臺上過夜晾干，也可以在室溫放置1小時后，用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個月以上的時間。2、三維膠原凝膠的制備：A、無細(xì)胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）將200μL本品加到置于冰浴的離心管中，加入690μL雙蒸水，然后加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅...

鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基，它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞（特別是上皮細(xì)胞）貼壁的作用，同時它也是一種天然的黏附劑，當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片，制備細(xì)胞爬 片時，可在瓶底涂一層膠原，再放上小玻片，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。通 過本實驗可掌握鼠尾膠原的制備方法，以及如何切割小玻片，并利用鼠尾膠原將其固定于 培養(yǎng)瓶內(nèi)。 實驗設(shè)備及材料： 大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理 鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養(yǎng)瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。 實驗內(nèi)容： 1、制備鼠尾膠原。 2、切割小玻片。 3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。鼠尾膠原醋...

含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。再加入23ul 10xPBS或10x培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。制備鼠...

鼠尾膠原簡介：鼠尾I型膠原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備，純度達(dá)到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被，特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)；也可用于制備三維膠原凝膠，使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：1、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無菌檢驗結(jié)果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞，貼壁及生長正常。4、本品濃度1mg/mL，pH7.0時形成具有一定強(qiáng)度的三維膠原凝膠，NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長正常、PC-12細(xì)胞在三維凝膠...

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，調(diào)節(jié)pH = 6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時，去除上清液，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀； 2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液，冰水浴中，調(diào)節(jié)PH = 6.5 ;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進(jìn)行脫鹽處理； (8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液，-40至-20°C預(yù)凍2?4小時，然后真空冷凍干燥，凍干產(chǎn)品經(jīng)進(jìn)一步處理得到...

鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對角膜上皮細(xì)胞增殖的影響：目的探討鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對體外培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞增殖的影響。方法采用鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿,以普通培養(yǎng)器皿作對照,培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài),進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)并描繪細(xì)胞生長曲線,比較不同基質(zhì)對角膜上皮細(xì)胞的增殖作用。結(jié)果使用基質(zhì)包被的培養(yǎng)器皿培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞,細(xì)胞增殖速度較普通組快,細(xì)胞形態(tài)、活力和長勢比普通組更佳,促進(jìn)增殖的能力為鼠尾膠原多聚賴氨酸明膠。結(jié)論鼠尾膠原可促進(jìn)角膜上皮細(xì)胞增殖,且增殖效果優(yōu)于多聚賴氨酸和明膠。自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞，細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽性。濟(jì)南...

鼠尾膠原蛋白的用途是什么：將尾巴從動物身體切除后，會冷凍起來，并提取尾巴里的筋腱。然后，將筋腱切成小塊，并在離心處理之前添加到由醋酸和水勾兌而成的混合物中。用這種方法，能將膠原蛋白從動物材料中分離出來。在食品加工領(lǐng)域，鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中。它還可以當(dāng)作酸奶，冰淇淋，果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用。在一些低脂肪食品中，它用于模仿全脂食品的感覺和質(zhì)地。它還用于生產(chǎn)膳食保健品，據(jù)說能讓手指甲和皮膚看起來更好。此外，還有基于膠原蛋白的保健品，可用于促進(jìn)關(guān)節(jié)健康。鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié)。杭州鼠尾膠原價格鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：將培...

膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同，每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋，其中每 3個氨基酸殘基形成一圈螺旋。3 條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋。這樣的螺旋稱為 3股螺旋。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃，這些棒狀分子首尾相連，并側(cè)向排列形成膠原微絲（其直徑可從50埃至數(shù)千埃）。膠原分子在兩端及沿軸向每隔 680埃的距離存在極性區(qū)，這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合，使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu)。制備鼠尾膠原：吸去生理鹽水，將尾腱稱重（0.5-1克）。廣州正規(guī)鼠尾膠原廠家供應(yīng)膠原蛋白的功效與作用：1...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：將培養(yǎng)器皿在室溫(25 度左右)下 放置 20 分鐘待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是 10PBS， 使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。 B．含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制 200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH 加到膠原溶液中，會由于 NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即 混勻。再加入 23ul 10PBS 10培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH 左右，如果 PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用 pH 試紙測試)。加入 760ul 的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中...

