武漢brdu細(xì)胞增殖凋亡

來源: 發(fā)布時間:2021-08-27

Q:在做刺激實驗時,對測定是否有影響?

A:如果有還原性,則會與CCK-8發(fā)生反應(yīng),影響吸光度;金屬離子的存在可能會影響CCK-8的靈敏度。終濃度為1 mM 的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會5% 、15% 、90%的顯色反應(yīng),使靈敏度降低。如果終濃度是10 mM 的話。

Q:如果吸光度值太低,可以采取什么辦法?

A:適當(dāng)增加細(xì)胞數(shù)量或延長加入CCK-8溶液后的孵育時間。

Q:如果吸光度值太高,可以采取什么辦法?

A:適當(dāng)減少細(xì)胞數(shù)量(建議正式實驗前優(yōu)化細(xì)胞數(shù)量與熒光值之間的關(guān)系)或縮短加入CCK-8溶液后的孵育時間。 細(xì)胞增殖生長力是判定細(xì)胞活力的重要指標(biāo)。武漢brdu細(xì)胞增殖凋亡

t細(xì)胞增殖試驗又稱T細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗。T細(xì)胞在體外經(jīng)某種物質(zhì)刺激,細(xì)胞代謝和形態(tài)相繼變化,在24~48h細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和核酸的合成增加,產(chǎn)生一系列增殖的變化,如細(xì)胞變化、細(xì)胞漿擴(kuò)大、出現(xiàn)空泡、核仁明顯、核染色質(zhì)疏松等,由淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榱馨湍讣?xì)胞。因此,這種淋巴細(xì)胞增殖又叫淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化。據(jù)此可判斷出淋巴細(xì)胞對有關(guān)刺激的反應(yīng)性與功能狀態(tài)。  (1)非抗原性刺激物:如植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)、美洲商陸(PWM)、脂多糖(LPS),通稱促有絲分裂原。其中LPS刺激B細(xì)胞,PWM可刺激T和B細(xì)胞,PHA和ConA刺激T細(xì)胞增殖。  (2)抗原性刺激物:如結(jié)核菌素、葡萄球菌*、破傷風(fēng)類、鏈球菌激酶、抗原、同種異型抗原等。沈陽醇促進(jìn)b細(xì)胞增殖的方法細(xì)胞增殖的技術(shù)難點。

上海儒安生物科技有限公司CCK8檢測細(xì)胞增殖/毒性的原理CellCountingKit-8(簡稱CCK-8)試劑可用于簡便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓***二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物(Formazandye)。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。用途:***篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、**藥敏試驗CCK8的優(yōu)點:使用方便,省去了洗滌細(xì)胞,不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑;CCK-8法能快速檢測;CCK-8法的檢測靈敏度很高,甚至可以測定較低細(xì)胞密度;CCK-8法的重復(fù)性優(yōu)于MTT法;CCK-8法對細(xì)胞毒性??;CCK-8細(xì)胞活性檢測試劑中為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用。CCK8的缺點:與MTT法相比,CCK8和XTT的價格比較貴。CCK8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。與以往的增殖/毒性測定試劑相比較:檢測方法MTT法XTT法WST-1法CCK8法甲臢產(chǎn)物的水溶性差。

標(biāo)簽抗體

Anti HA-Tag Mouse mAb



1.產(chǎn)品簡介

    Anti HA-tag mouse mAb是標(biāo)簽抗體系列之一。本抗體具有高度敏感性,可用于HA標(biāo)簽融合蛋白的檢測,能識別重組蛋白C端、N端和內(nèi)部的HA標(biāo)簽。

2.產(chǎn)品特點

?性價比高,多種稀釋比例推薦:

WB: 1:1000 - 1:10000

IP:  1:100 - 1:500

IF:  1:200 - 1:1000

?常備現(xiàn)貨

3.結(jié)果示例

HA標(biāo)簽小鼠單抗(1B10)經(jīng)1:2000 (泳道1)和1:5000 (泳道2)

