制備超聲微泡設(shè)計(jì)

微泡空化時(shí)細(xì)胞膜和血管通透性的變化。電子顯微鏡已經(jīng)證明，在細(xì)胞膜內(nèi)產(chǎn)生的小孔與微泡的崩潰和射流的產(chǎn)生有關(guān)。根據(jù)超聲參數(shù)，細(xì)胞膜內(nèi)產(chǎn)生的孔隙可能是短暫的，導(dǎo)致細(xì)胞死亡或成功地將外源物質(zhì)引入細(xì)胞質(zhì)。除了改變細(xì)胞膜通透性外，將超聲應(yīng)用于含有微泡的小血管還能改變血管壁的通透性，導(dǎo)致顆粒外滲到間隙。這種***通透性的變化取決于泡的大小、殼的組成以及***直徑與泡直徑的比值。改變超聲參數(shù)，如聲壓和脈沖間隔，以及物理參數(shù)，如注射部位和微血管壓力，可以比較大限度地提高微球的局部藥物遞送。在超聲中心頻率為1MHz的情況下，0.75MPa的壓力足以在體外大鼠肌肉微循環(huán)中產(chǎn)生***破裂。超聲脈沖間隔既影響觀(guān)察到外滲的點(diǎn)數(shù)，也影響輸送的物質(zhì)體積，兩者在脈沖間隔為5s時(shí)均達(dá)到比較大值。人們認(rèn)為，要使輸送的物質(zhì)體積比較大化，需要將微泡補(bǔ)充到脈沖之間的區(qū)域。研究還表明，隨著***血壓的升高，微泡通過(guò)***壁的運(yùn)輸也會(huì)增加。幾種類(lèi)型的配體已被偶聯(lián)到微泡上，包括抗抗體、多肽和維生素。制備超聲微泡設(shè)計(jì)

將配體附著在微泡表面的基本方法有兩種：要么通過(guò)直接共價(jià)鍵，要么通過(guò)生物素-親和素連接。生物素-親和素連接是一種直接的技術(shù)，其中生物素化的配體通過(guò)親和素橋連接到生物素化的微泡上。盡管生物素-親和素連鎖在概念驗(yàn)證和臨床前靶向研究中很有用，但免疫原性使其無(wú)法轉(zhuǎn)化為人類(lèi)。共價(jià)連接是更可取的和可以在創(chuàng)建微泡殼之前或之后進(jìn)行。偶聯(lián)到預(yù)形成的微泡上的策略包括通過(guò)碳二亞胺和n-羥基磺基琥珀酰亞胺將配體的氨基與微泡殼上的羧基結(jié)合，或者可選地將配體上的巰基與微泡殼上的馬來(lái)酰亞胺結(jié)合。關(guān)于偶聯(lián)化學(xué)的更多細(xì)節(jié)可以在A.L.Klibanov**近的一篇綜述中找到。對(duì)于脂質(zhì)包被的藥物，使用預(yù)形成的配體-脂聚合物的優(yōu)點(diǎn)是，在臨床環(huán)境中，從微泡產(chǎn)生到給藥到患者體內(nèi)所需的步驟更少。然而，通過(guò)后期連鎖，通過(guò)對(duì)預(yù)形成的微泡進(jìn)行一系列修飾，可以更有效地利用配體。制備超聲微泡設(shè)計(jì)超聲照射聯(lián)合納米微泡的生物學(xué)效應(yīng)。

超聲微泡造影劑在******中應(yīng)用。***的**早指標(biāo)之一是單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的***和附著。這是由白細(xì)胞粘附分子（lam）如細(xì)胞間粘附分子-1（ICAM-1）的上調(diào)介導(dǎo)的。1997年，用于常規(guī)心肌超聲造影的帶有白蛋白殼的超聲造影劑在某些病理?xiàng)l件下通過(guò)心肌的轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間較慢。在體外實(shí)驗(yàn)中，這些微泡優(yōu)先粘附在表達(dá)lam的內(nèi)皮細(xì)胞上。隨后，含有針對(duì)ICAM-1的單克隆抗體的超聲造影劑在體外和體內(nèi)均顯示出良好的結(jié)合效率。Villanueva等人和其他人描述了使用微泡對(duì)炎癥進(jìn)行主動(dòng)靶向，其中在炎癥反應(yīng)期間***的內(nèi)皮細(xì)胞使用微泡進(jìn)行靶向。Takalkar等人使用平行板流室來(lái)測(cè)定抗icam-1靶向的微泡對(duì)白細(xì)胞介素-1人工***的內(nèi)皮細(xì)胞的粘附性。增加了40倍與非靶向?qū)φ障啾?，靶向微泡發(fā)生了微泡粘附。微泡以高達(dá)100s-1的剪切速率粘附，這是較大小靜脈的特征。其他白細(xì)胞粘附分子在炎癥和缺血-再灌注損傷中上調(diào)。特別有趣的是p-選擇素，它已被超聲造影劑靶向炎癥小鼠模型。Rychak等人**近證明了可變形微泡與p-選擇素的靶向粘附。