膠原蛋白的適用征狀：1、由于工作勞累，睡眠不足形成的皮膚晦暗無光、發(fā)黃、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀。2、由于年齡、太陽輻射因素引起的皮膚松弛、下垂、皺紋、干燥等皮膚衰老現(xiàn)象。3、由于體內(nèi)異常黑色素分泌旺盛，大量沉積皮膚表面，肌膚不能及時代謝出異常黑色素，形成各種色斑。4、由于長期戶外活動及皮膚保養(yǎng)不當(dāng)使膚質(zhì)受到損傷，過早出現(xiàn)細(xì)紋,皮膚干燥、脫皮、、毛孔粗大等不良癥狀。5、由于內(nèi)分泌功能紊亂，皮膚膚質(zhì)差、皮膚發(fā)油、發(fā)暗，易長青春痘留下的色印、色素沉著等。6、由于生活無規(guī)律,吸煙等因素,造成的黑眼圈,眼袋等問題。7.長期電腦旁工作，電腦輻射造成脫發(fā)，內(nèi)分泌紊亂問題。鼠尾膠原醋酸溶解：稀釋一定數(shù)...

膠原蛋白（Collagen）是結(jié)締組織和內(nèi)臟部位外基質(zhì)的主要成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布*為普遍。膠原蛋白在結(jié)構(gòu)和遺傳學(xué)上被分為不同類型，I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結(jié)構(gòu)上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體，在37℃中性條件下可形成3股螺旋結(jié)構(gòu)，被普遍用于多種細(xì)胞的培養(yǎng)基質(zhì)，如肝細(xì)胞、纖維細(xì)胞、脊髓神經(jīng)節(jié)、雪旺氏細(xì)胞等。另外，I型膠原蛋白在細(xì)胞生長、分化、遷移和組織態(tài)的發(fā)生等方面也具有重要應(yīng)用。注意事項：1） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。2） 整個操作請于冰上進(jìn)行，因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠。3） 整個操作請在無菌環(huán)境下無菌操作，避免...

鼠尾膠原：1實驗制備：實驗設(shè)備及材料：大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養(yǎng)瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。 實驗內(nèi)容：1、制備鼠尾膠原（兩個同學(xué)一組操作）。2、切割小玻片。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。實驗步驟：制備鼠尾膠原：1、取大鼠尾巴洗凈，75%酒精浸泡5分鐘；2、手持尾巴，用止血鉗夾住鼠尾的較高，折斷尾骨后拉出尾腱；3、將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡；4、重復(fù)步驟2、3，直至尾腱量夠用；5、吸去生理鹽水，將尾腱稱重（0.5-1克）。鼠尾膠原醋酸溶解：建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶...

鼠尾膠原凝膠體在皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用：在國外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到 的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細(xì)胞的 材料和方法r1]實驗材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細(xì)胞生長因子(EGF Sigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰 蛋白酶,]~DTA,細(xì)胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細(xì)胞的分離和細(xì)胞 懸液的制備:2～3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下 皮膚后.以 消化12h.輕刷表皮面,收集細(xì)胞懸液,加入細(xì)胞培養(yǎng)液. 用梯度離...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。再加入23ul 10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液...

實驗應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實驗中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果。方法制作鼠尾膠原，觀察全細(xì)胞膜片鉗實驗中，自制的鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。結(jié)果無鼠尾膠原時，前庭毛細(xì)胞懸浮于外液，不宜封接；有鼠尾膠原時，前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁，易于封接和長時間(約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH 7左右時可形成具有一定強(qiáng)度三維膠。天津正規(guī)鼠尾膠原單價鼠尾膠原凝膠體在皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用：在國外的藥理,毒理和皮...

鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,培養(yǎng)7天時進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動頻率。結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接;同一細(xì)胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的。結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體...

鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理，收集上清液；在冰水浴中，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，調(diào)節(jié)pH = 6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時，去除上清液，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個月以上的時間。蘇州鼠尾膠原推薦廠家...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上， pH 左右時可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中，在成膠過程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。 需要的溶液 （均需要無菌、 預(yù)冷） 10mg/L 酚紅用于pH 指示） 0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一 般不用)，雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠...

膠原蛋白的應(yīng)用：1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu)，使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度，適用于薄膜材料的制備；2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料．其獨特之處是：在熱處理過程中．隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化．膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì)；3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團(tuán)． 所以與水結(jié)合的能力很強(qiáng)． 這一性質(zhì)使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠；4.膠原在酸性和堿性介質(zhì)中膨脹，這一性質(zhì)也應(yīng)用于制備膠原基材料的處理工藝中。加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。武漢正規(guī)鼠尾膠原廠家供應(yīng)實驗應(yīng)用：鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立...

