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來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-29

在1990年代***使用的綠色熒光蛋白(從水母維多利亞水母克隆)及其衍生物(例如藻紅藍(lán)蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等)是當(dāng)今生物學(xué)研究中**常用的一些生物熒光團(tuán)。雖然熒光團(tuán)可用于在細(xì)胞、細(xì)菌和各種***中表達(dá)質(zhì)粒,但它們的使用有一些缺點(diǎn),即它可能很耗時(shí),并且在融合時(shí)還能夠改變某些細(xì)胞蛋白的正常生物學(xué)功能。此外,與許多其他熒光團(tuán)相比,生物熒光團(tuán)的光穩(wěn)定性和靈敏度較低。綠色熒光蛋白(GFP)綠色熒光蛋白是當(dāng)下流行的生物熒光團(tuán)之一,由238個氨基酸組成,其中三個負(fù)責(zé)發(fā)出可見綠色熒光的結(jié)構(gòu)。在水母本身中,熒光團(tuán)與水母發(fā)光蛋白(一種蛋白質(zhì))相互作用,當(dāng)添加鈣時(shí)會發(fā)出藍(lán)光。通過DNA重組,研究人員可以使用負(fù)責(zé)產(chǎn)生蛋白質(zhì)的基因來研究給定的基因和蛋白質(zhì)。在這里,在將復(fù)合物插入細(xì)胞之前,該基因與另一個基因(負(fù)責(zé)產(chǎn)生所需蛋白質(zhì)的第二個基因)結(jié)合。如果細(xì)胞產(chǎn)生綠色熒光,研究人員就可以明顯看出該細(xì)胞能夠表達(dá)目標(biāo)基因。GFP由488nm激光線激發(fā),可在510nm處檢測。來自熒光團(tuán)的微弱信號可以使用抗GFP抗體放大。作為生物標(biāo)記物,綠色熒光蛋白用于以下功能:監(jiān)測各種生理過程*識別蛋白質(zhì)定位*檢測轉(zhuǎn)基因表達(dá)小動物成像熒光染料能夠選擇性地與目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合。ivis熒光染料APC

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光熱***是另一個吲哚菁綠的重要應(yīng)用領(lǐng)域。在光熱***中,吲哚菁綠可以被引入**組織,并在近紅外激光的照射下吸收光能轉(zhuǎn)化為熱能,從而使**組織受到熱損傷,達(dá)到***的效果。吲哚菁綠的熒光性質(zhì)使得其在光熱***中具有很高的選擇性,可以精確地破壞**組織而對正常組織幾乎沒有影響。這種精細(xì)的***方式有助于減少***的副作用,提高***效果。吲哚菁綠在生物識別和藥物輸送方面也有廣泛的應(yīng)用。在生物識別中,吲哚菁綠可以與特定的生物分子結(jié)合,通過檢測其熒光信號來實(shí)現(xiàn)對這些生物分子的定量分析。這種技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究、藥物篩選和疾病診斷中具有重要的意義。另外,吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的一部分,將藥物包裹在其分子結(jié)構(gòu)中,并通過光***釋放藥物,實(shí)現(xiàn)對疾病靶點(diǎn)的精確***。吲哚菁綠作為一種具有優(yōu)良綠色溶解度的熒光染料,在醫(yī)學(xué)和生物領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及醫(yī)學(xué)影像學(xué)、光熱***、生物識別和藥物輸送等方面,并且具有較高的選擇性和精細(xì)性。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步,相信吲哚菁綠將在未來更***地應(yīng)用于臨床實(shí)踐中,為人類的健康和醫(yī)學(xué)科研做出更大的貢獻(xiàn)。外泌體熒光染料高分子異硫氰酸熒光素(FITC) 是一種有機(jī)熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)中。

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其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)常用染料生物染料在細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組分鑒定中有著廣泛的應(yīng)用,除細(xì)胞膜研究外,我們經(jīng)常也會對一些其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)及成分進(jìn)行探索,例如線粒體、溶酶體、蛋白質(zhì)、細(xì)胞核等,而對于不同的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有不同的染料進(jìn)行染色細(xì)胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液(DAPIStainingSolution)常用于細(xì)胞核染色,可將細(xì)胞核染成藍(lán)色。鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)是細(xì)胞骨架的染色神器,羅丹明標(biāo)記的Phalloidin(TRITC-Phalloidin)可將細(xì)胞染成橙紅色,DAPI與Phalloidin染色液是研究細(xì)胞形態(tài)變化時(shí)經(jīng)常用到的兩種共染的試劑,染色效果可見A1-E1用TRITC-鬼筆環(huán)肽(橙紅)染色的細(xì)胞骨架免疫熒光圖;A2-E2用DAPI(藍(lán)色)染色的細(xì)胞核免疫熒光圖;A3-E3合并的L929細(xì)胞免疫熒光染色圖。是S100A16過表達(dá)或下調(diào)前后PDAC細(xì)胞形態(tài)的變化。

如何選擇的染料?

