鼠尾膠原蛋白I型，用那一種膠原酶可以溶解：1．將膠原加入到0.1M的醋酸中，制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染為什么不能加血清：傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染試劑一般會增加細(xì)胞的通透性，這樣會把血清中的成分帶入細(xì)胞，造成細(xì)胞毒性。陽離子脂質(zhì)體，轉(zhuǎn)染的過程是帶正電的脂質(zhì)體與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成復(fù)合物被細(xì)胞內(nèi)吞。血清中含有大量的蛋白質(zhì)，在轉(zhuǎn)染過程中，帶負(fù)電的蛋白質(zhì)可能干擾陽離子脂...

血清血液成分（加入抗凝劑）血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血塊收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血...

糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一，McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白，該法常用來顯示糖原和其他多糖，該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過碘酸(又稱高...

特染的應(yīng)用價(jià)值：現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍，但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴，對于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件以及較為昂...

昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法：將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。加0...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染操作方法：轉(zhuǎn)染，是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因?qū)儆谕ㄟ^物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例；化學(xué)介...

石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒（離心柱型）：原理簡介：改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶，然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，較后低鹽的RNasefr...

RNA穩(wěn)定方法：1.在裂解緩沖液中立即溶解，使RNase失活。然后樣品可以立即處理或冷凍保存。2.浸泡在穩(wěn)定試劑中(如DNA/RNAShield)，使核酸酶失活，并在環(huán)境溫度下長時(shí)間保護(hù)核酸。這對正在實(shí)地收集樣本或處理珍貴的病人樣本(例如組織活檢、全血等)的研...

糖原染色：細(xì)胞內(nèi)含1，2-乙二醇基的多糖類經(jīng)過碘酸氧化后產(chǎn)生醛基，與特殊染液作用，使無色品紅變成紅色化合物，沉淀于胞質(zhì)之中。紅色的深淺與細(xì)胞中起反應(yīng)的1，2-乙二醇基的量呈正比。用于不典型巨核細(xì)胞與李—斯細(xì)胞的鑒別，前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性，后者為陰性或弱陽性；...

糖原染色：1、概況PAS染色法（PeriodicAcid-Schiffstain）在組織學(xué)上，主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用...

總RNA的定義：總RNA=mRNA+tRNA+rRNA，即：總RNA就是指mRNA、tRNA、rRNA的總和。這是在還沒有發(fā)現(xiàn)lncRNA等microRNA的時(shí)候的概念。但是卻被各大公司默認(rèn)的概念，一直延續(xù)至今。所以各位可以去各大公司的網(wǎng)站，看一看總RNA提取...

影響轉(zhuǎn)染試驗(yàn)的因素：細(xì)胞狀態(tài)變化：（1）轉(zhuǎn)染試劑與細(xì)胞不匹配細(xì)胞轉(zhuǎn)染較適合的不是原代細(xì)胞，也不是傳代很多次的細(xì)胞。這是因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)室中保存數(shù)月和數(shù)年后會經(jīng)歷突變，總?cè)旧w重組或基因調(diào)控變化等而演化。這會導(dǎo)致和轉(zhuǎn)染相關(guān)的細(xì)胞行為的變化。較適合轉(zhuǎn)染的細(xì)胞是經(jīng)...

糖原染色生物技術(shù)優(yōu)勢：（1）擁有針對不同組織的特殊固定液；（2）擁有日本進(jìn)口的各種染料，保證切片染色效果；（3）擁有千錘百煉的專業(yè)人才隊(duì)伍，保證實(shí)驗(yàn)快速、有效的完成。實(shí)驗(yàn)樣本要求：（1）植物材料在選擇時(shí)須盡可能不損傷植物體或所需要的部分；（2）動物材料取用時(shí)需...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染那些事兒：1.選擇傳代次數(shù)較低并處于對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染。對大多數(shù)細(xì)胞而言，均需要在轉(zhuǎn)染當(dāng)天或前現(xiàn)在鋪板，第二天上午進(jìn)行轉(zhuǎn)染，48h后收集細(xì)胞進(jìn)行功能檢測。對于原代細(xì)胞，可用促有絲分裂刺激物進(jìn)行細(xì)胞活化。2.對于貼壁細(xì)胞，一般要求在轉(zhuǎn)染前一日，用胰...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的方法有哪些：1..電穿孔法。通過短暫的高電場電脈沖處理細(xì)胞，沿細(xì)胞膜的電壓差異會導(dǎo)致細(xì)胞膜的暫時(shí)穿孔。DNA被認(rèn)為是穿過孔擴(kuò)散到細(xì)胞內(nèi)的。電脈沖和場強(qiáng)的優(yōu)化對于成功的轉(zhuǎn)染非常重要，因?yàn)檫^高的場強(qiáng)和過長的電脈沖時(shí)間會不可逆地傷害細(xì)胞膜而裂解細(xì)胞。理...

