廣西鄭州熒光染料

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-10-14

一種發(fā)光雜環(huán)化合物,存在于生物發(fā)光的生物體中,如螢火蟲。在含有三磷酸腺苷的情況下,通過熒光素酶氧化脫羧產(chǎn)生光。可用于熒光素酶生物發(fā)光成像和細(xì)胞高通量篩選應(yīng)用。D-熒光素(D-Luciferin)是螢火熒光素酶底物,其量子效率為0.88,是Luminol的20倍。反應(yīng)原理:首先,在鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與ATP反應(yīng),接著它被氧化形成二氧雜環(huán)丁烷結(jié)構(gòu)并發(fā)出黃綠色的光。Luciferin-luciferase發(fā)光用于ATP監(jiān)控以測(cè)定細(xì)胞活力以及細(xì)菌計(jì)數(shù)。它還用于報(bào)告基因檢測(cè)??膳c小動(dòng)物***成像系統(tǒng)配套使用,用于標(biāo)記LUC基因后的體內(nèi)***熒光檢測(cè)。D-熒光素游離酸(D-Luciferin,freeacid)、D-熒光素鉀鹽(D-Luciferin,potassiumsalt)和D-熒光素鈉鹽(D-Luciferin,sodiumsalt),鉀鹽、鈉鹽的形式是**通用的,因?yàn)樗鼈兌家兹苡谒?。鉀鹽也是***動(dòng)物檢測(cè)使用的主要形式。它們的激發(fā)和發(fā)射波長分別為328nm和533nm。異硫氰酸熒光素含有一個(gè)異硫氰酸酯反應(yīng)基團(tuán)這有助于其對(duì)通常存在于生物分子中的動(dòng)漫和巰基基團(tuán)具有反應(yīng)性。廣西鄭州熒光染料

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染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類親脂性熒光染料家族,用于標(biāo)記細(xì)胞膜和疏水性組織。這是一類環(huán)境敏感型熒光染料,當(dāng)它們與膜結(jié)合或者與親脂性生物分子(例如蛋白質(zhì),雖然在水中其熒光強(qiáng)度很弱)結(jié)合時(shí),其熒光強(qiáng)度***增強(qiáng)。它們具有很高的淬滅系數(shù),偏光依賴性和很短的激發(fā)壽命。一旦應(yīng)用于細(xì)胞中,這種染料會(huì)在細(xì)胞內(nèi)質(zhì)膜中逐步擴(kuò)散,導(dǎo)致在其比較好濃度條件下,將整個(gè)細(xì)胞染色。它們不同的熒光顏色:DiI(橙色熒光)、DiO(綠色熒光)、DiD(紅色熒光)、DiR(深紅色熒光),為活細(xì)胞多色彩熒光成像分析和流式細(xì)胞術(shù)提供了一種便捷的工具。DiO和DiI可以分別與標(biāo)準(zhǔn)的FITC和TRITC濾光器一同使用。其中,DiO可以被633 nm He-Ne激光激發(fā),并且具有比DiI更長的激發(fā)和發(fā)射光波長,為標(biāo)記細(xì)胞和組織的那些本身就具有本底熒光的染料提供了非常***的替代品。DiR在***成像或者示蹤中非常有用,因?yàn)樗鼈兯l(fā)射的紅外光可以高效地穿過細(xì)胞和組織,并且在紅外光范圍內(nèi),其本底熒光水平很低。納米熒光染料流式細(xì)胞南京星葉生物提供多種性價(jià)比高的各類活化熒光素,例如Cy系列、Super Fluor 系列(效果同Alexa Fluor系列)等。

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使用螢火蟲熒光素酶(Fluc)作為報(bào)告基因和 D-熒光素作為底物的生物發(fā)光成像(BLI)是目前應(yīng)用*****的技術(shù)。將總信號(hào)強(qiáng)度相對(duì)于 D-熒光素注射后的時(shí)間進(jìn)行繪制,以生成時(shí)間-強(qiáng)度曲線。除了峰值信號(hào)外,還確定注射 D-熒光素后固定時(shí)間點(diǎn)(5、10、15 和 20 分鐘)的信號(hào)作為峰值信號(hào)的替代。給定時(shí)間-強(qiáng)度曲線中的信號(hào)針對(duì)曲線中的峰值信號(hào)進(jìn)行歸一化,以表示 D-熒光素注射后時(shí)間變化的模式[3]。每克體重注射 10 μL D-熒光素(腹膜內(nèi)或靜脈注射)儲(chǔ)備液:對(duì)于 20 g 小鼠,標(biāo)準(zhǔn) 150 mg/kg 注射通常約為 200 μL。在室溫下解凍 D-熒光素(鉀鹽或鈉鹽)并溶解在 dPBS(不含鈣或鎂)中,**終濃度為 15 mg/mL。通過吸取 5-10 mL 無菌水來預(yù)濕 0.22 μm 過濾器。

