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亞硒酸鹽胱氨酸(SC)培養(yǎng)基是一種選擇性增菌培養(yǎng)基,主要用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。以下是其特點(diǎn)介紹:1.**成分**:SC培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、亞硒酸氫鈉、磷酸氫二鈉和L-胱氨酸。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,亞硒酸氫鈉用于抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和非沙門氏菌的大多數(shù)革蘭氏陰性腸道菌,磷酸氫二鈉作為緩沖劑,L-胱氨酸作為還原劑。2.**檢驗(yàn)原理**:SC培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)原理在于其成分能夠滿足沙門氏菌生長(zhǎng)的需求,同時(shí)抑制其他非目標(biāo)細(xì)菌的生長(zhǎng)。3.**配制方法**:SC培養(yǎng)基的配制方法是稱取23g干粉,加入1升蒸餾水或去離子水,攪拌加熱至完全溶解。配制過程中應(yīng)避免高壓滅菌,以免影響培養(yǎng)基的有效成分。4.**使用注意事項(xiàng)**:SC培養(yǎng)基比較好現(xiàn)配現(xiàn)用,或在4℃下短期保存。在室溫下,尤其是夏季,培養(yǎng)基容易出現(xiàn)顏色變化,導(dǎo)致增菌效果減退。5.**顏色變化**:過分加熱或反復(fù)加熱會(huì)使培養(yǎng)基顏色變深,影響使用效果。因此,配制過程中只能輕微煮沸,并且要迅速用涼水冷卻。6.**保存**:開封后的SC培養(yǎng)基比較好存放于2℃-8℃環(huán)境下,以延長(zhǎng)使用時(shí)間。NAC瓊脂培養(yǎng)皿具有較高的選擇性,能夠有效地抑制不同種類的微生物,有助于分離目標(biāo)微生物。NA+0.25%青霉素酶預(yù)裝培養(yǎng)皿
pH7.4磷酸鹽緩沖液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一種廣而使用的生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖溶液,具有以下特點(diǎn):1.**pH穩(wěn)定性**:pH值穩(wěn)定在7.4左右,接近人體血液的pH值,適合細(xì)胞和生物分子的生理?xiàng)l件。2.**成分**:主要由磷酸二氫鈉(NaH2PO4)和磷酸氫二鈉(Na2HPO4)組成,這兩種鹽在溶液中可以形成緩沖體系,維持pH值的穩(wěn)定。3.**離子強(qiáng)度**:PBS具有一定的離子強(qiáng)度,可以模擬細(xì)胞外液的離子環(huán)境,有助于保持細(xì)胞和蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。4.**滲透壓**:PBS的滲透壓接近人體生理鹽水的滲透壓,適合用于細(xì)胞懸浮和洗滌,不會(huì)引起細(xì)胞的滲透壓變化。5.**清潔性**:PBS通常使用去離子水或蒸餾水配制,減少雜質(zhì)和離子對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾。6.**兼容性**:PBS與多種生物分子和細(xì)胞培養(yǎng)基兼容,常用于細(xì)胞培養(yǎng)、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、蛋白質(zhì)提取和分析等。7.**無(wú)菌性**:實(shí)驗(yàn)用的PBS通常需要經(jīng)過高壓滅菌或過濾除菌處理,以保證實(shí)驗(yàn)的無(wú)菌條件。8.**多功能性**:除了作為緩沖溶液外,PBS還可以用于稀釋試劑、洗滌實(shí)驗(yàn)器材和樣品等。9.**易于配制**:PBS的配制相對(duì)簡(jiǎn)單,可以根據(jù)需要調(diào)整磷酸鹽的濃度來改變緩沖能力。胰蛋白月示瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿將純培養(yǎng)的菌株涂布在TSA板上,培養(yǎng)至單一菌落后,將培養(yǎng)皿密封保存在4℃或-80℃的環(huán)境中。
曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基(EosinMethyleneBlueAgar,簡(jiǎn)稱EMB)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于分離和鑒定腸道致病菌,尤其是大腸桿菌。以下是EMB培養(yǎng)基的特點(diǎn)和相關(guān)信息:1.**成分**:EMB培養(yǎng)基通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化鈉、乳糖、亞甲藍(lán)、曙紅鈉和瓊脂。其中,蛋白胨和牛肉浸粉提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的氮源和其他營(yíng)養(yǎng)元素;乳糖作為可發(fā)酵的碳源;氯化鈉維持滲透壓;曙紅鈉和亞甲基藍(lán)作為抑制劑和指示劑,能夠在酸性條件下結(jié)合形成黑色沉淀;瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值一般調(diào)節(jié)至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:EMB培養(yǎng)基是一種弱選擇性培養(yǎng)基,特別用于分離腸道致病菌,如大腸桿菌。它通過抑制非目標(biāo)菌的生長(zhǎng),促進(jìn)目標(biāo)菌的生長(zhǎng),從而實(shí)現(xiàn)分離。4.**實(shí)驗(yàn)原理**:曙紅鈉為酸性染料,亞甲基藍(lán)為堿性染料。細(xì)菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí),細(xì)菌帶正電荷,可以與帶負(fù)電的酸性染料結(jié)合,即染上了曙紅鈉的顏色;如果細(xì)菌因產(chǎn)堿性物質(zhì)較多,帶負(fù)電荷時(shí)與帶正電荷的堿性染料亞甲基藍(lán)結(jié)合而使得菌落呈藍(lán)色。細(xì)菌產(chǎn)酸量較大時(shí),染料可析出結(jié)晶形成金屬光澤。
