細菌***對CCK8檢測的影響：我們做***的，經(jīng)常會做到細菌或***對細胞的影響。那這種情況下我們應該怎么辦。其實細菌防御系統(tǒng)還是非常強大，單獨和CCK-8在一起孵育時，不會發(fā)生還原反應，幾乎不會和細菌發(fā)生顯色反應。而細菌不需要入胞繁殖，所以結(jié)果還是可信的。**討厭的就是***，我不知道有多少人是做***的。***是需要入胞繁殖的，而且需要借助細胞的東西來進行繁殖。繁殖過程中就需要消耗宿主的能量，會產(chǎn)生氧化還原反應，所以我用CCK-8來測定***對細胞活性的影響或者某個***對***復制的影響時，我都小心翼翼的測很多個時間點，說實話，效果不是很好。所以我比較喜歡中性紅。主要是重復性優(yōu)于MTT；江蘇cck8 同仁
切記一定要使用無血清的基礎培養(yǎng)基，一是可以排除血清對細胞生長的影響；二是血清的存在會對吸光度的測量產(chǎn)生影響。以上是MTT比色法的介紹，MTT比色法因為涉及到吸出培養(yǎng)基溶解沉淀的操作，所以更適用于貼壁細胞，懸浮細胞比較好選用CCK8檢測細胞增殖，下面給大家介紹一下CCK8操作的注意事項。CCK8實驗操作CCK8的優(yōu)勢在于對細胞沒有毒性，可以直接加入細胞中長時間孵育，而不用考慮試劑本身對細胞帶來的影響。向各孔中加入10ul的CCK-8檢測溶液。如若檢測的細胞增殖或毒性試驗，需在此之前加入作用***培養(yǎng)適當時間，例如6h/12h/24h等，然后再加入CCK8檢測液。浙江cck8檢測細胞活力在電子耦合試劑（也就是細胞是活的，有呼吸，有能量代謝）.
7、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時內(nèi)測定，吸光度不會發(fā)生變化。注意：如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話，可在加CCK之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基），去掉***影響。當然***影響比較小的情況下，可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入***后的空白吸收即可?；盍τ嬎悖罕４鏃l件：4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存兩年有效。
二、優(yōu)點：·使用方便，省去了洗滌細胞，不需要放射性同位素和有機溶劑；·CCK-8法能快速檢測；·CCK-8法的檢測靈敏度很高，甚至可以測定較低細胞密度；·CCK-8法的重復性優(yōu)于MTT法，MTT實驗生成的formazan不是水溶性的，需要使用DMSO等有機溶劑溶解；而本方法產(chǎn)生的formazan是水溶性的，不但省去了溶解步驟，更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差；·CCK-8法對細胞毒性小，可以多次測定選取比較好測定時間，與MTT方法相比線性范圍更寬，靈敏度更高；·CCK-8細胞活性檢測試劑中為1瓶溶液，毋需預制，即開即用。無需放射性同位素和有機溶劑，對細胞毒性低.
制作標準曲線1.先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量，然后接種細胞。2.按比例(例如：1/2比例)依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度，一般要做3-5個細胞濃度梯度，每組3-6個復孔。3.接種后培養(yǎng)2-4小時使細胞貼壁，然后加CCK-8試劑培養(yǎng)一定時間后測定O.D值，制作出一條以細胞數(shù)量為橫坐標(X軸)，O.D值為縱坐標(Y軸)的標準曲線。根據(jù)此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數(shù)量(使用此標準曲線的前提條件是實驗的條件要一致，便于確定細胞的接種數(shù)量以及加入CCK-8后的培養(yǎng)時間)。cck8結(jié)果處理**終結(jié)果.天津cck8測細胞活性的方法
微生物對細胞的毒性或增殖的實驗。江蘇cck8 同仁
用途：
***篩選、
細胞增殖測定、
細胞毒性測定、
**藥敏試驗等。
所需設備及儀器：
10ul，100-200ul及多通道移液器
酶標儀（帶有450nm濾光片）
96孔培養(yǎng)板
二氧化碳培養(yǎng)箱
培養(yǎng)0.5-4小時:細胞種類不同，形成的Formazan的量也不一樣。如果顯色不夠的話，可以繼續(xù)培養(yǎng)，以確認比較好條件。特別是血液細胞形成的Formazan很少，需要較長的顯色時間（5-6小時）。
測定450nm吸光度：建議采用雙波長進行測定，檢測波長450-490nm，參比波長600-650nm。 江蘇cck8 同仁