濟南熒光染料脂溶

來源: 發(fā)布時間:2024-05-24

所需的CY3-NHS酯的量取決于待標(biāo)記蛋白的量,以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例:假設(shè)所需的標(biāo)記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000),用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯,得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL,詳細(xì)計算過程如下:1)mmol(IgG)=mg/mL(IgG)×mL(IgG)/MW(IgG)=2mg/mL×0.5mL/150,000mg/mmol=6.7×10-6mmol2)mmol(CY3-NHS酯)=mmol(IgG)×10=6.7×10-6mmol×10=6.7×10-5mmol3)uL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3-NHS酯)×MW(CY3-NHS酯)/mg/μL(CY3-NHS酯)=6.7×10-5mmol×753.88mg/mmol/0.01mg/μL=5.05μL(CY3-NHS酯)4.運行偶聯(lián)反應(yīng)1)將室溫新鮮制備的10mg/mLCY3-NHS酯緩慢加入到0.5mL蛋白質(zhì)樣品中于溶液中,輕輕搖動混勻,然后短暫離心,將樣品收集于反應(yīng)管底部。請勿混勻,否則2)將反應(yīng)管安置避光處,在接下來的間隔輕輕蛋白水解60分鐘。10-15分鐘,輕輕翻轉(zhuǎn)幾次以充分混合5.偶聯(lián)偶聯(lián)物以下方案是使用SepHadexG-25柱封閉染料-偶聯(lián)偶聯(lián)物的范例。1)根據(jù)制造說明準(zhǔn)備SepHadexG-25柱。2)將反應(yīng)混合物(來自“Runconjugationreaction”)加載到SepHadexG-25柱的頂部。3)一旦樣品在頂部樹脂表面下方運行,立即添加PBS(pH7.2-7.4)。4)向所需樣品添加更多PBS(pH7.2-7.4)即可完成柱密封。DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)對活細(xì)胞進行多色成像和流式分析。濟南熒光染料脂溶

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1.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS細(xì)胞膜染色液制備(1)配置DMSO或EtOH儲存液:儲存液用DMSO或EtOH配置濃度1~5mM。注意:未使用的儲存液保存在-20°C,避免反復(fù)凍融。(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲存液,配制濃度為1~5μM的工作液。注意:工作液的**終濃度是根據(jù)不同細(xì)胞和實驗的經(jīng)驗來配制。可以從推薦濃度的十倍以上尋找比較好條件。

2.懸浮細(xì)胞染色(1)懸浮細(xì)胞密度為1×106/mL加入到工作液中。(2)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞2~20分鐘,不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時間不同。(3)染色細(xì)胞試管在1000~1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。(4)傾倒上清液,再次緩慢加入預(yù)溫37℃的培養(yǎng)液。(5)重復(fù)(3),(4)步驟兩次以上。 安徽熒光染料DIR5(6)-FITC (Fluorescein 5(6)-isothiocyanate) 是一種胺活性衍生物的熒光染料.

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熒光標(biāo)記技術(shù)是指運用熒光染料與待研究對象結(jié)合,利用它的熒光特性,提供待研究對象相關(guān)信息。熒光標(biāo)記具有操作簡便、高穩(wěn)定性、高靈敏度等優(yōu)勢,使熒光染料在生命科學(xué)研究中應(yīng)用,包括:標(biāo)記活細(xì)胞或固定細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、多肽;作為功能性指示劑表征細(xì)胞健康狀況;設(shè)計各種熒光探針,尋找特定蛋白或藥物靶點。應(yīng)用分類:多肽、蛋白、抗體標(biāo)記:氨基標(biāo)記、巰基標(biāo)記、羧基標(biāo)記;***成像:水溶性/脂溶性熒光染料、近紅外I區(qū)/II區(qū)熒光染料南京星葉生物科技有限公司提供不同用途的熒光染料,了解更多(包括但不限于)


