CCK8檢測原理圖2操作步驟1、在96孔板中接種細胞懸液（100μL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預培養(yǎng)（37℃,5%CO2）。2、細胞處理（不同實驗處理方式不同）。3、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數）。4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內孵育1-4小時。5、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。6、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時內測定，吸光度不會發(fā)生變化。若細胞培養(yǎng)時間較長，培養(yǎng)基顏色或 pH 發(fā)生變化，建議更換培養(yǎng)基后再加 CCK-8.江蘇cck8細胞增殖數據分析
CCK-8沒有具體規(guī)定反應時間的長短，以具體反映比較好顯色的時間為主。因為不同的細胞反應時間、顯色標準都不一樣，所以一定要設置預實驗。預實驗中，可以先做幾個孔摸索一下接種數量和培養(yǎng)時間。3、懸浮細胞比貼壁細胞難顯色。在加入CCK-8培養(yǎng)后，可每隔一小時觀測一下顏色的變化情況，或者之間用酶標儀檢測更為準確。4、CCK8作用時間越長，OD值就越大，所以對于作用時間也不是越長久越好，要把OD值控制在1左右。5、CCK8要求檢測孔內不能有氣泡。上海cck8檢測ogd后細胞活性CCK8細胞增值檢測實驗簡介.
在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗時，還應考慮***的吸收，可在加入***的培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450nm的吸光度作為空白對照。·金屬對CCK-8顯色有影響：當終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會***5%、15%、90%的顯色反應，使靈敏度降級。如果終濃度是10mM的話，將會*****。·懸浮細胞由于染色比較困難，一般需要增加細胞數量和延長培養(yǎng)時間。·加入CCK-8時，如果細胞培養(yǎng)時間較長，培養(yǎng)基顏色或pH值已變化，建議換用新鮮的培養(yǎng)基。·用酶標儀檢測前需確保每個孔內沒有氣泡，否則會干擾測定，且要擦拭干凈樣品板了。
沒有做過MTT實驗，但其實原理及目的都是一樣的（反應機理不一樣）。都說CCK8簡單點而且數據更穩(wěn)定，所以就用了這個試劑盒。CCK8的說明書大家一定要認真閱讀，里面很多細節(jié)的問題都有提到。而且說明書里提供的一些關于各種細胞的種板數都很有參考價值，因為那是反復驗證過的比較好數值。但無論如何，做這個試驗一定要摸條件。你就算再懶，這個懶不得，否則你都只是在做無用功。以下言論全部以細胞毒性試驗為前提，如果你做的是促進細胞生長的***的藥效實驗那就另當別論了。CCK8試驗的總體實驗心得.
cck8試劑加入后孵育時間，隨著時間的增加，OD值就會增大?？傊瓌t就是把OD值控制在1.0左右。這里我考察了0.5h、1.0h、2.0h。
再說一下關于種板設置問題。眾所周知周圍一圈孔因為邊緣效應都是不用來做實驗的。一般每組樣品我會設置6個復孔，得到的OD值去掉**大值與**小值，其余取平均值。我用的是排***，會省很多力氣，但是也會增大組內誤差。這個只有通過校正移液***和選用**適***頭了。
能力有限，表達不清的大家湊合著看看吧。有疑問的歡迎大家留言討論，我們的目標是共同進步，哈哈。 生成的甲臜物的數量與活細胞的數量成正比.江蘇cck8細胞增殖數據分析
細胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細胞活性和增殖的影響，比如低氧或者什么化學物品對細胞的影響上。江蘇cck8細胞增殖數據分析
實驗材料及試劑
96 孔板、CO2培養(yǎng)箱、酒精燈、移液***、酶標儀等；細胞、CCK8等。
實驗內容取生長狀態(tài)良好的對數生長期細胞，每孔按 4×103個接種至 96 孔板中，每組設置8個復孔，置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待細胞貼壁后轉染相應質粒后。繼續(xù)培養(yǎng) 48h 后，棄含藥培養(yǎng)基，每孔加入新鮮配制的含 10ｕL的毒性檢測液CCK8，置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng) 4h 后，用酶標儀測波長為450 nm的OD值。實驗重復 3 次， 取實驗結果的平均值作為**終實驗結果。按公式計算生長***率＝[(對照組 OD－實驗組 OD)/對照組 OD] ×**，以分組為橫坐標，生長***率為縱坐標，繪制細胞生長***率柱狀圖。 江蘇cck8細胞增殖數據分析