懸浮細胞轉染試劑配制

來源: 發(fā)布時間:2022-05-31

原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖。因此,它們的形態(tài)學和生理特征和體內狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉染。在經過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據支配地位,從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉染的克隆傳代。 siRNA脫靶效應會導致細胞死亡,并引起分析問題。懸浮細胞轉染試劑配制

在難轉染細胞(原代大鼠動脈平滑肌細胞)轉染效率的比較

圖片由芝加哥大學肺和重癥護理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供

制備大鼠的動脈平滑肌原代細胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產制造商的轉染操作步轉染至該細胞。轉染 24 小時后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光,以此來評價轉染效率。

對難轉染細胞 LNCap 細胞轉染效率的比較

圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institute)的 Lyn Gao 博士友情提供



上海動物細胞轉染試劑配制賽默飛提供了多種高質量的轉染產品,適用于各種細胞類型的轉染。

.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。

2.高靈活應用, 同一試劑可用于siRNA和質粒共轉染的基因沉默實驗。

3.細胞毒性低,結果相關性好,確保所觀察到的細胞效應是由轉染的siRNA而非轉染過程本身介導。

4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。

圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉染至4種細胞。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。

Zeta Life轉染試劑 成功轉染THP-1 (人單核白血病細胞) 懸浮細胞                 ZETA LIFE                                             ZETA LIFE                                                              微信號                               gh_97714b427409

功能介紹                               美國 Zeta Life公司是國際無血清細胞培養(yǎng)基 DMEM/F12主要完成人,有三十多年的胎牛血清、無血清細胞培養(yǎng)基生產經驗; Zeta Life與美國加利福尼亞大學聯(lián)合開發(fā)全球細胞體內可代謝轉染試劑,此技術成為全球細胞轉染優(yōu)先技術之一。                                                                                                      7月17日                 收錄于話題Zeta Life Advanced DNA RNA,AD600150轉染試劑;

成功轉染THP-1 (人單核白血病細胞) 懸浮細胞;

來自廣州中山大學附屬**醫(yī)院客戶的喜訊;

出色的細胞轉染結果與您分享;

24小時熒光圖片:

zeta life,Advanced DNA RNA轉染試劑信息如下 臨床級******毒載體生產必備轉染試劑..

基于磷酸鈣成分的轉染試劑,其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應形成磷酸鈣-DNA復合物,粘附到細胞膜表面,借助內吞作用進入細胞質。pH值,鈣離子濃度,DNA濃度,沉淀時間,細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結果產生影響,因此實驗條件摸索和優(yōu)化時間較長,且重復性不佳?;谥|體的轉染試劑包括中性脂質體和陽離子脂質體兩種。中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA,借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。目前應用比較***的是帶正電的陽離子脂質體轉染試劑,DNA并沒有預先包埋在脂質體中,而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上,形成DNA-陽離子脂質體復合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,經過內吞被導入細胞。此方法操作簡單,重復性好,在體外轉染中有很高的效率,但具有一定的細胞毒性,可能會干擾細胞的代謝。且活性受血清影響,需要去除血清。無論有無血清、***存在均可獲得很高的轉染效率。上海病毒轉染試劑價格

采用Lipofectamine RNAiMAX轉染試劑轉染A549細胞時,實現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細胞毒性。懸浮細胞轉染試劑配制

細胞轉染過程:X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化懸浮細胞轉染試劑配制

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