MFC瓊脂(也稱為4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷瓊脂,MUG瓊脂)是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的濾膜法檢測(cè),符合中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB)。其配方包含多價(jià)蛋白胨、胰蛋白胨、乳糖、酵母粉、三號(hào)膽鹽、氯化鈉、苯胺藍(lán)、瓊脂、玫紅酸等成分,pH值調(diào)節(jié)至7.4±0.2。這種培養(yǎng)基通過膽鹽的選擇性作用抑制革蘭氏陽(yáng)性菌,同時(shí)利用乳糖作為可發(fā)酵的糖類,結(jié)合指示劑來檢測(cè)細(xì)菌的代謝活動(dòng)。MFC瓊脂的檢驗(yàn)原理是利用胰胨、多胨和酵母膏粉提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;乳糖為可發(fā)酵糖類;3號(hào)膽鹽抑制革蘭氏陽(yáng)性菌;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;玫紅酸和苯胺藍(lán)為pH指示劑。當(dāng)細(xì)菌發(fā)酵乳糖時(shí),會(huì)產(chǎn)生酸性物質(zhì),導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色變化,從而可以觀察到產(chǎn)酸現(xiàn)象。在實(shí)際應(yīng)用中,MFC瓊脂可以用于水質(zhì)檢測(cè),特別是飲用水和水源中糞大腸菌群的測(cè)定。使用時(shí),將培養(yǎng)基加熱溶解,分裝到試管或平皿中,高壓滅菌后備用。接種樣品后,在適宜的溫度下培養(yǎng),通過觀察培養(yǎng)基上菌落的生長(zhǎng)情況和顏色變化來判斷是否存在大腸菌群。MFC瓊脂的制備和使用應(yīng)遵循相關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程,以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。去氧膽酸鹽瓊脂這種瓊脂培養(yǎng)基在檢測(cè)大腸桿菌等腸道革蘭氏陰性菌方面具有一定的選擇性。
Vogel-Johnson(V-J)瓊脂基礎(chǔ)是一種用于金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)選擇性分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基。以下是其特點(diǎn)介紹:1.**成分**:V-J瓊脂基礎(chǔ)包含明膠蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、酚紅、磷酸氫二鉀、氯化鋰、甘氨酸和瓊脂等成分。這些成分為細(xì)菌提供氮源、碳源、維生素以及凝固劑。2.**選擇性**:甘氨酸和氯化鋰對(duì)金黃色葡萄球菌以外的其他菌株具有抑制作用,而較高濃度的亞碲酸鉀可抑制多數(shù)雜菌的生長(zhǎng)。3.**鑒別特性**:金黃色葡萄球菌能夠還原亞碲酸鉀,使菌落顯黑色,同時(shí)可分解培養(yǎng)基中的甘露醇產(chǎn)酸,使培養(yǎng)基變黃。4.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),適合金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)。5.**使用方法**:稱取V-J瓊脂基礎(chǔ)粉末,溶解于蒸餾水中,煮沸后高壓滅菌。冷卻至45-50℃時(shí)加入過濾除菌的1%亞碲酸鉀溶液,混勻后傾注平板。6.**培養(yǎng)條件**:接種后的培養(yǎng)基通常在30-35℃下需氧培養(yǎng)24-48小時(shí)。7.**結(jié)果觀察**:金黃色葡萄球菌在V-J瓊脂上通常形成黑色菌落,周圍培養(yǎng)基變黃;而大腸埃希氏菌等非目標(biāo)細(xì)菌則被抑制。8.**儲(chǔ)存條件**:V-J瓊脂基礎(chǔ)應(yīng)在避光、陰涼干燥處儲(chǔ)存,使用后立即旋緊瓶蓋,以保持其有效性。通過添加適量的血液,BHI Agar能夠滿足一些苛養(yǎng)菌的生長(zhǎng)需求,常用于酵母和霉菌的培養(yǎng)。CYE培養(yǎng)皿
馬鈴薯浸出液作為一種常見的植物提取物,具有豐富的碳水化合物、氮源和微量元素,是一種潛在的培養(yǎng)基成分。NA+0.25%青霉素酶預(yù)裝培養(yǎng)皿
連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基(TetrathionateBroth,TTB)是一種用于分離和富集沙門氏菌的選擇性富集培養(yǎng)基。它通常包含胰酪蛋白胨、動(dòng)物組織消化物、膽鹽、碳酸鈣、硫代硫酸鈉等成分。這種培養(yǎng)基通過提供特定的營(yíng)養(yǎng)和抑制劑,有助于沙門氏菌的生長(zhǎng),同時(shí)抑制其他雜菌。以下是一些關(guān)于連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方和使用信息:1.**配方**(每升):-胰酪蛋白胨(PancreaticDigestofCasein):2.5g-動(dòng)物組織消化物(PepticDigestofAnimalTissue):2.5g-膽鹽(BileSalts):1.0g-碳酸鈣(CalciumCarbonate):10.0g-硫代硫酸鈉(SodiumThiosulfate):30.0g-碘(Iodine)和碘化鉀(PotassiumIodide):根據(jù)具體配方調(diào)整2.**配制方法**:-稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入去離子水或蒸餾水。-加熱煮沸以確保所有成分完全溶解。-分裝至適宜的容器中,并進(jìn)行高壓滅菌。3.**使用說明**:-接種樣品后,培養(yǎng)基可以在35°C或43°C下培養(yǎng)12至24小時(shí)。-培養(yǎng)后,可以將培養(yǎng)物接種到其他選擇性培養(yǎng)基上,如XLD瓊脂、亞硫酸鉍瓊脂、SS瓊脂等,以進(jìn)一步分離和鑒定沙門氏菌。NA+0.25%青霉素酶預(yù)裝培養(yǎng)皿