天津熒光染料luciferin

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-11-19

第二種***使用的DNA染色方法是Hoechst染料,**初由化學(xué)公司HoechstAG生產(chǎn)。Hoechst33258、Hoechst33342和Hoechst34580都是鄰苯二甲酰亞胺,具有向A-T富集區(qū)插入的趨勢(shì),因此后者不常使用。與DAPI相似,此類染料受到紫外線激發(fā)并在455nm下發(fā)射比較大值,在無結(jié)合狀態(tài)下變?yōu)?10–540nm。Hoechst染料還具有細(xì)胞滲透作用,因此可用于固定細(xì)胞和活細(xì)胞。與DAPI不同是,Hoechst染料毒性更低。DNA染色劑碘化丙啶無法透過細(xì)胞膜。在細(xì)胞培養(yǎng)中,因?yàn)樵撊旧珓o法進(jìn)入完好的細(xì)胞內(nèi),所以常常被用來區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。碘化丙啶也是一種結(jié)合劑,但對(duì)不同的堿基沒有特異性。在核酸結(jié)合態(tài)下,其比較大激發(fā)波長為538nm,比較高發(fā)射波長為617nm。未結(jié)合狀態(tài)下碘化丙啶的比較大激發(fā)和發(fā)射被移到較短的波長和較弱的強(qiáng)度。它也可以在不改變其熒光特性的情況下與RNA結(jié)合。要區(qū)分DNA和RNA,必須使用足夠的聚合酶。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。天津熒光染料luciferin

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花青類熒光染料屬于共振染料,其特征在于具有離域電荷的氮原子(兩個(gè)氮原子)之間的聚甲炔染料。由于與生物分子的低非特異性結(jié)合以及明亮的熒光,花青類熒光染料已成為一些當(dāng)下流行的用于標(biāo)記核酸的熒光染料。花青類染料分為兩大類:非磺化花青類染料-該組中的一些染料包括cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7和cy7.5。在大多數(shù)情況下,這些染料的特點(diǎn)是水溶性低,但胺的鹽酸鹽和酰肼除外。它們首先溶解在有機(jī)溶劑(共溶劑)中,然后在生物分子標(biāo)記期間添加到含有生物分子的溶液中。而“Cy”**花青,***個(gè)數(shù)字**存在于亞油啉基團(tuán)之間的碳原子數(shù)。另一方面,添加0.5后綴以表示苯并稠合花青。這些熒光染料通常用于有機(jī)介質(zhì)。磺化類花青染料-該組由磺基-Cy3、磺基-Cy5和磺基-Cy7組成。顧名思義,這些花青的特征是一個(gè)磺基,它有助于染料分子在水相中的溶解。與非磺化花青相比,這些花青更易溶于水,因此不需要溶解在有機(jī)溶劑中進(jìn)行標(biāo)記?;腔ㄇ嗤ǔS糜跇?biāo)記疏水性蛋白質(zhì)、水溶液中的納米顆粒以及可能被DMSO或DMF變性的敏感蛋白質(zhì)。兩組染料均可用于標(biāo)記以下生物分子:肽、寡核苷酸和DNA、抗體、可溶性蛋白質(zhì)。江蘇生物發(fā)光熒光染料熒光染料可以單獨(dú)使用,也可以組合成復(fù)合熒光染料使用。

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注:建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,從而確定比較高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期。保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲(chǔ)存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復(fù)凍融。如果有條件,對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤猓ǚ乐寡趸?,穩(wěn)定性和保存時(shí)間更長。 注射方式,動(dòng)物類型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射,因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,確定比較好信號(hào)平臺(tái)期和比較好的檢測(cè)時(shí)間。熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應(yīng)用上沒有差別,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻(xiàn)來看,鉀鹽的使用率遠(yuǎn)高于鈉鹽,尤其是體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。兩者功效相同。 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

