細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑 簡介：
X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2 μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細胞分析的多種實驗。
優(yōu)勢：1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。
2.操作簡便、節(jié)省時間，只需對X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。
3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。 帶你了解性價比比較高的轉(zhuǎn)染試劑-PEI轉(zhuǎn)染.上海蛋白轉(zhuǎn)染試劑選購
LNCap細胞的培養(yǎng)和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行，與pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共轉(zhuǎn)染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293?試劑（左圖）和FugeneHD（右圖）分別按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實驗步驟進行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時后，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光，以此來評價轉(zhuǎn)染效率。在血清和***的存在下，HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達到95%的細胞融合。轉(zhuǎn)染48小時后，分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。上海polviet轉(zhuǎn)染試劑作用并更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細胞，用PBS洗滌3次以上，以備RNA抽提。
基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑，帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復(fù)合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用，并通過內(nèi)吞作用進入細胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類，前者細胞毒性相對較大，后者細胞毒性較小，但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性，可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑，不局限于單一成分，混合了不同配方的脂類（非脂質(zhì)體）、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的成分，兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細胞毒性小的優(yōu)勢，且操作更加簡單，易于高通量。
LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點：高轉(zhuǎn)染效率，適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染效率高，適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白（GFP）表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細胞系，通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作，通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。轉(zhuǎn)染試劑快速查找工具上線!
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隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平（Biophen 顯色檢測）。上海蛋白轉(zhuǎn)染試劑選購
.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。
2.高靈活應(yīng)用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。
3.細胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。
4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。
圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標準實驗方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 上海蛋白轉(zhuǎn)染試劑選購
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