摸條件包括1、種板數；2、種板后細胞的貼壁生長時間；3、加藥后的孵育時間；4、cck8試劑加入量；5、cck8試劑加入后細胞孵育時間?？雌饋砗芏啵鋵嵾@就是一個實驗。而且都是種的空白板，也就是不加藥物，只加細胞和CCK8。我沒有做過MTT實驗，但其實原理及目的都是一樣的（反應機理不一樣）。都說CCK8簡單點而且數據更穩(wěn)定，所以就用了這個試劑盒。
當然仁者見仁智者見智，我寫的只是個人實驗心得，但供參考。歡迎大家拍磚共同進步。實驗是簡單的，道路是曲折的，時間就是用來浪費的，科研就是自娛自樂使勁折騰。
接種時注意細胞懸液一定要混勻，以避免細胞沉淀下來，導致每孔中的細胞數量不一致。湖北cck8避光
CCK-8盒子的選購還記得***次做CCK-8的實驗時研究生二年級的時候，當時用的***個盒子是Sigma的，當時的Sigma-Aldrich就是Sigma-Aldrich，還不是現在的Millipore-Sigma。那個盒子給了我莫大的鼓勵，因為在那之前做分子克隆一直都不是很順利。這個盒子是我的碩士老板從美國帶回來的，品質有保證，***的結果也是很好的。后面在做CCK-8的實驗時，我們在有選擇的情況下都會買sigma，下圖2是sigma官網的截圖。其實也不貴，只是到貨時間太慢。江蘇cck8怎么用微生物對細胞的毒性或增殖的實驗。
制作標準曲線1.先用細胞計數板計數所制備的細胞懸液中的細胞數量，然后接種細胞。2.按比例(例如：1/2比例)依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度，一般要做3-5個細胞濃度梯度，每組3-6個復孔。3.接種后培養(yǎng)2-4小時使細胞貼壁，然后加CCK-8試劑培養(yǎng)一定時間后測定O.D值，制作出一條以細胞數量為橫坐標(X軸)，O.D值為縱坐標(Y軸)的標準曲線。根據此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數量(使用此標準曲線的前提條件是實驗的條件要一致，便于確定細胞的接種數量以及加入CCK-8后的培養(yǎng)時間)。
酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾；◆細胞毒性非常低，因此加入WST-8顯色后，可以在不同時間反復用酶標儀讀數從而找到比較好測定時間。實驗二：細胞增殖-毒性檢測1、在96孔板中配置100μL的細胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預培養(yǎng)24小時（37℃，5%CO2）。2、向培養(yǎng)板加入10μL不同濃度的待測物質。3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當的時間（例如：6、12、24或48小時）。4、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要再孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數）。5、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內孵育1-4小時。6、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。用酶標儀測定在450nm處的吸光度。
CCK法的操作步驟（更多內容請見說明書）：實驗一：細胞活性檢測1、在96孔板中接種細胞懸液（100μL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預培養(yǎng)（37℃,5%CO2）。2、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數）。3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內孵育1-4小時。4、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。5、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時內測定，吸光度不會發(fā)生變化。CCK8系列簡稱終于來了.浙江cck8增殖數據結果
化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基).湖北cck8避光
細胞增殖實驗就是對細胞生長的測定，常用的方法有MTT、CCK8以及流式檢測。閱讀大量文獻發(fā)現，如果想證明一個***或者說是一個作用條件對細胞生長的影響，基本上大家都采用MTT或CCK8結合流式的雙標準來證明作用效果。所以，***先給大家介紹一下MTT和CCK8比色法的實驗操作和注意事項。MTT實驗操作1、在96孔板中培養(yǎng)細胞，設置對照組（細胞+無血清培養(yǎng)基）、實驗組和空白組（無血清培養(yǎng)基），可以采用如下圖的排版方式：2、在對照組和實驗組中，湖北cck8避光
上海儒安生物科技有限公司一直專注于從事生物技術、物聯網技術、網絡技術領域內的技術開發(fā)、技術咨詢、技術轉讓、技術服務，軟件開發(fā)，電子商務(不得從事增值電信、金融業(yè)務)，化工產品及原料(除危險化學品、監(jiān)控化學品、民用物品、易制毒化學品)、實驗窒設備的銷售。，是一家醫(yī)藥健康的企業(yè)，擁有自己**的技術體系。一批專業(yè)的技術團隊，是實現企業(yè)戰(zhàn)略目標的基礎，是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動力。上海儒安生物科技有限公司主營業(yè)務涵蓋細胞轉染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細胞增殖，內參抗體，堅持“質量保證、良好服務、顧客滿意”的質量方針，贏得廣大客戶的支持和信賴。一直以來公司堅持以客戶為中心、細胞轉染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細胞增殖，內參抗體市場為導向，重信譽，保質量，想客戶之所想，急用戶之所急，全力以赴滿足客戶的一切需要。