濟南熒光染料藍色

來源: 發(fā)布時間:2024-08-13

DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構。當與細胞膜結(jié)合后其熒光強度**增強,這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對細胞染色,這類染料在整個細胞膜上擴散,比較好濃度時可以使整個細胞膜染色。它們的熒光顏**分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標準的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā),有著比DiI更長的激發(fā)波長和發(fā)射波長,在細胞和組織染色中更有價值。 DiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織,在***成像中用來示蹤。小動物成像熒光染料是一種先進的技術可以在小動物體內(nèi)實時觀察和研究細胞、組織的功能和代謝過程。濟南熒光染料藍色

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如何選擇的染料?

考慮到熒光染料種類繁多,您如何為您的特定應用選擇使用哪種染料?以下是您需要考慮的一些因素?!c實驗設計的兼容性:雖然它們可能與其他熒光團共享一些光譜相似性,但每種染料都是***的,并且具有不同的功能、激發(fā)和發(fā)射波長、波段形狀和寬度以及光穩(wěn)定性。為確保成功,請選擇與您的實驗設計相輔相成的一種。與設備的兼容性:選擇與您正在使用的照明源相匹配的染料。在選擇合適的熒光儀器時,請考慮儀器的靈敏度、動態(tài)范圍、穩(wěn)定性和通量、信噪比和信空白比。為了獲得更好的結(jié)果,請確保染料的發(fā)射曲線與可用的檢測方法相匹配。與樣品中其他熒光材料的相容性:在雙重或三重標記實驗中,您選擇的染料的發(fā)射和激發(fā)曲線不應與其他熒光團重疊。由于許多天然存在的細胞成分會以與您選擇的染料或探針相同的波長發(fā)出熒光,因此您還需要確保可以從背景自發(fā)熒光中清楚地識別所選染料產(chǎn)生的信號。 河南熒光染料Fluor 488Super Flour 系列在生物熒光領域已逐漸替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等熒光染料。

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在熒光顯微術中,不僅蛋白質(zhì)結(jié)構感興趣,而且對核酸也感興趣。有時有必要通過檢測細胞核來確定細胞的確切位置或數(shù)量。最常見的DNA染色劑之一是DAPI(4',6-二氨基-2-苯基吲哚),主要與DNA雙螺旋富含A-T的區(qū)域結(jié)合。與未結(jié)合態(tài)相比,DAPI在DNA上的熒光強度增加。染料被UV(紫外線)光激發(fā),比較大激發(fā)波長為358nm。發(fā)射光譜較寬,峰值在461nm。弱熒光也可以檢測到RNA結(jié)合。在這種情況下,發(fā)射轉(zhuǎn)移到500nm。有趣的是,DAPI能夠滲透完整的細胞膜。因此,該染料既可用于固定細胞也可用于活細胞。

琥珀酰亞胺酯(Succinimidylesters)/NHS酯活性熒光染料用于標記抗體,蛋白質(zhì),肽,胺修飾的寡核苷酸和其他生物分子上的游離氨基(-NH2)2、馬來酰亞胺(Maleimides)活性熒光染料用于標記抗體,蛋白質(zhì)和肽上的巰基3、疊氮化物(Azides)活性熒光染料通過點擊化學法(Click)標記乙烯基4、炔烴(Alkynes)活性熒光染料通過點擊化學方法標記疊氮化物5、羧酸(Carboxylicacids)活性熒光染料經(jīng)碳二亞胺預活化后用于標記胺或用于醇的Steglich酯化6、氨基(Amines)活性熒光染料具有游離氨基的熒光染料,用于與各種親電子化合物(如活化的酯和環(huán)氧化物)偶聯(lián)。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。

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與花青和羅丹明染料一樣,熒光素也是一種有機染料。熒光素的比較大吸收波長為494nm,比較大發(fā)射波長為521nm(通常吸收藍色范圍內(nèi)的光并發(fā)射綠色范圍內(nèi)的光),熒光素是一種高熒光物質(zhì)。即使在非常少量的情況下也可以檢測到它,并且在與抗體結(jié)合時用于顯微鏡檢查。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。與許多其他熒光染料一樣,熒光素價格低廉且易于使用,使其成為生物學研究中很受歡迎的染料之一。與大多數(shù)其他染料不同,熒光素在水溶液中是無毒的。因此,它是極少數(shù)用作地下水示蹤劑的染料之一。非磺化花青類染料- 該組中的一些染料包括 cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7 和 cy7.5。濟南熒光染料藍色

D-熒光素鉀鹽熒光染料。濟南熒光染料藍色

在1990年代***使用的綠色熒光蛋白(從水母維多利亞水母克隆)及其衍生物(例如藻紅藍蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等)是當今生物學研究中**常用的一些生物熒光團。雖然熒光團可用于在細胞、細菌和各種***中表達質(zhì)粒,但它們的使用有一些缺點,即它可能很耗時,并且在融合時還能夠改變某些細胞蛋白的正常生物學功能。此外,與許多其他熒光團相比,生物熒光團的光穩(wěn)定性和靈敏度較低。綠色熒光蛋白(GFP)綠色熒光蛋白是當下流行的生物熒光團之一,由238個氨基酸組成,其中三個負責發(fā)出可見綠色熒光的結(jié)構。在水母本身中,熒光團與水母發(fā)光蛋白(一種蛋白質(zhì))相互作用,當添加鈣時會發(fā)出藍光。通過DNA重組,研究人員可以使用負責產(chǎn)生蛋白質(zhì)的基因來研究給定的基因和蛋白質(zhì)。在這里,在將復合物插入細胞之前,該基因與另一個基因(負責產(chǎn)生所需蛋白質(zhì)的第二個基因)結(jié)合。如果細胞產(chǎn)生綠色熒光,研究人員就可以明顯看出該細胞能夠表達目標基因。GFP由488nm激光線激發(fā),可在510nm處檢測。來自熒光團的微弱信號可以使用抗GFP抗體放大。作為生物標記物,綠色熒光蛋白用于以下功能:監(jiān)測各種生理過程*識別蛋白質(zhì)定位*檢測轉(zhuǎn)基因表達濟南熒光染料藍色