膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)是一種用于選擇性分離培養(yǎng)腸道致病菌,特別是沙門氏菌和志賀氏菌的培養(yǎng)基。以下是DHL培養(yǎng)基的一些主要特點:1.**用途**:主要用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng),特別是沙門氏菌和志賀氏菌。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、乳糖、蔗糖、去氧膽酸鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸鐵銨、中性紅和瓊脂,pH值控制在7.2±0.1(25℃)。3.**檢驗原理**:去氧膽酸鈉和檸檬酸鈉抑制革蘭氏陽性菌及大多數(shù)大腸菌群和變形桿菌,但不影響沙門氏菌的生長;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫產(chǎn)生,使菌落中心呈黑色;中性紅作為pH指示劑,發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌落呈紅色,不發(fā)酵糖的菌落為無色。4.**用法**:稱取65.2g培養(yǎng)基,加熱溶解在1000ml蒸餾水中,待冷至60℃時傾入無菌平皿,無需高壓滅菌。5.**質(zhì)量控制**:使用質(zhì)控菌株進行微生物靈敏度試驗,例如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028和福氏志賀氏菌CMCC(B)51572,觀察其生長率和特異性反應(yīng)。6.**儲存條件**:貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋,保質(zhì)期通常為三年。改良Letheen瓊脂培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于化妝品中微生物的檢測,因為它能中和化妝品中的防腐劑。NA-MUG平板
連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基(TetrathionateBroth,TTB)是一種用于分離和富集沙門氏菌的選擇性富集培養(yǎng)基。它通常包含胰酪蛋白胨、動物組織消化物、膽鹽、碳酸鈣、硫代硫酸鈉等成分。這種培養(yǎng)基通過提供特定的營養(yǎng)和抑制劑,有助于沙門氏菌的生長,同時抑制其他雜菌。以下是一些關(guān)于連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方和使用信息:1.**配方**(每升):-胰酪蛋白胨(PancreaticDigestofCasein):2.5g-動物組織消化物(PepticDigestofAnimalTissue):2.5g-膽鹽(BileSalts):1.0g-碳酸鈣(CalciumCarbonate):10.0g-硫代硫酸鈉(SodiumThiosulfate):30.0g-碘(Iodine)和碘化鉀(PotassiumIodide):根據(jù)具體配方調(diào)整2.**配制方法**:-稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入去離子水或蒸餾水。-加熱煮沸以確保所有成分完全溶解。-分裝至適宜的容器中,并進行高壓滅菌。3.**使用說明**:-接種樣品后,培養(yǎng)基可以在35°C或43°C下培養(yǎng)12至24小時。-培養(yǎng)后,可以將培養(yǎng)物接種到其他選擇性培養(yǎng)基上,如XLD瓊脂、亞硫酸鉍瓊脂、SS瓊脂等,以進一步分離和鑒定沙門氏菌。MFC瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿VRBA培養(yǎng)基的主要成分包括瓊脂、膽鹽、溴青紫紅(Violet Red Bile)、乳糖等。
pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液是一種常用的微生物學培養(yǎng)基,其特點如下:1.**成分**:主要由蛋白胨、氯化鈉、磷酸二氫鉀、無水磷酸氫二鈉等組成,這些成分為微生物提供氮源、碳源、維生素和礦物質(zhì),同時維持培養(yǎng)基的滲透壓和pH值。2.**pH值**:調(diào)節(jié)至7.0,為中性環(huán)境,適合多種微生物的生長需求。3.**緩沖能力**:磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉作為緩沖劑,有助于維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定。4.**用途**:主要用于藥品、生物制品的稀釋、沖洗液,也可用于細菌的前增菌或樣品制備。5.**制備方法**:通常稱取一定量的干燥培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000ml純化水中,分裝后進行高壓滅菌。6.**質(zhì)量控制**:在使用前,應(yīng)進行微生物靈敏度試驗,以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合標準。7.**儲存條件**:應(yīng)在2-25℃的條件下避光保存,以保持其有效性。8.**有效期**:在適當?shù)膬Υ鏃l件下,通常有效期為三年。9.**注意事項**:在使用過程中,應(yīng)遵循無菌操作規(guī)程,避免污染。
