懸浮細胞轉染試劑

來源: 發(fā)布時間:2022-07-21

十全十美難,十全九美卻可以通過選擇一款好的轉染試劑來實現(xiàn)。理想的轉染試劑包括要具有較高的轉染效率,細胞毒性低,操作簡單可重復,價格還要可愛?,F(xiàn)在大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體系列轉染試劑,但脂質(zhì)體對細胞毒性大,某些細胞的轉染效率還很低,看單孔的價格也很不美好。尤其是在轉染RNA方面,脂質(zhì)體的劣勢較明顯。QIAGEN在轉染試劑領域的研發(fā)思路與其核酸純化領域的精而專,全而深不同。在轉染試劑的研發(fā)過程中,另辟蹊徑,研精致思進而做到小而美的轉染產(chǎn)品。從市面上眾多轉染試劑的一片紅海中,神奇的開辟出一塊藍海,為客戶烹制出了幾款高效、快速、低毒又親民的轉染試劑私房菜。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。懸浮細胞轉染試劑

X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作.上海國產(chǎn)轉染試劑對照隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen 顯色檢測)。

用 LipoD293? 體外 DNA 轉染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品 Invitrogen 公司的 293fectin?(下圖)轉染 pEGFP-C1 質(zhì)粒到 HEK293 細胞中。轉染 24 小時后,細胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖(左側)和熒光成像圖(右側)。

對懸浮 HEK293F 產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/

30 毫升的 293F 細胞分別使用 LipoD293?試劑、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等轉染試劑按照生產(chǎn)商的標準轉染步驟將 pEGFP-6xHis 質(zhì)粒導入細胞表達,用量為 LipoD293? 試劑,20 微克,所有其他三種轉染試劑均使用 30 微克質(zhì)粒 DNA。

用LipoD293?體外DNA轉染試劑(Ver.II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?(下圖)轉染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細胞中。轉染24小時后,細胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側)和熒光成像圖(右側)。對懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較30毫升的293F細胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin、Xfect和Fugene6等轉染試劑按照生產(chǎn)商的標準轉染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導入細胞表達,用量為LipoD293?試劑,20微克,所有其他三種轉染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA。用于siRNA的轉染試劑,還有通用型轉染試劑Lipofectamine?.

胞因素用低代數(shù)的細胞293T細胞非常重要?。‘斎灰惨WC細胞狀態(tài)特別好,沒有細微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦!

載體系統(tǒng)在實驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),當然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構建時導致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP 載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達載體構建純化良好,質(zhì)粒間比例得當,并且對質(zhì)粒進行酶切驗證. 世界上低價的細胞轉染試劑PEI,這里有**詳細的操作步驟!動物轉染試劑多少錢

采用siRNA轉染試劑可以將siRNA輕松導入細胞內(nèi)。懸浮細胞轉染試劑

圖3. 用于轉染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。



高效、靶向敲低

在實驗靶標中可觀察到高達85%的敲低效果



圖4. 使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復合物,以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進行注射,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達85%的敲低(使用TaqMan分析對敲低進行評估)。 懸浮細胞轉染試劑

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