免疫熒光熒光染料DIO

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-08-25

SUPERGreenI(10,000×DMSO溶液,電泳級(jí))儲(chǔ)存條件及注意事項(xiàng)4℃避光可保存12個(gè)月。本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點(diǎn)是18.5℃,使用前請(qǐng)放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點(diǎn)●無毒性:屬花菁類染料,容易生物降解,無致*毒性。●靈敏度高:至少可檢出20pgDNA,高于EB染色法25~100倍?!裥旁氡雀撸簶悠窡晒庑盘?hào)強(qiáng),背景信號(hào)低。●操作簡(jiǎn)單:無須脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察?!襁m用范圍廣:可適用于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場(chǎng)凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等?!袷褂梅奖悖簩?duì)分子生物學(xué)中常用的酶(如:Taq酶、反轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒有抑制作用。●經(jīng)濟(jì):價(jià)格比銀染便宜。異硫氰酸熒光素含有一個(gè)異硫氰酸酯反應(yīng)基團(tuán)這有助于其對(duì)通常存在于生物分子中的動(dòng)漫和巰基基團(tuán)具有反應(yīng)性。免疫熒光熒光染料DIO

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本質(zhì)上,有機(jī)染料的特征在于源自在整個(gè)生色團(tuán)上離域的光學(xué)躍遷或源自分子間電荷轉(zhuǎn)移躍遷(從激發(fā)電子態(tài)的分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移)的發(fā)射。在這里,表現(xiàn)出源自在整個(gè)生色團(tuán)上離域的光學(xué)躍遷的發(fā)射的染料被稱為共振染料(介觀染料),而后者被稱為CT染料(電荷轉(zhuǎn)移染料)?;ㄇ唷⒘_丹明和熒光素是一些最常見的共振染料,其特點(diǎn)是窄的吸收和發(fā)射帶(略微結(jié)構(gòu)化),往往相互鏡像,以及小的、對(duì)溶劑極性不敏感的斯托克斯位移。另一方面,CT染料包括香豆素和丹磺酰熒光團(tuán)等染料,其特點(diǎn)是與共振染料相比,吸收和發(fā)射帶結(jié)構(gòu)無結(jié)構(gòu),分離良好,以及更大的斯托克斯位移。同樣,與共振染料相比,CT染料具有更小的摩爾吸收系數(shù)和熒光量子產(chǎn)率。對(duì)于共振和CT熒光染料,在結(jié)構(gòu)-性質(zhì)關(guān)系眾所周知的情況下,可以通過精心設(shè)計(jì)的策略來微調(diào)光譜性質(zhì)。西安熒光染料Fluor 680D-熒光素鉀鹽小動(dòng)物成像。

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光熱***是另一個(gè)吲哚菁綠的重要應(yīng)用領(lǐng)域。在光熱***中,吲哚菁綠可以被引入**組織,并在近紅外激光的照射下吸收光能轉(zhuǎn)化為熱能,從而使**組織受到熱損傷,達(dá)到***的效果。吲哚菁綠的熒光性質(zhì)使得其在光熱***中具有很高的選擇性,可以精確地破壞**組織而對(duì)正常組織幾乎沒有影響。這種精細(xì)的***方式有助于減少***的副作用,提高***效果。吲哚菁綠在生物識(shí)別和藥物輸送方面也有廣泛的應(yīng)用。在生物識(shí)別中,吲哚菁綠可以與特定的生物分子結(jié)合,通過檢測(cè)其熒光信號(hào)來實(shí)現(xiàn)對(duì)這些生物分子的定量分析。這種技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究、藥物篩選和疾病診斷中具有重要的意義。另外,吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的一部分,將藥物包裹在其分子結(jié)構(gòu)中,并通過光***釋放藥物,實(shí)現(xiàn)對(duì)疾病靶點(diǎn)的精確***。吲哚菁綠作為一種具有優(yōu)良綠色溶解度的熒光染料,在醫(yī)學(xué)和生物領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及醫(yī)學(xué)影像學(xué)、光熱***、生物識(shí)別和藥物輸送等方面,并且具有較高的選擇性和精細(xì)性。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步,相信吲哚菁綠將在未來更***地應(yīng)用于臨床實(shí)踐中,為人類的健康和醫(yī)學(xué)科研做出更大的貢獻(xiàn)。

