siRNA，加入HiperFect轉(zhuǎn)染試劑混勻并溫育5-10min，將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻，培養(yǎng)細胞直到適當?shù)臅r候檢測基因沉默效果。這個快速操作流程簡便到還可以用于“反向轉(zhuǎn)染”，方便至極。當然，習慣用傳統(tǒng)方法也是可以的，只要培養(yǎng)到細胞匯合度50%—80%進行轉(zhuǎn)染就可以了。沒有禁用血清、***的困擾，HiperFect真的是將實驗簡化到了***。適合多種細胞類型：HiPerfect可高效轉(zhuǎn)染多種細胞類型，包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對于原代細胞，產(chǎn)品手冊中列出了轉(zhuǎn)染原代HUVEC、成纖維細胞、角質(zhì)細胞、上皮細胞和平滑肌細胞的操作步驟，貼心臨床級******毒載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑..上海polviet轉(zhuǎn)染試劑分裝
細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢：1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高，生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間，只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化上海polviet轉(zhuǎn)染試劑分裝細胞培養(yǎng)系列 | 專為 293T 優(yōu)化的轉(zhuǎn)染試劑 Nano293T.
.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。2.高靈活應用，同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。3.細胞毒性低，結(jié)果相關性好，確保所觀察到的細胞效應是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導。4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標準實驗方法，將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞。通過LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。
確定希望輸送的運載物（如DNA、RNA或蛋白質(zhì)）根據(jù)不同實驗類型，我們可能需要將不同的運載物輸送到細胞內(nèi)部，包括**常見的DNA，用于基因編輯的siRNA，能夠更快表達蛋白的mRNA，CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。2希望轉(zhuǎn)染的細胞類型轉(zhuǎn)染的細胞類型可簡單分為兩大類，連續(xù)細胞系和原代細胞。連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能，通常要比原代或有限細胞更易處理。但由于此類細胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力，它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。
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用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine3.0試劑及RNAi復合物非常容易獲得：只需簡單地混合，并進行孵育（30min）、稀釋、及注射即可。靶向敲低在實驗靶標中可觀察到高達85%的敲低效果使用Invivofectamine3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine3.0試劑與靶向FactorVII(FVII)或PPIBmRNA的siRNA組成的復合物，以每千克小鼠體重1mg(mg/kg)的注射量進行注射，**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達85%的敲低（使用TaqMan分析對敲低進行評估）。上海polviet轉(zhuǎn)染試劑分裝
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