蛋白熒光標(biāo)記技術(shù)是目前**為常見的蛋白體外標(biāo)記技術(shù),利用級聯(lián)放大反應(yīng)原理,將極度敏感性且易于檢測的熒光素通過某個基團吸附或共價結(jié)合后,標(biāo)記到特異性抗原或抗體分子上,應(yīng)用熒光顯微鏡觀察熒光標(biāo)記物因增強放大效應(yīng)而產(chǎn)生顏色、光譜等變化,以分析示蹤相應(yīng)抗體或抗原性質(zhì)與含量的方法。該技術(shù)在具有高度精確性的熒光顯微鏡下,借助高度靈敏性的熒光檢測,在各種生物過程中對目的蛋白進行可視化,從而通過抗原抗體高度特異性免疫定量表達(dá)或在細(xì)胞研究中定位。蛋白熒光標(biāo)記已成為研究蛋白質(zhì)互作、酶活性、***示蹤以及細(xì)胞分選重要工具。蛋白標(biāo)記常用熒光染料隨著蛋白熒光標(biāo)記技術(shù)不斷發(fā)展,各類熒光素廣泛應(yīng)用于生物實驗中,目前常用標(biāo)記蛋白/抗體的熒光素主要有BODIPY類、香豆素類、羅丹明類、近紅外類、NBD胺類以及菁染料等。南京星葉生物科技有限公司提供多種性價比高的各類活化熒光素,其熒光染料覆蓋波長范圍從350nm到790nm,例如Cy系列、SuperFluor系列(效果同AlexaFluor系列)等,用于標(biāo)記抗體、多肽以及蛋白功能基團,繼而生成分子探針,通過熒光成像進行相應(yīng)檢測?;ㄇ囝悷晒馊玖蠈儆诠舱袢玖?,其特征在于具有離域電荷的氮原子(兩個氮原子)之間的聚甲炔染料。

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CY5熒光染料是一種被廣泛應(yīng)用于生物分子檢測和熒光成像等領(lǐng)域的高效、穩(wěn)定的熒光標(biāo)記試劑。它具有出色的熒光性能和良好的生物相容性。Cy5屬于小分子染料,其*大發(fā)射波長為670nm,其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀,檢測通道一般是FL4通道。除流式細(xì)胞術(shù)外,Cy5同樣適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù)。需注意的是,Cy5與單核細(xì)胞和粒細(xì)胞的非特異性結(jié)合多,實驗結(jié)果容易出現(xiàn)假陽性。Cy5.5含有一個游離胺基,可與多種官能團共軛,包括NHS酯和環(huán)氧化合物。激發(fā)和發(fā)射的最大值分別為678nm和694nm。Cy5.5已應(yīng)用于各種基于熒光的實驗中。Cy5.5是一種遠(yuǎn)紅色(和近紅外)發(fā)射染料,是熒光測量的理想選擇。Cy5.5具有成本效益,且其標(biāo)記化學(xué)操作簡單,適合于潛在的***藥物開發(fā)Cy5.5標(biāo)記因子VIIa是用來想象**的。用這些靶向蛋白標(biāo)記的Cy5.5在**異種移植物上特異定位至少14天,但未結(jié)合的Cy5.5不能定位于任何異種移植或***。這種**血管內(nèi)皮細(xì)胞中抗組織因子的成像方法可用于檢測原發(fā)性**和轉(zhuǎn)移以及監(jiān)測體內(nèi)***反應(yīng)[1]。pH/溫度敏感磁性納米凝膠結(jié)合Cy5.5標(biāo)記乳鐵蛋白(Cy5.5-Lf-MPNA納米凝膠)是一種有前途的膠質(zhì)瘤術(shù)前MRI和術(shù)中熒光成像的對比劑[2]FITC熒光染料標(biāo)記方法。浙江微泡熒光染料

南京星葉生物科技有限公司Super Fluor系列(效果同Alexa Fluor 系列)。濟南熒光染料脂溶

南京星葉生物科技有限公司各類熒光染料

多肽、蛋白、抗體標(biāo)記:5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAMRA,SE6-TAMRA,SE5-ROX6-ROX5-ROX,SE6-ROX,SE***成像:脂溶性熒光染料CY3NHSesterCY3amineCY3maleimideCY3azideCY3COOHCY3alkyneCY3hydrazideCY3ThiolCY5amineCY5NHSesterCY5maleimideCY5azideCY5COOHCY5alkyneCY5hydrazideCY5ThiolCY7amineCY7maleimideCY7azideCY7COOHCY7alkyneCY7hydrazideCY7Thiol水溶性熒光染料Sulfo-Cyanine3NHSesterSulfo-Cyanine3amineSulfo-CY3azideSulfo-CY3carboxylicacidSulfo-CY3alkyneSulfo-CY3hydrazideSulfo-CY3ThiolSulfo-Cyanine5NHSesterSulfo-Cyanine5amineSulfo-CY5azideSulfo-CY5carboxylicacidSulfo-CY5alkyneSulfo-CY5hydrazideSulfo-CY5ThiolCY7NHSesterSulfo-Cyanine7NHSesterSulfo-Cyanine7amineSulfo-CY7azideSulfo-CY7carboxylicacidSulfo-CY7alkyneSulfo-CY7hydrazideSulfo-CY7Thiol近紅外I區(qū)/II區(qū)熒光染料ICG-NHSesterICG-amineICG-maleimideICG-azideICG-COOHICG-alkyneICG-hydrazideICG-ThiolICG-TzICG-DBCO 濟南熒光染料脂溶

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