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基是一種專門用于霉菌和酵母菌計數(shù)、分離和培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**選擇性抑制**:玫瑰紅鈉作為選擇性抑菌劑,可以抑制細菌的生長,并減緩某些霉菌因生長過快而導致菌落漫延生長。2.**營養(yǎng)成分**:蛋白胨提供碳源和氮源,葡萄糖提供能源,磷酸二氫鉀作為緩沖劑,硫酸鎂提供必需的微量元素。3.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在6.0±0.2(25℃),為霉菌和酵母菌提供適宜的生長環(huán)境。4.**制備方法**:稱取31.5g培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,然后在121℃高壓下滅菌15分鐘備用。5.**用途**:根據(jù)《中華人民共和國藥典》2010年版,供藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計數(shù)、分離和培養(yǎng)用。6.**微生物質(zhì)控**:使用質(zhì)控菌株進行微生物靈敏度試驗,例如白色念珠菌、黑曲霉和酵母菌,觀察其生長情況和特征。7.**產(chǎn)品性能**:培養(yǎng)基應(yīng)為粉紅色均勻混懸液,無肉眼可見雜質(zhì)。8.**注意事項**:傾注培養(yǎng)基的溫度不宜過高,一般要求在45℃左右,以免損傷或燙死樣品中的微生物而影響計數(shù)。
伊紅美藍瓊脂(EMB)是一種常用的微生物學培養(yǎng)基,主要用于大腸桿菌和其他腸桿菌科細菌的分離和鑒別。以下是伊紅美藍瓊脂的特點介紹:1.**成分**:伊紅美藍瓊脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、瓊脂、伊紅Y溶液和美藍溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,而伊紅和美藍則作為pH指示劑。2.**pH值**:伊紅美藍瓊脂的pH值為7.1,適合多數(shù)腸道細菌的生長。3.**制法**:首先將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH值后進行高壓滅菌。使用前加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷卻至50-55℃時加入伊紅和美藍溶液,搖勻后傾注平板。4.**用途**:主要用于大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌的分離和鑒別。大腸桿菌在該培養(yǎng)基上分解乳糖產(chǎn)酸,菌落呈深紫色并帶有金屬光澤;而產(chǎn)氣腸桿菌則可能呈現(xiàn)棕色,很少有金屬光澤。5.**保存**:伊紅美藍瓊脂應(yīng)在4℃至8℃的條件下保存,避免凍結(jié),以保持其有效性。6.**有效期**:在適當?shù)馁A存條件下,伊紅美藍瓊脂的有效期通常為三個月。
在分子生物學研究中,BHI Agar用于培養(yǎng)大腸桿菌等細菌,以便進行質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化和克隆。NA-MUG平板
曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基(EosinMethyleneBlueAgar,簡稱EMB)是一種常用的微生物學培養(yǎng)基,主要用于分離和鑒定腸道致病菌,尤其是大腸桿菌。以下是EMB培養(yǎng)基的特點和相關(guān)信息:1.**成分**:EMB培養(yǎng)基通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化鈉、乳糖、亞甲藍、曙紅鈉和瓊脂。其中,蛋白胨和牛肉浸粉提供細菌生長所需的氮源和其他營養(yǎng)元素;乳糖作為可發(fā)酵的碳源;氯化鈉維持滲透壓;曙紅鈉和亞甲基藍作為抑制劑和指示劑,能夠在酸性條件下結(jié)合形成黑色沉淀;瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值一般調(diào)節(jié)至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:EMB培養(yǎng)基是一種弱選擇性培養(yǎng)基,特別用于分離腸道致病菌,如大腸桿菌。它通過抑制非目標菌的生長,促進目標菌的生長,從而實現(xiàn)分離。4.**實驗原理**:曙紅鈉為酸性染料,亞甲基藍為堿性染料。細菌分解乳糖產(chǎn)酸時,細菌帶正電荷,可以與帶負電的酸性染料結(jié)合,即染上了曙紅鈉的顏色;如果細菌因產(chǎn)堿性物質(zhì)較多,帶負電荷時與帶正電荷的堿性染料亞甲基藍結(jié)合而使得菌落呈藍色。細菌產(chǎn)酸量較大時,染料可析出結(jié)晶形成金屬光澤。NA-MUG平板