在熒光顯微術(shù)中,不僅蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)感興趣,而且對(duì)核酸也感興趣。有時(shí)有必要通過檢測(cè)細(xì)胞核來確定細(xì)胞的確切位置或數(shù)量。最常見的DNA染色劑之一是DAPI(4',6-二氨基-2-苯基吲哚),主要與DNA雙螺旋富含A-T的區(qū)域結(jié)合。與未結(jié)合態(tài)相比,DAPI在DNA上的熒光強(qiáng)度增加。染料被UV(紫外線)光激發(fā),比較大激發(fā)波長(zhǎng)為358nm。發(fā)射光譜較寬,峰值在461nm。弱熒光也可以檢測(cè)到RNA結(jié)合。在這種情況下,發(fā)射轉(zhuǎn)移到500nm。有趣的是,DAPI能夠滲透完整的細(xì)胞膜。因此,該染料既可用于固定細(xì)胞也可用于活細(xì)胞。非磺化花青類染料- 該組中的一些染料包括 cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7 和 cy7.5。

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SuperFluor活化酯(與Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同)SuperFlour系列熒光探針,具有更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度,更廣的pH應(yīng)用范圍(pH4~10),更好的抗淬滅性。在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7等熒光染料。1.標(biāo)記效率低——計(jì)算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標(biāo)記的熒光團(tuán)少于4mol有以下原因:1)緩沖液中含有痕量伯銨成分,與染料反應(yīng)降低了標(biāo)記效率。如果蛋白已經(jīng)溶于含氨基的緩沖液(如Tris或氨基乙酸),標(biāo)記前用PBS透析。2)蛋白含量較低(≤1mg/mL)會(huì)影響標(biāo)記效率。3)標(biāo)記步驟中加入碳酸氫鈉的作用是將反應(yīng)混合物的pH升高至~8,因?yàn)樵谌鯄A性環(huán)境中標(biāo)記反應(yīng)的效率比較高。如果蛋白溶液的緩沖范圍在低pH,加入重碳酸鹽也無法將pH調(diào)節(jié)至**適水平。要么加大重碳酸鹽的量,要么將緩沖液換成PBS,或用0.1M碳酸氫鈉透析等。4)研究顯示pH升至9.0~9.4,標(biāo)記效率和標(biāo)記速度(只需10min)明顯改善。5)不同抗體與熒光團(tuán)的反應(yīng)速率不同,染料標(biāo)記后保留的生物活性程度也不同,因此標(biāo)準(zhǔn)步驟也不是總有比較好的標(biāo)記結(jié)果。為增加標(biāo)記率,可以對(duì)同一樣品進(jìn)行再標(biāo)記,或減少蛋白的量加大染料的量重新標(biāo)記。有研究者在室溫孵育1小時(shí)后再4℃孵育過夜,情況有所改善。小動(dòng)物成像熒光染料能夠選擇性地與目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合。免疫熒光熒光染料DIO

D-熒光素(D-Luciferin)是螢火熒光素酶底物,其量子效率為0.88,是Luminol的20倍。免疫熒光熒光染料DIO

二、***成像分析:D-熒光素,鉀鹽,D-PBS,不含鈣、鎂1、配制溶液使用無菌D-PBS(w/oCa2+;Mg2+)配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/ml),0.22μm濾膜過濾除菌(避光),分裝后于-20℃或-80℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。使用時(shí)4℃融化,實(shí)驗(yàn)前平衡至室溫(避光)2、注射量取決于注射方式,具體如下:注射方式劑量靜脈注射(25-27gauge針頭)按10μl/g體重濃度,加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液腹腔注射(25-27gauge針頭)按10μl/g體重濃度,加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液肌肉注射(27gauge針頭)50μl,濃度為1-2mg/ml熒光素工作液鼻內(nèi)注射(pipette)50μl,濃度為3mg/ml熒光素工作液3、注射入體內(nèi)10-20min(待光信號(hào)達(dá)到**強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期),再進(jìn)行成像分析免疫熒光熒光染料DIO