天津b細(xì)胞增殖教學(xué)視頻

來源: 發(fā)布時(shí)間:2021-10-18

細(xì)胞增殖周期細(xì)胞各組成部份在不斷發(fā)展變化的基礎(chǔ)上還要不斷增殖,產(chǎn)生新細(xì)胞,以代替衰老、死亡和創(chuàng)傷所損失的細(xì)胞,這是機(jī)體新陳代謝的表現(xiàn),也是機(jī)體不斷生長發(fā)育、賴以生存和延續(xù)種族的基礎(chǔ)。細(xì)胞各組成部份在不斷發(fā)展變化的基礎(chǔ)上還要不斷增殖,產(chǎn)生新細(xì)胞,以代替衰老、死亡和創(chuàng)傷所損失的細(xì)胞,這是機(jī)體新陳代謝的表現(xiàn),也是機(jī)體不斷生長發(fā)育、賴以生存和延續(xù)種族的基礎(chǔ)。細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖,每次分裂后所產(chǎn)生的新細(xì)胞必須經(jīng)過生長增大,才能再分裂?,F(xiàn)在把細(xì)胞增殖必須經(jīng)過生長到分裂的過程稱為細(xì)胞周期。換句話說,細(xì)胞增殖周期(或細(xì)胞周期)是指細(xì)胞從一次分裂結(jié)束開始生長,到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過程。細(xì)胞增殖周期可分為兩個(gè)時(shí)期,即間期和分裂期。細(xì)胞增殖是生命的重要特征,細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖。天津b細(xì)胞增殖教學(xué)視頻

T細(xì)胞增殖試驗(yàn)類型(1)形態(tài)法:其原則是將外周血液或分離的單個(gè)細(xì)胞與適量的植物血凝素(PHA)混合,置37℃培養(yǎng)72h,取培養(yǎng)細(xì)胞作涂片染色鏡檢。據(jù)細(xì)胞的大小、核與胞漿的比例、胞漿的染色性和核結(jié)構(gòu)以及有無核仁等特征,分別計(jì)數(shù)淋巴母細(xì)胞、過渡性母細(xì)胞和核有絲分裂相以及成熟的小淋巴細(xì)胞,以**者為轉(zhuǎn)化細(xì)胞,每份標(biāo)本計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞,計(jì)算轉(zhuǎn)化率。  (2)核素法:絕大多數(shù)外周血T細(xì)胞通產(chǎn)處于細(xì)胞周期的G0期,受特異性抗原或促有絲分裂原后,從G0期進(jìn)入G1期,開始合成蛋白質(zhì)、RNA和DNA前體物質(zhì)等,為DNA復(fù)制準(zhǔn)備物質(zhì)基礎(chǔ),然后進(jìn)入S期,細(xì)胞合成DNA量倍增,此時(shí)若在培養(yǎng)液中加入3H標(biāo)記的TdR,后者摻入新合成的DNA中,據(jù)摻入的多少推測細(xì)胞增殖程度。廣州肝竇內(nèi)皮細(xì)胞增殖的方法CCK-8不能用于細(xì)胞染色。

細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8(CCK-8)允許使用WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺基苯基)-2H-)進(jìn)行方便的分析四唑鹽,一鈉鹽),其在電子載體1-甲氧基PMS存在下生物還原時(shí)產(chǎn)生水溶性甲dye染料。將CCK-8溶液直接添加到細(xì)胞中,不需要預(yù)先混合組分。 WST-8被細(xì)胞脫氫酶生物還原為可溶于組織培養(yǎng)基的橙色甲臜產(chǎn)物。產(chǎn)生的甲的量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。由于CCK-8溶液非常穩(wěn)定并且?guī)缀鯖]有細(xì)胞毒性,因此可以進(jìn)行更長的孵育,例如24至48小時(shí)。

細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8允許靈敏的比色測定法測定增殖和細(xì)胞毒性測定中活細(xì)胞的數(shù)量。檢測靈敏度高于任何其他四唑鹽,如MTT,XTT或MTS。

內(nèi)參抗體

***DH-HRP Mouse mAb

1.產(chǎn)品簡介

    甘油醛-3-磷酸脫氫酶(Glyceraldehyde 3 phosphate dehydrogenase, ***DH)是參與糖酵解的一種關(guān)鍵酶。其高水平組成性表達(dá)于幾乎所有組織中,因此可作為Western Blot的內(nèi)參對(duì)照。一些生理因素如缺氧、糖尿病等,會(huì)使***DH在某些類型的細(xì)胞中表達(dá)升高。

2.產(chǎn)品特點(diǎn)

?用于WB實(shí)驗(yàn),性價(jià)比高,推薦稀釋比例為:1:1000 - 1:10000

?常備現(xiàn)貨

3.結(jié)果示例

***DH-HRP小鼠單抗經(jīng)1:4000(泳道1) 和1:8000(泳道2)梯度稀釋,

對(duì)小鼠肝臟裂解物進(jìn)行Western Blot分析。 研究細(xì)胞增殖的調(diào)控是很有必要的。

內(nèi)參抗體

***DH-HRP Mouse mAb


1.產(chǎn)品簡介

    甘油醛-3-磷酸脫氫酶(Glyceraldehyde 3 phosphate dehydrogenase, ***DH)是參與糖酵解的一種關(guān)鍵酶。其高水平組成性表達(dá)于幾乎所有組織中,因此可作為Western Blot的內(nèi)參對(duì)照。一些生理因素如缺氧、糖尿病等,會(huì)使***DH在某些類型的細(xì)胞中表達(dá)升高。

2.產(chǎn)品特點(diǎn)

?用于WB實(shí)驗(yàn),性價(jià)比高,推薦稀釋比例為:1:1000 - 1:10000

?常備現(xiàn)貨

3.結(jié)果示例

***DH-HRP小鼠單抗經(jīng)1:4000(泳道1) 和1:8000(泳道2)梯度稀釋,

對(duì)小鼠肝臟裂解物進(jìn)行Western Blot分析。 CCK用途:試劑篩選、細(xì)胞增殖測定等。南京edu細(xì)胞增殖凋亡

有絲分裂是真核生物進(jìn)行細(xì)胞分裂的主要方式。天津b細(xì)胞增殖教學(xué)視頻

RIPA細(xì)胞裂解液

產(chǎn)品詳情:

RIPA裂解液是較可靠的緩沖液之一,其主要成分含1% NP-40, 0.5% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS,該緩沖液能夠從細(xì)胞質(zhì),膜和**白質(zhì)中提取蛋白質(zhì),并且與許 多應(yīng)用相容,包括蛋白質(zhì)分析,和蛋白質(zhì)純化。RIPA緩沖液不含蛋白酶或磷酸酶,如果需要,可將酶添加到試劑中以防止蛋白質(zhì)水解并維持蛋白質(zhì) 的磷酸化狀態(tài)。一些蛋白激酶和其他酶可能對(duì)RIPA緩沖液的組分敏感,導(dǎo)致其活性降低。 在這種情況下,準(zhǔn)備不含脫氧膽酸鈉和SDS的RIPA緩沖液。

注意事項(xiàng):

1.抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行。

2.裂解得到的蛋白樣品,含有較高濃度的去垢劑,不建議用Bradford 法測定蛋白濃度,可以選用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。

3.裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物,屬正?,F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。在不檢測和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測一些常見的轉(zhuǎn)錄因子,例如NFKB、p53等時(shí),通常不必進(jìn)行超聲處理,就可以檢測到這些轉(zhuǎn)錄因子。 天津b細(xì)胞增殖教學(xué)視頻

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