稀釋后對HA標(biāo)簽融合蛋白進(jìn)行Western Blot分析。Anti Flag-Tag Mouse mAb




1.產(chǎn)品簡介

     DYKDDDDK肽段是表位的一小部分,不會對重組蛋白的生物活性或分布有影響,在很多表達(dá)載體中被用作表位標(biāo)簽。作為標(biāo)簽抗體之一,本抗體是抗DYKDDDDK比較好的Flag抗體,可識別融合蛋白的C端、N端和內(nèi)部的Flag標(biāo)簽。

2.產(chǎn)品特點

?性價比高,多種稀釋比例推薦:

WB: 1:1000 - 1:10000

IP:  1:100 - 1:500

IF:  1:200 - 1:1000

?常備現(xiàn)貨

3.結(jié)果示例

Flag標(biāo)簽小鼠單抗(2E4)經(jīng)1:2000 (泳道1)和1:5000 (泳道2)

稀釋后對Flag標(biāo)簽融合蛋白進(jìn)行Western Blot分析。



293T細(xì)胞轉(zhuǎn)染Flag后,用Anti Flag-Tag Mouse mAb (2E4)進(jìn)行免疫熒光分析。

DAPI染色細(xì)胞核;Flag抗體染色;



較新的細(xì)胞增殖檢測方法。

使用方法:  1.將印記膜從蛋白轉(zhuǎn)印設(shè)備中取出,加入合適的封閉液在溫室下孵育20-60分鐘,同時振蕩;  2.將膜從封閉液中取出,與一抗工作液在溫室孵育1小時,同時振蕩或在28℃孵育過夜,不振蕩;  3.用適當(dāng)?shù)木彌_液充分洗滌印跡膜。  4.用10-50ng/mL二抗孵育印跡膜約30-60分鐘;  5.重復(fù)步驟3,以除去未結(jié)合的HRP標(biāo)記二抗(膜與HRP標(biāo)記二抗孵育后必須進(jìn)行徹底洗滌);  6.通過混合等份的本產(chǎn)品溶液A和本產(chǎn)品溶液B來制備發(fā)光工作溶液。每平方厘米印記膜使用0.1mL發(fā)光工作溶液。已配制的工作溶液在室溫下可穩(wěn)定保存8小時。  7.將印跡膜置于新配置的工作溶液中孵育5分鐘;  8.去除多余的工作溶液;  9.將印跡膜放在透明的塑料包裝或薄片保護(hù)膜中,去除氣泡10將印跡暴露于X射線膠片或成像系統(tǒng)。細(xì)胞增殖的主要方式有哪種?廣州心臟成纖維細(xì)胞增殖教學(xué)視頻

CCK用途:試劑篩選、細(xì)胞增殖測定等。武漢brdu細(xì)胞增殖凋亡

產(chǎn)品簡介

甘油醛-3-磷酸脫氫酶(Glyceraldehyde 3 phosphate dehydrogenase, ***DH)是參與糖酵解的一種關(guān)鍵酶。其高水平組成性表達(dá)于幾乎所有組織中,因此可作為Western Blot的內(nèi)參對照。一些生理因素如缺氧、糖尿病等,會使***DH在某些類型的細(xì)胞中表達(dá)升高。

產(chǎn)品特點

?用于WB實驗,性價比高,推薦稀釋比例為:1:1000 - 1:10000

?常備現(xiàn)貨

結(jié)果示例

***DH-HRP小鼠單抗經(jīng)1:4000(泳道1) 和1:8000(泳道2)梯度稀釋,

對小鼠肝臟裂解物進(jìn)行Western Blot分析。 武漢brdu細(xì)胞增殖凋亡

上海儒安生物科技有限公司位于真南路4268號2幢J1718室,交通便利,環(huán)境優(yōu)美,是一家生產(chǎn)型企業(yè)。公司是一家有限責(zé)任公司企業(yè),以誠信務(wù)實的創(chuàng)業(yè)精神、專業(yè)的管理團(tuán)隊、踏實的職工隊伍,努力為廣大用戶提供***的產(chǎn)品。公司業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體,價格合理,品質(zhì)有保證,深受廣大客戶的歡迎。上海儒安生物科技順應(yīng)時代發(fā)展和市場需求,通過**技術(shù),力圖保證高規(guī)格高質(zhì)量的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體。