常用抗體標(biāo)記熒光染料的特性及其應(yīng)用

1、FITC:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長525nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL1通道檢測(cè);3)可用于熒光顯微鏡技術(shù)4)熒光強(qiáng)度易受PH值影響,PH值降低時(shí)其熒光強(qiáng)度減弱。2、AlexaFluor488:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長519nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀:2)在流式細(xì)胞儀的FL1通道檢測(cè);3)具有超乎尋常的光穩(wěn)定性,非常適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)在較寬的PH值范圍內(nèi)保持穩(wěn)定(PH4~10)。5)南京星葉生物科技有限公司SuperFluor系列(效果同AlexaFluor系列)質(zhì)優(yōu)價(jià)廉,歡迎咨詢。3、Cy3:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長570nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL2通道檢測(cè):3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細(xì)胞術(shù),熒光強(qiáng)度低于PE。 小動(dòng)物成像熒光染料能夠選擇性地與目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合。

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熒光染料標(biāo)記蛋白或肽技術(shù)是一種常見的蛋白質(zhì)體外標(biāo)記技術(shù)。除了GFP等熒光蛋白的融合表達(dá)外,目標(biāo)蛋白還可以通過熒光染料標(biāo)記直接進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)操作,如***跟蹤、細(xì)胞分選等。

FITC熒光標(biāo)記的原理是什么?

熒光標(biāo)記所依賴的化合物稱為熒光材料。熒光材料是指具有共軛雙鍵系統(tǒng)化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物。當(dāng)受到紫外線或藍(lán)紫光的照射時(shí),它可以被刺激為刺激狀態(tài)。當(dāng)激發(fā)狀態(tài)恢復(fù)到基本狀態(tài)時(shí),它會(huì)發(fā)出熒光。蛋白質(zhì)熒光標(biāo)記技術(shù)利用熒光材料的共價(jià)結(jié)合在目標(biāo)分子的基團(tuán)上,利用其熒光特性提供研究對(duì)象的信息。 染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類親脂性熒光染料家族,用于標(biāo)記細(xì)胞膜和疏水性組織。外泌體熒光染料綠色

羰花青染料用作 Di 來標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。廣西鄭州熒光染料

除了以上應(yīng)用,吲哚菁綠還可以用于生物識(shí)別和藥物輸送。在生物識(shí)別中,吲哚菁綠可以與特定的生物分子結(jié)合,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)這些分子的檢測(cè)和定量分析。這項(xiàng)技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中有著廣泛的應(yīng)用前景。此外,吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的一部分,將藥物包裹在其分子結(jié)構(gòu)中,通過近紅外光***釋放藥物,實(shí)現(xiàn)靶向***。吲哚菁綠作為一種多功能的熒光染料,在醫(yī)學(xué)和生物領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。其綠色溶解度的優(yōu)良性能,使其能夠在水溶液中快速溶解,為其在醫(yī)學(xué)影像學(xué)、光熱***、生物識(shí)別和藥物輸送等方面的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步,相信吲哚菁綠在未來將發(fā)揮更大的潛力,為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。吲哚菁綠作為一種熒光染料,在醫(yī)學(xué)影像學(xué)中的應(yīng)用是**為突出的。它可以通過靜脈注射進(jìn)入人體血液循環(huán)系統(tǒng),并在近紅外激光的照射下發(fā)出熒光信號(hào)。這種熒光信號(hào)可以被**的顯像設(shè)備捕獲和記錄,從而形成高分辨率、高對(duì)比度的影像。這樣的影像可以幫助醫(yī)生觀察和分析血管、淋巴系統(tǒng)以及**等病變的情況,提供重要的診斷依據(jù)。廣西鄭州熒光染料