無血清凍存液注意事項(xiàng)：1、請選擇對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行凍存。2、凍存液加入細(xì)胞后，請盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長期凍存細(xì)胞，請轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分，為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服...

細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng)：1.為保持細(xì)胞較大存活率，一般都采用慢凍存融的方法。2.凍存物距液氮面越近溫度越低。標(biāo)準(zhǔn)的低凍速度為－1℃~12℃/分鐘，當(dāng)溫度下降達(dá)－25℃時(shí)，下降速度可增至－5~－10℃/分鐘，到－100℃時(shí)則可迅速凍入液氮中。因此要適當(dāng)掌握凍存物下降...

特染的應(yīng)用價(jià)值：現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍，但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴，對于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件以及較為昂...

石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒（離心柱型）：原理簡介：改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶，然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，較后低鹽的RNasefr...

在細(xì)胞中，根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同，RNA主要分三類，即tRNA（轉(zhuǎn)運(yùn)RNA），rRNA（核糖體RNA），mRNA（信使RNA）。mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板，內(nèi)容按照細(xì)胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄；tRNA是mRNA上堿基序列（即遺傳密碼子）的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者；rRN...

人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí)，外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜...

細(xì)胞電轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的幾點(diǎn)建議：1.電場強(qiáng)度要合適合適的電場強(qiáng)度對于電轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)非常重要，電場強(qiáng)度不能過高，過高會增加細(xì)胞的死亡率；也不能過低，過低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同細(xì)胞系具有不同的較佳場強(qiáng)值，實(shí)驗(yàn)前應(yīng)測定所轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的較佳電場強(qiáng)度。2.細(xì)胞狀態(tài)...

永生化的細(xì)胞系往往相當(dāng)健壯，因此，使用實(shí)驗(yàn)室自制的凍存培養(yǎng)基，效果也不錯(cuò)。典型的配方是在生長培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清，或只是在血清中加入10%的DMSO。DMSO的作用是取代細(xì)胞中的一些水，以防止冰晶形成，刺穿細(xì)胞。據(jù)賽默飛世爾科...

動物細(xì)胞RNA提?。?、懸浮細(xì)胞：可直接離心后棄掉培養(yǎng)基，用無菌PBS清洗1~2遍后，再用適量PBS懸浮起來，然后再加入裂解液進(jìn)行裂解。千萬不要完全棄掉液體后，往沉淀細(xì)胞里直接加入裂解液，這樣會使外表層的細(xì)胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細(xì)胞外側(cè)，從而限制沉...

PAS染色的臨床意義①幫助鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞或Reed-Sternberg細(xì)胞，前者呈強(qiáng)陽性反應(yīng)，后者呈弱陽性或陰性反應(yīng)。②幫助鑒別戈謝細(xì)胞和尼曼-匹克細(xì)胞，前者呈強(qiáng)陽性反應(yīng)，后者呈弱陽性反應(yīng)，且空泡中心為陰性反應(yīng)。③幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移...

無血清快速細(xì)胞凍存液，通用于各種動物細(xì)胞株。特別配方具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細(xì)胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。產(chǎn)品特色：1.高安全性，...

當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí)，外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合，進(jìn)而啟動靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可以被蛋...

細(xì)胞凍存：細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中，在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi)，而且細(xì)胞一旦離開活的開始原代培養(yǎng)，它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要。細(xì)胞冷凍儲存...