詳細(xì)步驟如下：1.75％酒精浸泡大鼠尾巴30min；2.將尾巴剪開、去掉皮毛，并剪成小段（3cm左右），抽出銀色的尾鍵；3.把剪碎的尾鍵置于150ml，0.1％消過毒的醋酸中，4℃放置，并不時振蕩；4.48h后取上清，4000轉(zhuǎn)離心30min后，取上清；5.分裝上清（鼠尾膠）4度（或-20度）保存。有時可繼續(xù)向4。中沉淀中加入10－20ml醋酸，重復(fù)以上步驟，以制備更多的鼠尾膠。在使用時，先將冰存的膠原液在室溫下解凍，再按以下步驟包被培養(yǎng)器皿：1）用吸管吸取膠原液，在無菌的培養(yǎng)器皿的生長面內(nèi)壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液。2）若包被的是培養(yǎng)瓶，可向培養(yǎng)瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻。讓...

鼠尾膠原實驗應(yīng)用：鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的：建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。結(jié)果：自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞，細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽性，免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征。結(jié)論：成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法，并且制作簡便,成本低廉。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被，特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。寧波正規(guī)鼠尾膠原廠家推薦鼠尾膠原蛋白的用途是什么：在食品加工領(lǐng)域，鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁...

鼠尾膠原蛋白提取、分離、純化方法的建立及鑒定：通過對鼠尾進(jìn)行剝離獲得鼠尾腱,用Tris-HCl緩沖液、胃蛋白酶處理獲得鼠尾膠原蛋白原液、反復(fù)使用氯化鈉溶液進(jìn)行分級鹽析、醋酸溶液復(fù)溶進(jìn)行鼠尾膠原蛋白的純化.超純水透析除去無機(jī)鹽類獲得純化的鼠尾膠原蛋白。通過SDS-PAGE蛋白質(zhì)電泳、氨基酸含量分析等技術(shù)手段鑒定.結(jié)果 本研究建立的方法可以獲得高純度的鼠尾膠原蛋白,純度達(dá)到電泳純.與國外進(jìn)口的商業(yè)化鼠尾膠原蛋白產(chǎn)品相比無差異。研究了提取、分離、純化參數(shù)對得率、純度的影響,建立了較優(yōu)的鼠尾膠原蛋白提取條件，胃蛋白酶用量:1∶500,酶解時間:72 h,鹽析濃度:2 mol/L,提取所用酸溶液:0.0...

提取鼠尾腱膠原工藝的優(yōu)化：單因素分析,膠原提取率在一定參數(shù)范圍內(nèi)隨浸提時間、乙酸濃度及料液比的增加而增加。正交試驗,鼠尾腱膠原提取的較佳工藝參數(shù)為浸提時間72h、乙酸濃度0.5mol·L-1、料液比為1∶40。SDS-PAGE電泳顯示,樣品為Ⅰ型膠原,單寧酸沉淀實驗顯示膠原降解程度低,傅里葉紅外光譜顯示膠原結(jié)構(gòu)完整。樣品氨基酸含量測定符合膠原蛋白的成分特征。中性膠原溶液在37℃時能夠形成固態(tài)膠原凝膠,膠原凝膠經(jīng)過碳化二亞胺(EDC)交聯(lián)后,掃描電鏡下顯示內(nèi)部相互連接,構(gòu)成孔徑適中的蜂窩狀多孔結(jié)構(gòu)。結(jié)論:成功建立并優(yōu)化鼠尾腱膠原蛋白的提取工藝,得出浸提時間、乙酸濃度及料液比等因素的較佳工藝參數(shù),...

鼠尾膠原：1實驗制備：實驗設(shè)備及材料：大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養(yǎng)瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。 實驗內(nèi)容：1、制備鼠尾膠原（兩個同學(xué)一組操作）。2、切割小玻片。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。實驗步驟：制備鼠尾膠原：1、取大鼠尾巴洗凈，75%酒精浸泡5分鐘；2、手持尾巴，用止血鉗夾住鼠尾的較高，折斷尾骨后拉出尾腱；3、將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡；4、重復(fù)步驟2、3，直至尾腱量夠用；5、吸去生理鹽水，將尾腱稱重（0.5-1克）。當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片，制備細(xì)胞爬片時，可在瓶...