    通過(guò)超聲微泡誘導(dǎo)空化可以改變**血管和細(xì)胞膜的通透性。穩(wěn)定空化(SC)和慣性空化(IC)都可以對(duì)*組織的血管壁和細(xì)胞膜造成機(jī)械干擾，從而提高EPR在**中的作用。超聲作用于含有超聲微泡的血管，可改變血管壁的通透性，導(dǎo)致藥物外滲至間隙。***通透性的改變?nèi)Q于多種因素，包括殼成分、氣泡大小、***直徑與氣泡直徑之比以及超聲參數(shù)。除了改變血管壁的通透性外，超聲微泡的空化還可以增強(qiáng)細(xì)胞膜的通透性。氣泡的破裂和相關(guān)射流的產(chǎn)生可以瞬間破壞相鄰的細(xì)胞膜。細(xì)胞膜內(nèi)產(chǎn)生小孔，導(dǎo)致可修復(fù)或不可修復(fù)的聲穿孔。在不同的超聲參數(shù)下，細(xì)胞膜內(nèi)會(huì)產(chǎn)生短暫的孔，外源物質(zhì)因此可以被運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞質(zhì)中。超聲微泡的崩潰還可以引起**組織中的細(xì)胞死亡，這進(jìn)一步減輕了固體應(yīng)力，并可以減少更深穿透的障礙。研究表明，空化效應(yīng)可以通過(guò)三種不同的機(jī)制改變血管和細(xì)胞膜通透性:(1)在SC過(guò)程中振蕩氣泡受到規(guī)律的機(jī)械干擾時(shí)，細(xì)胞膜電位發(fā)生改變以促進(jìn)內(nèi)吞攝取。(2)在從SC到IC的轉(zhuǎn)變過(guò)程中，振蕩泡的體積發(fā)生了變化。血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的間隙暫時(shí)增加，血管內(nèi)皮的完整性被破壞，從而增強(qiáng)了活性物質(zhì)的擴(kuò)散，活性物質(zhì)可以進(jìn)入組織。(3)基于IC產(chǎn)生的聲孔作用，血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生瞬時(shí)孔隙。 微泡表面選擇合適的偶聯(lián)化學(xué)和修飾順序取決于配體的類(lèi)型。

微泡的慣性空化和破壞可產(chǎn)生強(qiáng)大的機(jī)械應(yīng)力，增強(qiáng)周?chē)M織的滲透性，并可進(jìn)一步增加藥物從血液外滲到細(xì)胞質(zhì)或間質(zhì)中。超聲造影劑是高回聲的微泡，具有許多獨(dú)特的性質(zhì)。微泡基本上可以提高常規(guī)超聲成像對(duì)微循環(huán)的靈敏度。微泡響應(yīng)入射超聲脈沖的共振導(dǎo)致非線(xiàn)性諧波發(fā)射，在微泡特異性成像中作為微泡的特征。高頻超聲的穩(wěn)定空化也可以溫和地增加組織的通透性，即使在高的情況下也不會(huì)造成任何損害聲壓。微泡可以攜帶藥物，釋放藥物超聲介導(dǎo)的微泡破壞同時(shí)增強(qiáng)血管通透性，增加藥物在組織中的沉積?？梢詫⒏鞣N靶向配體偶聯(lián)到微泡表面，實(shí)現(xiàn)配體定向和位點(diǎn)特異性積累，用于靶向成像。氣泡將改變血管壁，允許藥物劑外滲，通過(guò)將微泡與顆粒和染料共同注射，可評(píng)估血管外藥物遞送的可行性。西藏肺靶向超聲微泡

熒光標(biāo)記的靶向微泡在血管生成過(guò)程中的應(yīng)用。制備超聲微泡設(shè)計(jì)

超聲已被證明可以增強(qiáng)溶栓，超聲與微泡結(jié)合使用，在溶解血栓方面比單獨(dú)使用造影劑或超聲更成功。**近，Unger等人開(kāi)發(fā)了一種針對(duì)活化血小板的超聲造影劑MRX408。該試劑使用另一種結(jié)合方法，將精氨酸甘氨酸天冬氨酸（RGD）分子直接附著在造影劑的表面。RGD與活化血小板上存在的糖蛋白IIB/IIIA受體結(jié)合。MRX408已被證明可以提高血栓的可見(jiàn)性，并在體外和體內(nèi)更好地表征血栓的范圍。超聲已被證明可以增強(qiáng)溶栓，無(wú)論是否添加微泡，通常與靜脈紿藥溶栓劑結(jié)合使用。超聲頻率為1-2 MHz時(shí)，已證明有效溶栓并將***相關(guān)出血降至比較低。靶向微泡或游離微泡可靜脈注射或直接進(jìn)入血栓。超聲引導(dǎo)溶栓***背后的機(jī)制涉及到微泡本身的機(jī)械特性。在低頻和高功率下，造影劑會(huì)膨脹和收縮，并有可能使血栓破裂。此外，t-PA等溶栓劑可以被納入氣泡中，并在氣泡破裂時(shí)沉積到血栓中。制備超聲微泡設(shè)計(jì)