《數(shù)字化轉(zhuǎn)型和跨學(xué)科實(shí)踐暑期研討會(huì)》詳解
數(shù)字化轉(zhuǎn)型和跨學(xué)科實(shí)踐暑期研討會(huì)
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鼠尾膠原簡(jiǎn)介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無(wú)菌下制備,純度達(dá)到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):1、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無(wú)菌檢驗(yàn)結(jié)果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞,貼壁及生長(zhǎng)正常。4、本品濃度1mg/mL,pH7.0時(shí)形成具有一定強(qiáng)度的三維膠原凝膠,NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長(zhǎng)正常、PC-12細(xì)胞在三維凝膠表面生長(zhǎng)正常。一種基于鼠尾膠原蛋白:各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?% 2% 1%,余量的水。昆明正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家
使用方法:1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被:以包被濃度為2μg/cm2為例,用無(wú)菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。開(kāi)蓋在超凈臺(tái)上過(guò)夜晾干,也可以在室溫放置1小時(shí)后,用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個(gè)月以上的時(shí)間。2、三維膠原凝膠的制備:A、無(wú)細(xì)胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)將200μL本品加到置于冰浴的離心管中,加入690μL雙蒸水,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入100μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,初次使用時(shí)需要測(cè)定pH值)。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。長(zhǎng)沙鼠尾膠原廠家推薦膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同。
提取鼠尾腱膠原工藝的優(yōu)化:?jiǎn)我蛩胤治?膠原提取率在一定參數(shù)范圍內(nèi)隨浸提時(shí)間、乙酸濃度及料液比的增加而增加。正交試驗(yàn),鼠尾腱膠原提取的較佳工藝參數(shù)為浸提時(shí)間72h、乙酸濃度0.5mol·L-1、料液比為1∶40。SDS-PAGE電泳顯示,樣品為Ⅰ型膠原,單寧酸沉淀實(shí)驗(yàn)顯示膠原降解程度低,傅里葉紅外光譜顯示膠原結(jié)構(gòu)完整。樣品氨基酸含量測(cè)定符合膠原蛋白的成分特征。中性膠原溶液在37℃時(shí)能夠形成固態(tài)膠原凝膠,膠原凝膠經(jīng)過(guò)碳化二亞胺(EDC)交聯(lián)后,掃描電鏡下顯示內(nèi)部相互連接,構(gòu)成孔徑適中的蜂窩狀多孔結(jié)構(gòu)。結(jié)論:成功建立并優(yōu)化鼠尾腱膠原蛋白的提取工藝,得出浸提時(shí)間、乙酸濃度及料液比等因素的較佳工藝參數(shù),有效提高了鼠尾腱膠原的提取效率。
鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法。各個(gè)材料及其重量配比為鼠尾膠原蛋白∶聚乙烯醇∶殼聚糖為余量為水,采用冷凍干燥工藝制備。本發(fā)明所制備的止血材料主要采用鼠尾膠原蛋白制備,較傳統(tǒng)的止血材料不可吸收、容易引起機(jī)體過(guò)敏、止血效果差等缺點(diǎn),本發(fā)明所制備的止血材料具有人體內(nèi)可吸收,生物相容性好;止血效果快,具有很強(qiáng)的親水性;同時(shí)可啟動(dòng)血小板的凝聚,一旦血小板凝聚,就可形成血栓,進(jìn)而促使血漿結(jié)塊阻止血流。同時(shí),膠原表面的特定區(qū)域可以與細(xì)胞表面存在的類(lèi)似纖連蛋白的糖蛋白結(jié)合,可以起到防止腸粘連的功效。膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產(chǎn)率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫(yī)用材料。
鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I、無(wú)菌10×PBS、無(wú)菌蒸餾水、無(wú)菌1M NaOH。2)確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3)在冰上放置無(wú)菌管以收存膠原蛋白I。4)在無(wú)菌條件下執(zhí)行以下步驟。4.1加入10×PBS(終體積/10)mL4.2計(jì)算要使用的膠原蛋白I的體積(不要添加到管中直到步驟4.6為止)終體積x終膠原蛋白I濃度(mg/mL)。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的膠原體積×0.023)mL的無(wú)菌冰冷1M NaOH。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無(wú)菌冰冷蒸餾水:添加蒸餾水體積=V(終)—V(膠原蛋白)—V(10× PBS)—V(1M NaOH)4.5混合管中的物質(zhì)并放入冰中。4.6加入膠原蛋白I并計(jì)算體積,混勻,冰上備用。5)膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時(shí)。6)使用時(shí),無(wú)菌條件下將溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)裝置中37°C凝膠30min。鼠尾膠原蛋白的用途是什么:顧名思義,鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來(lái)的物質(zhì)。貴陽(yáng)正規(guī)鼠尾膠原報(bào)價(jià)
使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu)。昆明正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家
一種基于鼠尾膠原蛋白:1.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于凍干止血材料中,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?% 2% 1%,余量的水。2.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于鼠尾膠原蛋白來(lái)源于各品系SFP級(jí)大鼠鼠尾。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于劑型為創(chuàng)可貼。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于劑型為噴霧劑。昆明正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家
蘇州君欣生物科技有限公司屬于精細(xì)化學(xué)品的高新企業(yè),技術(shù)力量雄厚。公司是一家有限責(zé)任公司企業(yè),以誠(chéng)信務(wù)實(shí)的創(chuàng)業(yè)精神、專(zhuān)業(yè)的管理團(tuán)隊(duì)、踏實(shí)的職工隊(duì)伍,努力為廣大用戶提供***的產(chǎn)品。公司擁有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),具有原代細(xì)胞,無(wú)血清細(xì)胞凍存液,干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基,動(dòng)物疾病模型等多項(xiàng)業(yè)務(wù)。蘇州君欣生物科技自成立以來(lái),一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專(zhuān)業(yè)化路線,得到了廣大客戶及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持。