用LipoD293?體外DNA轉(zhuǎn)染試劑(Ver.II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后,細(xì)胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè))。對(duì)懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較30毫升的293F細(xì)胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin、Xfect和Fugene6等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá),用量為L(zhǎng)ipoD293?試劑,20微克,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA。轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少:轉(zhuǎn)染試劑選擇工具.DNA轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格
基于脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽(yáng)離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中,而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,形成DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合物,從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面,經(jīng)過(guò)內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞。此方法操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率,但具有一定的細(xì)胞毒性,可能會(huì)干擾細(xì)胞的代謝。且活性受血清影響,需要去除血清。DNA轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格該試劑可將RNA導(dǎo)入多種細(xì)胞系,包括原代細(xì)胞和懸浮細(xì)胞.
圖7.對(duì)注射了Invivofectamine3.0試劑的小鼠樣品進(jìn)行血液化學(xué)分析。將Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的復(fù)合物分別以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未處理[U]的劑量注射入小鼠體內(nèi)。在注射后2、24及48小時(shí)收集血液樣品,并通過(guò)臨床化學(xué)檢測(cè)方法對(duì)數(shù)個(gè)生物標(biāo)志物(Antech)進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果表明在使用Invivofectamine3.0試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染的每個(gè)個(gè)體間所檢測(cè)的生物標(biāo)志物的水平與未注射該試劑的個(gè)體相比并沒有***差異。除了以上兩種于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑,還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?2000,Lipofectamine?3000和Neon?轉(zhuǎn)染系統(tǒng)也可以用于siRNA轉(zhuǎn)染
LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn)、高效的siRNA輸送解決方案。目前尚無(wú)其他siRNA轉(zhuǎn)染試劑能夠在***的細(xì)胞系中(包括常見細(xì)胞類型、干細(xì)胞、原代細(xì)胞以及歷來(lái)難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型)提供如此簡(jiǎn)便、高效的siRNA輸送效果。高效可在低siRNA濃度下獲得優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效果相對(duì)于其他的siRNA轉(zhuǎn)染試劑,LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑可以獲得更佳的基因***效果。同在10nM和1nMp53siRNA下,LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率,超過(guò)其他RNAi試劑。轉(zhuǎn)染后6h觀察細(xì)胞狀態(tài),并更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細(xì)胞,用PBS洗滌3次以上,以備RNA抽提。
在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的NickolaiDulin博士友情提供制備大鼠的動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用LipoD293?試劑(左圖)和Lipofecatmine2000(L2K,右圖)分別將GFP的cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測(cè)GFP熒光,以此來(lái)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞LNCap細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較圖片由羅斯威爾公園**研究所(RoswellCancerInstitute)MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.上海原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑推薦
將EntransterTM-R4000稀釋液和agomir稀釋液充分混合.DNA轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格
胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要!!當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好,沒有細(xì)微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦!載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時(shí)導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個(gè)部件缺失,或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時(shí)做陰性對(duì)照的習(xí)慣:建議目的基因載體和陰性對(duì)照GFP載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,質(zhì)粒間比例得當(dāng),并且對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證.DNA轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格
上海儒安生物科技有限公司發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大,現(xiàn)有一支專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì),各種專業(yè)設(shè)備齊全。專業(yè)的團(tuán)隊(duì)大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗(yàn),熟悉行業(yè)專業(yè)知識(shí)技能,致力于發(fā)展上海儒安生物的品牌。公司以用心服務(wù)為重點(diǎn)價(jià)值,希望通過(guò)我們的專業(yè)水平和不懈努力,將從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),軟件開發(fā),電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),化工產(chǎn)品及原料(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、民用物品、易制毒化學(xué)品)、實(shí)驗(yàn)窒設(shè)備的銷售。等業(yè)務(wù)進(jìn)行到底。誠(chéng)實(shí)、守信是對(duì)企業(yè)的經(jīng)營(yíng)要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造***的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體。