細(xì)胞冷存液***頭輕柔吹打混勻,Z成細(xì)胞懸液。4.將離心管中的細(xì)胞懸液分裝與細(xì)胞凍存管中,每管1mL或1.5mL。5.將分裝好的細(xì)胞直接凍存于-80℃冰箱中,可穩(wěn)定凍存數(shù)年。6.如若長(zhǎng)期保存,可在次日轉(zhuǎn)移至液氮中。操作步驟:細(xì)胞復(fù)蘇:1.從-80℃冰箱或液氮中取出凍存細(xì)胞,立即放入37℃水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細(xì)胞懸液完全融化后,立即1000rmp離心5分鐘,完全除去上清。3.加入1mL細(xì)胞培養(yǎng)基于凍存管中,***頭輕柔吹打懸浮細(xì)胞,并轉(zhuǎn)移細(xì)胞于細(xì)胞培養(yǎng)皿或者培養(yǎng)瓶中。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化.細(xì)胞凍存液銷售
胞培養(yǎng)凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的低溫保存完全培養(yǎng)基。保護(hù)您的細(xì)胞及研究結(jié)果:從低溫保存復(fù)融細(xì)胞后,細(xì)胞復(fù)蘇率和活力增加即用型凍存混合物——不需逐次用多種試劑自行配制凍存液OrderingInformation貨號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格單價(jià)(CNY)數(shù)量12648010Recovery?CellCultureFreezingMedium50mL2,436.00為什么選擇Recovery?細(xì)胞培養(yǎng)凍存培養(yǎng)基?為確保細(xì)胞培養(yǎng)能快速獲得準(zhǔn)確結(jié)果,妥當(dāng)?shù)蜏乇4婕?xì)胞是您的首要考慮事項(xiàng)之一。富含大量高活力細(xì)胞的穩(wěn)健、健康細(xì)胞培養(yǎng)可以讓您更快開(kāi)展試驗(yàn),同時(shí)對(duì)結(jié)果更有信心。在貼壁和懸浮細(xì)胞系的低溫保存中,Recovery?可使細(xì)胞活力平均增加25%Recovery?是一種優(yōu)化的完全營(yíng)養(yǎng)成分配方,可以避免繁雜的DMSO混勻操作江蘇淋巴細(xì)胞凍存液性能指標(biāo)無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液,不含動(dòng)物來(lái)源的血清成分,能夠有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力.
細(xì)胞復(fù)蘇佩戴眼鏡和手套,從液氮中取出凍存的細(xì)胞管。迅速放入38℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),在1分鐘內(nèi)使其完全融化,然后在無(wú)菌條件下取出細(xì)胞。1200rpm/min離心5-10min,棄去上清,加入適量培養(yǎng)液混勻后接種于培養(yǎng)瓶中,次日更換一次培養(yǎng)液。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇操作步驟:細(xì)胞凍存和復(fù)蘇采取“慢凍快融”的原則,慢速冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水份滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)形成冰晶的機(jī)會(huì),快融以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化,避免慢速融化水份滲入細(xì)胞內(nèi),再次形成胞內(nèi)冰晶造成對(duì)細(xì)胞的損傷。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。在過(guò)去的幾十年中,科研工作者將培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例配制成凍存液,并配合手工使細(xì)胞從4℃,-20℃,-80℃到液氮中逐步轉(zhuǎn)移使其達(dá)到“慢凍”的效果。但這種自制的凍存液儲(chǔ)存時(shí)間一般比較短,不能滿足時(shí)間跨度大的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的需求。且這樣人力和時(shí)間成本大,人手操作的誤差和血清制品的批間差也給實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)了不穩(wěn)定性。細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑.
4.逐滴加入5-7mL的預(yù)熱的培養(yǎng)基到15mL的離心管中,加入的同時(shí)輕輕混勻。5.室溫以300xg離心5分鐘。6.吸出培養(yǎng)基,使細(xì)胞沉淀完好無(wú)損。使用2mL血清移液管輕輕將細(xì)胞沉淀重懸于1mL的培養(yǎng)基中。7.將0.5mL的細(xì)胞混合物轉(zhuǎn)移到含有培養(yǎng)基的預(yù)包被的6孔板的培養(yǎng)孔中(例如,每個(gè)凍凍管可以鋪板兩個(gè)孔)。8.將培養(yǎng)板放入37°C培養(yǎng)箱??焖偾昂笞笥业膿u晃培養(yǎng)板數(shù)次,將細(xì)胞聚集體分布均勻。24小時(shí)內(nèi)不要移動(dòng)培養(yǎng)板。注意:解凍復(fù)蘇后如果只能觀察到少數(shù)的未分化的集落在細(xì)胞建株和建系中,及時(shí)凍存原始細(xì)胞是十分重要的。細(xì)胞凍存液銷售
產(chǎn)品特色:即用型細(xì)胞凍存液.細(xì)胞凍存液銷售
3、取待凍存的細(xì)胞用胰蛋白酶消化(方法見(jiàn)細(xì)胞的傳代部分)。用含血清的培養(yǎng)基將細(xì)胞沖洗下來(lái),將細(xì)胞懸液吸到無(wú)菌離心管中,800r/min離心5min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀。如果是懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,則可直接離心收集細(xì)胞。4、在沉淀中加入適量?jī)龃嬉褐瞥杉?xì)胞懸液,細(xì)胞濃度宜大,300萬(wàn)/mL左右,一般一個(gè)中方瓶中的細(xì)胞濃縮至1mL,凍存液中為宜。5、細(xì)胞懸液裝入凍存管中。用封口膜封裹瓶口,做好標(biāo)記。6、凍存管在4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃中30min,再轉(zhuǎn)入-70℃過(guò)夜,之后即可放入液氮中長(zhǎng)久保存,注意進(jìn)行登記。細(xì)胞凍存液銷售
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