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短串聯(lián)重復(fù)(Short tandem repeats, STR),又稱微衛(wèi)星DNA(Microsatellite DNA)或簡單重復(fù)序列(Simple repeat sequence, SRS或SSR),是普遍存在于原核生物和真核生物基因組中的核苷酸重復(fù)序列。有絲分裂過程中DNA鏈之間的錯配引起的復(fù)制滑動被認為是導(dǎo)致STR產(chǎn)生的較為常見原因,并且依據(jù)不同復(fù)制單元大小的不同以及不同物種之間,復(fù)制滑動發(fā)生的概率也不相同。STR已被廣泛應(yīng)用于親子鑒定、個體識別、司法鑒定、交通事故鑒定、(造血干細胞)移植醫(yī)治后嵌合情況監(jiān)測等領(lǐng)域。上海翼和生物業(yè)務(wù)領(lǐng)域涵蓋多重PCR靶向捕獲二代測序、STR遺傳背景鑒定和SNP基因分型三大板塊。南京細胞鑒定數(shù)據(jù)庫比對
為什么要做支原體污染檢測?在細胞研究領(lǐng)域,支原體是臭名昭著的污染源,許多實驗室都深受其害。支原體傳染能在不知不覺中干擾研究結(jié)果,浪費大量的資金投入。研究表明,95%以上污染細胞的支原體屬于以下四種類型:口腔支原體(M.orale)、精氨酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii,此種支原體為牛源性)。這是四種比較常見的污染細胞的支原體菌群,但實際中能夠污染細胞的支原體的種類是很多的。國外的調(diào)查證明,有二十多種支原體可以污染細胞,并且有的細胞可以同時被兩種以上的支原體污染。廣州細胞鑒定周期細胞STR鑒定助力論文發(fā)表Cancer Research。
上海翼和公司利用熒光PCR擴增小鼠基因組中9個STR基因位點,PCR產(chǎn)物在毛細管電泳分離之后可通過熒光檢測進行基因分型。根據(jù)所得的STR分型結(jié)果與細胞STR數(shù)據(jù)庫(EXPASY)比對,從而鑒定樣品所屬的小鼠細胞系。2017年4月,翼和客戶山東泰山醫(yī)學(xué)院免疫所發(fā)表了EBioMedicine上的一篇論文,該文中編輯要求對突變小鼠的遺傳背景進行鑒定,翼和公司應(yīng)用基于多重PCR與二代測序的近交系小鼠檢測方案2.0版本方案,成功的對基因編輯小鼠進行了測試,并對小鼠遺傳背景進行了STR鑒定,雜志編輯成功接受。
在過去的的幾十年間,在細胞生物學(xué)領(lǐng)域,文章一直在發(fā)表,科研成果一直在公布,但是當(dāng)中哺乳動物細胞被錯誤鑒定,存在交叉污染的情況也同時存在著。2010年有雜志(IJC)統(tǒng)計出一列表,在346篇文章中,有 103篇存在細胞被Hela細胞污染的情況。當(dāng)然還有,在2001年,科學(xué)家在一篇論文里報道了一株新建立的大鼠(rat)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)的細胞系(留個印象是大鼠來源的),命名為RGC-5。在隨后的十幾年時間里,至少230篇論文的研究與假設(shè)是建立在這株細胞系上。結(jié)果在2009年,序列測定結(jié)果表明,RGC-5是一株小鼠(mouse)細胞。隨著越來也多細胞被污染的問題出現(xiàn),大家也開始意識到細胞污染的嚴重性,2007年,NIH強烈建議在使用細胞時進行鑒定。目前STR基因分型方法被認為是檢測細胞交叉污染和性質(zhì)鑒定極為有效以及準確的方法,多個細胞庫分別提供了各種細胞株的STR基因分析數(shù)據(jù)以供參考比對。常見的細胞系除了發(fā)現(xiàn)種屬內(nèi)的交叉污染/錯誤鑒定,還有部分細胞系被發(fā)現(xiàn)連種屬都被錯誤鑒定了!
有名的Hela細胞,源自一名美國黑人婦女的子宮頸細胞。這位理應(yīng)在生物學(xué)史上占據(jù)一定地位的女性,名叫Henrietta Lacks,死于子宮頸*。自1951年至今,Hela細胞已被培養(yǎng)了60多年,分裂了近2萬次,仍然無停止跡象,是為不死的傳說,參見一本書《永生的海拉》。Hela為什么可以永生,據(jù)說其基因組插入了人類HPV18,成了HPV細胞,這些可惡的HPV細胞不僅在我們?nèi)梭w里不停的分裂繁殖,直到我們逝去,在分離細胞系里仍可以不斷的分裂,一般細胞分裂后端粒會老化變短,直至細胞系終結(jié)。Hella細胞似乎在每次分裂時,端粒酶活性很高,可以復(fù)制出新的端粒,以維持端粒長度,避開所謂的“海佛烈克極限”(Hayflick limit)(正常的細胞系,分裂極限在52次左右)。本文使用的Hela**細胞,由上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司鑒定。成都STR鑒定數(shù)據(jù)庫
無論是小鼠、大鼠、人我們都能區(qū)分。關(guān)鍵價格超便宜,為您第1時間鑒定細胞來源。南京細胞鑒定數(shù)據(jù)庫比對
什么是細胞系鑒定?所謂細胞系鑒定即通過STR(短串聯(lián)重復(fù))圖譜所建立細胞系的遺傳特征。一株細胞系的遺傳特征確立后,細胞系可以通過定期的檢測,以防止出現(xiàn)細胞系被誤認或交叉污染的情況。為什么要進行細胞系鑒定?由于細胞系發(fā)生交叉污染或身份誤認,將導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)的無效或數(shù)據(jù)誤導(dǎo)。NIH已發(fā)出公告,討論細胞系鑒定的必要性與重要性,并且越來越多的的期刊要求文章發(fā)表前、需提供細胞鑒定數(shù)據(jù)。細胞系用錯的概率有多大?據(jù)ATCC估計,1977年錯誤使用細胞的概率是16%,1999年是18%。根據(jù)我們的經(jīng)驗,國內(nèi)細胞系用錯的概率不低于20%。即如果一個研究所有二十個課題組,按概率估計,有4個課題組用的細胞是錯的。南京細胞鑒定數(shù)據(jù)庫比對
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司專注技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品研發(fā),發(fā)展規(guī)模團隊不斷壯大。目前我公司在職員工以90后為主,是一個有活力有能力有創(chuàng)新精神的團隊。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括:細胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù)等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營宗旨,深受客戶好評。公司深耕細胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù),正積蓄著更大的能量,向更廣闊的空間、更寬泛的領(lǐng)域拓展。