考慮到熒光染料種類繁多,您如何為您的特定應(yīng)用選擇使用哪種染料?以下是您需要考慮的一些因素?!c實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的兼容性:雖然它們可能與其他熒光團(tuán)共享一些光譜相似性,但每種染料都是***的,并且具有不同的功能、激發(fā)和發(fā)射波長、波段形狀和寬度以及光穩(wěn)定性。為確保成功,請選擇與您的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)相輔相成的一種。與設(shè)備的兼容性:選擇與您正在使用的照明源相匹配的染料。在選擇合適的熒光儀器時(shí),請考慮儀器的靈敏度、動態(tài)范圍、穩(wěn)定性和通量、信噪比和信空白比。為了獲得更好的結(jié)果,請確保染料的發(fā)射曲線與可用的檢測方法相匹配。與樣品中其他熒光材料的相容性:在雙重或三重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,您選擇的染料的發(fā)射和激發(fā)曲線不應(yīng)與其他熒光團(tuán)重疊。由于許多天然存在的細(xì)胞成分會以與您選擇的染料或探針相同的波長發(fā)出熒光,因此您還需要確??梢詮谋尘白园l(fā)熒光中清楚地識別所選染料產(chǎn)生的信號。 Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖稀?/p>

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綠色熒光染料ICG的主要作用吲哚菁綠(IndocyanineGreen,簡稱ICG)是一種廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)和生物領(lǐng)域的熒光染料。它具有獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì),因此被***用于熒光顯像、光熱***、生物識別和藥物輸送等領(lǐng)域。吲哚菁綠的綠色溶解度是其在水中的溶解度,它是衡量該染料在溶液中的溶解能力的重要指標(biāo)。吲哚菁綠具有較好的水溶性,可以在水中迅速溶解,形成穩(wěn)定的溶液。這一特性使得吲哚菁綠在醫(yī)學(xué)診斷和***中得到廣泛應(yīng)用。吲哚菁綠的主要作用之一是在醫(yī)學(xué)影像學(xué)中作為造影劑。由于其具有強(qiáng)烈的熒光特性,能夠在近紅外光譜范圍內(nèi)吸收和發(fā)射光線,因此被***用于近紅外熒光顯像技術(shù)中。在臨床中,醫(yī)生可以通過注射吲哚菁綠溶液,利用近紅外光源對患者進(jìn)行顯像,以觀察和評估病變部位的血液灌注情況、淋巴引流途徑等。這為醫(yī)生提供了非侵入性、實(shí)時(shí)性的影像信息,有助于準(zhǔn)確診斷和指導(dǎo)***。此外,吲哚菁綠還在光熱***中發(fā)揮著重要作用。光熱***是一種利用光熱效應(yīng)殺滅腫瘤細(xì)胞的方法。吲哚菁綠可以吸收近紅外光并將其轉(zhuǎn)化為熱能,從而使附近的腫瘤細(xì)胞受熱破壞。這項(xiàng)技術(shù)在*****中具有巨大潛力,因?yàn)樗梢詫?shí)現(xiàn)高度精細(xì)的***,同時(shí)比較大限度地減少對周圍正常組織的損傷。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右。云南高分子熒光染料

DiR的紅外熒光可以穿透細(xì)胞和組織,在小動物成像中用來示蹤。ivis熒光染料APC

羅丹明屬于呫噸族。與市場上的許多其他染料相比,羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們在聚合物納米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測、活細(xì)胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染料的衍生物也用作:分子開關(guān),病毒表面修飾,化學(xué)傳感器,硫醇。不同類型的染料通過它們各自的取代基(R1、R2、R3、R4和G)來區(qū)分。由于它們的差異,這些熒光染料在溶液中也表現(xiàn)出不同的光物理特性(例如不同的熒光壽命和發(fā)射比較大值)。氨基被剛性化的羅丹明染料無論溫度范圍如何都表現(xiàn)出高量子產(chǎn)率,而在每個氮處具有兩個烷基取代基的那些表現(xiàn)出活化的內(nèi)部轉(zhuǎn)化,量子產(chǎn)率和熒光壽命隨溫度的變化而變化。羅丹明101和羅丹明B是一些**常用的羅丹明染料具有以下特點(diǎn):--羧基傾向于在酸性溶液中質(zhì)子化--染料轉(zhuǎn)化為兩性離子堿性溶液--兩性離子染料在極性較小的有機(jī)溶劑中變?yōu)闊o色內(nèi)酯要將羅丹明用作熒光探針,必須對其進(jìn)行修改。這可以通過(thexanthenemoiety)氨基、羧基苯基環(huán)或羧酸基團(tuán)的修飾來實(shí)現(xiàn)。與TRITC一樣,羅丹明(NHS-rhodamine)的熒光特性為544nm(比較大吸收波長)和576nm(比較大發(fā)射)。ivis熒光染料APC