蛋白熒光標(biāo)記技術(shù)是目前**為常見的蛋白體外標(biāo)記技術(shù),利用級(jí)聯(lián)放大反應(yīng)原理,將極度敏感性且易于檢測(cè)的熒光素通過某個(gè)基團(tuán)吸附或共價(jià)結(jié)合后,標(biāo)記到特異性抗原或抗體分子上,應(yīng)用熒光顯微鏡觀察熒光標(biāo)記物因增強(qiáng)放大效應(yīng)而產(chǎn)生顏色、光譜等變化,以分析示蹤相應(yīng)抗體或抗原性質(zhì)與含量的方法。該技術(shù)在具有高度精確性的熒光顯微鏡下,借助高度靈敏性的熒光檢測(cè),在各種生物過程中對(duì)目的蛋白進(jìn)行可視化,從而通過抗原抗體高度特異性免疫定量表達(dá)或在細(xì)胞研究中定位。蛋白熒光標(biāo)記已成為研究蛋白質(zhì)互作、酶活性、***示蹤以及細(xì)胞分選重要工具。蛋白標(biāo)記常用熒光染料隨著蛋白熒光標(biāo)記技術(shù)不斷發(fā)展,各類熒光素廣泛應(yīng)用于生物實(shí)驗(yàn)中,目前常用標(biāo)記蛋白/抗體的熒光素主要有BODIPY類、香豆素類、羅丹明類、近紅外類、NBD胺類以及菁染料等。南京星葉生物科技有限公司提供多種性價(jià)比高的各類活化熒光素,其熒光染料覆蓋波長范圍從350nm到790nm,例如Cy系列、SuperFluor系列(效果同AlexaFluor系列)等,用于標(biāo)記抗體、多肽以及蛋白功能基團(tuán),繼而生成分子探針,通過熒光成像進(jìn)行相應(yīng)檢測(cè)。DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。

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5(6)-FITC(Fluorescein5(6)-isothiocyanate)是一種胺活性衍生物的熒光染料,具有廣泛的應(yīng)用,作為抗體和其他探針標(biāo)記,用熒光顯微鏡,流式細(xì)胞儀、免疫熒光方法如ELISA和Western印跡實(shí)驗(yàn)。熒光素衍生物具有高吸收率、優(yōu)異的熒光量子產(chǎn)率和良好的水溶性,是流式細(xì)胞儀和免疫熒光中生物檢測(cè)**常用的熒光標(biāo)記之一。**常用的熒光素包括用于標(biāo)記蛋白質(zhì)(特別是抗體)的異硫氰酸熒光素[5(6)-FITC)],5-FITC和用于標(biāo)記肽和寡核苷酸的羧基熒光素(5-FAM和5(6)-FAM)。BIOFOUNT提供***的基于熒光素的染料、底物和偶聯(lián)物,以及一系列具有針對(duì)細(xì)胞標(biāo)記和檢測(cè)優(yōu)化的特性的質(zhì)量iFluor?熒光標(biāo)記染料。SUPER Green I核酸染料特點(diǎn) 。合肥熒光染料Fluor 680

小動(dòng)物成像熒光染料是一種先進(jìn)的技術(shù)可以在小動(dòng)物體內(nèi)實(shí)時(shí)觀察和研究細(xì)胞、組織的功能和代謝過程。天津熒光染料luciferin

Cy7DiC18(DiR)是一個(gè)親脂性、近紅外熒光花青染料。這個(gè)染料常用于標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)膜。Cy7DiC18(DiR)的兩個(gè)18-碳鏈插入到細(xì)胞膜,從而進(jìn)行特定的、穩(wěn)定的細(xì)胞染色,幾乎不會(huì)發(fā)生細(xì)胞間的染料轉(zhuǎn)移。Cy7DiC18(DiR)(近紅外熒光)和其他細(xì)胞膜熒光染料如DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)配合使用,為多色成像和流式細(xì)胞分析提供了有效的工具。Cy7DiC18(DiR)染色后可進(jìn)行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他試劑)的固定,但不建議在染色后進(jìn)行透化的過程。此外,在固定透化(室溫下用0.1%TritonX-100透化)后,也可以很好地進(jìn)行質(zhì)膜染色。

1、Cy7DiC18(DiR)染色固定的細(xì)胞或組織樣品時(shí),通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛進(jìn)行固定,使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?huì)導(dǎo)致熒光背景較高。

2、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 天津熒光染料luciferin