細(xì)菌***對(duì)CCK8檢測(cè)的影響：我們做***的，經(jīng)常會(huì)做到細(xì)菌或***對(duì)細(xì)胞的影響。那這種情況下我們應(yīng)該怎么辦。其實(shí)細(xì)菌防御系統(tǒng)還是非常強(qiáng)大，單獨(dú)和CCK-8在一起孵育時(shí)，不會(huì)發(fā)生還原反應(yīng)，幾乎不會(huì)和細(xì)菌發(fā)生顯色反應(yīng)。而細(xì)菌不需要入胞繁殖，所以結(jié)果還是可信的。**討厭的就是***，我不知道有多少人是做***的。***是需要入胞繁殖的，而且需要借助細(xì)胞的東西來(lái)進(jìn)行繁殖。繁殖過(guò)程中就需要消耗宿主的能量，會(huì)產(chǎn)生氧化還原反應(yīng)，所以我用CCK-8來(lái)測(cè)定***對(duì)細(xì)胞活性的影響或者某個(gè)***對(duì)***復(fù)制的影響時(shí)，我都小心翼翼的測(cè)很多個(gè)時(shí)間點(diǎn)，說(shuō)實(shí)話，效果不是很好。所以我比較喜歡中性紅?；瘜W(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基).江蘇cck8實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、優(yōu)點(diǎn)：·使用方便，省去了洗滌細(xì)胞，不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑；·CCK-8法能快速檢測(cè)；·CCK-8法的檢測(cè)靈敏度很高，甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度；·CCK-8法的重復(fù)性優(yōu)于MTT法，MTT實(shí)驗(yàn)生成的formazan不是水溶性的，需要使用DMSO等有機(jī)溶劑溶解；而本方法產(chǎn)生的formazan是水溶性的，不但省去了溶解步驟，更因此而減少了該操作步驟帶來(lái)的誤差；·CCK-8法對(duì)細(xì)胞毒性小，可以多次測(cè)定選取比較好測(cè)定時(shí)間，與MTT方法相比線性范圍更寬，靈敏度更高；·CCK-8細(xì)胞活性檢測(cè)試劑中為1瓶溶液，毋需預(yù)制，即開即用。北京cck8方法細(xì)胞增殖檢測(cè)——CCK8.
CCK8原理、優(yōu)勢(shì)和步驟 檢測(cè)原理：
◆ Cell Counting Kit簡(jiǎn)稱CCK試劑盒，是一種基于WST-8（化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。
◆ WST-8屬于MTT的升級(jí)產(chǎn)品，工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比，與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450mM波長(zhǎng)處測(cè)定OD值，間接反映活細(xì)胞數(shù)量。
cck8試劑加入后孵育時(shí)間，隨著時(shí)間的增加，OD值就會(huì)增大?？傊瓌t就是把OD值控制在1.0左右。這里我考察了0.5h、1.0h、2.0h。再說(shuō)一下關(guān)于種板設(shè)置問(wèn)題。眾所周知周圍一圈孔因?yàn)檫吘壭?yīng)都是不用來(lái)做實(shí)驗(yàn)的。一般每組樣品我會(huì)設(shè)置6個(gè)復(fù)孔，得到的OD值去掉**大值與**小值，其余取平均值。我用的是排***，會(huì)省很多力氣，但是也會(huì)增大組內(nèi)誤差。這個(gè)只有通過(guò)校正移液***和選用**適***頭了。能力有限，表達(dá)不清的大家湊合著看看吧。有疑問(wèn)的歡迎大家留言討論，我們的目標(biāo)是共同進(jìn)步細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)方法及經(jīng)驗(yàn)總結(jié)-CCK-8 .
cck8試劑加入后孵育時(shí)間，隨著時(shí)間的增加，OD值就會(huì)增大?？傊瓌t就是把OD值控制在1.0左右。這里我考察了0.5h、1.0h、2.0h。
再說(shuō)一下關(guān)于種板設(shè)置問(wèn)題。眾所周知周圍一圈孔因?yàn)檫吘壭?yīng)都是不用來(lái)做實(shí)驗(yàn)的。一般每組樣品我會(huì)設(shè)置6個(gè)復(fù)孔，得到的OD值去掉**大值與**小值，其余取平均值。我用的是排***，會(huì)省很多力氣，但是也會(huì)增大組內(nèi)誤差。這個(gè)只有通過(guò)校正移液***和選用**適***頭了。
能力有限，表達(dá)不清的大家湊合著看看吧。有疑問(wèn)的歡迎大家留言討論，我們的目標(biāo)是共同進(jìn)步，哈哈。 **藥敏試驗(yàn)：這個(gè)是用的比較廣的，我見過(guò)做**的團(tuán)隊(duì)，買CCK-8都是一整箱，一整箱的買。浙江cck8 細(xì)胞活力
CCK8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)原理.江蘇cck8實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
沒(méi)有做過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)，但其實(shí)原理及目的都是一樣的（反應(yīng)機(jī)理不一樣）。都說(shuō)CCK8簡(jiǎn)單點(diǎn)而且數(shù)據(jù)更穩(wěn)定，所以就用了這個(gè)試劑盒。CCK8的說(shuō)明書大家一定要認(rèn)真閱讀，里面很多細(xì)節(jié)的問(wèn)題都有提到。而且說(shuō)明書里提供的一些關(guān)于各種細(xì)胞的種板數(shù)都很有參考價(jià)值，因?yàn)槟鞘欠磸?fù)驗(yàn)證過(guò)的比較好數(shù)值。但無(wú)論如何，做這個(gè)試驗(yàn)一定要摸條件。你就算再懶，這個(gè)懶不得，否則你都只是在做無(wú)用功。以下言論全部以細(xì)胞毒性試驗(yàn)為前提，如果你做的是促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的***的藥效實(shí)驗(yàn)?zāi)蔷土懋?dāng)別論了。江蘇cck8實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>