精子手工計數(shù)原理及操作方法1.原理:將精液用適當?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯?,混勻注入計?shù)池內(nèi)計數(shù),再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法(按照***版第四版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》)1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數(shù)板的計數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準進行計數(shù)。3.計算1).如每個**中方格內(nèi)精子少于10個,應(yīng)計數(shù)所有25個中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個**中方格內(nèi)精子在10~40個,應(yīng)計10個中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個**中方格內(nèi)精子多于40個,應(yīng)計數(shù)5個中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式:精子數(shù)=計數(shù)結(jié)果/計數(shù)中方格×25×1/計數(shù)池高度×20×103/ml=計數(shù)結(jié)果/計數(shù)中方格×1/計數(shù)池高度×5×103/ml傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法,準確率有待提高。廣州山羊精子分析WOB
精子分析儀工作原理以灰度識別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合,**標本液化后吸入計數(shù),通過顯微鏡放大后,用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動、靜態(tài)圖像后輸入計算機。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運動移位及運動參數(shù),對采集圖像進行精子密度、活動力、活動率、運動特征等幾十項檢驗項目動態(tài)分析,由計算機處理后,打印出“**分析檢查報告以及精子動態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個精子進行動態(tài)檢測分析,2-3分鐘即可完成檢測[1]。優(yōu)點:操作簡便,用量少,檢測速度快,重復性優(yōu)于人工檢測,并且能夠快速、準確的測定精子密度、活力、精子分級等,還可提供精子運動狀態(tài)的多種參數(shù)等。缺點:影響分析結(jié)果的因素較多,除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外,不同的精子計數(shù)池的相對準確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。上海計數(shù)精子分析DAPHamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能,能夠在短時間內(nèi)處理大量樣本,提高工作效率。
醫(yī)生為了鑒定男性生育能力,常囑男方作精液檢查,正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時間長者,可呈淡黃色,若出現(xiàn)鮮紅色.暗紅色,則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升,常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀,1小時之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體,用一根小玻璃棒插入精液中再提起,所形成的精液絲長度一般不超過2厘米,否則視為異常。精液呈弱堿性,PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應(yīng)超過2000萬/毫升。排精后1小時內(nèi)活動精>=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動力分為四級:0級:不活動;1級:精子原地擺動;2級:有中等的前向運動;3級:前向運動活躍,快速直線運動。正常的精子活動力為2~3級的精子>=40%~50%.精子形態(tài):畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項指標定論,應(yīng)對精子數(shù)量活力活動率液化時間畸形率等多方面進行綜合能力分析。采集精液前5~7天內(nèi)必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應(yīng)禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。
二、生化及免疫學檢驗:1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L?!九R床意義】(1)精液果糖為0,可見于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**。(2)精液果糖降低,常見于精囊炎和雄***分泌不足,果糖不足可導致精子運動能量缺乏,甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法:>255nmol·s-1/L【臨床意義】(1)精漿酸性磷酸酶含量增高,常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。(2)精漿酸性磷酸酶含量降低,常見于前列腺炎患者。(3)精漿酸性磷酸酶檢測是法醫(yī)鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L?!九R床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān),其活力不足,可導致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性:2620±1340U/L;LDH-X相對活性:≥0.426。【臨床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性,是精于運動獲能的關(guān)鍵酶,該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失,精子發(fā)生缺陷時無LDH-X形成,少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。Hamilton Thorne精子分析儀采用先進的光學成像,能夠?qū)崟r分析精子的動力學參數(shù),提供有效的精子質(zhì)量評估。
CASA精子運動速度和運動軌跡特征主要參數(shù)有:①軌跡速度(VCL):也稱曲線速度,即精子頭部沿其實際行走曲線的運動速度。②平均路徑速度(VAP):精子頭沿其空間平均軌跡的運動速度,這種平均軌跡是計算機將精子運動的實際軌跡平均后計算出來的,可因不同型號的儀器而有所改變。③直線運動速度(VSL):也稱前向運動速度,即精子頭部直線移動距離的速度。④直線性(LIN):也稱線性度,為精子運動曲線的直線分離度,即VSL/VCL。⑤精子側(cè)擺幅度(ALH):精子頭實際運動軌跡對平均路徑的側(cè)擺幅度,可以是平均值,也可以是最大值。不同型號的CASA系統(tǒng)由于計算方法不一致,因此相互之間不可直接比較。⑥前向性(STR):也稱直線性,計算公式為VSL/VAP,亦即精子運動平均路徑的直線分離度。⑦擺動性(WOB):精子頭沿其實際運動軌跡的空間平均路徑擺動的尺度,計算公式為VAP/VCL。⑧鞭打頻率(BCF):也稱擺動頻率,即精子頭部跨越其平均路徑的頻率。⑨平均移動角度(MAD):精子頭部沿其運動軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時間平均值。⑩運動精子密度:每毫升精液中VAP>0μm/s的精子數(shù)。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),直線性(LIN)?:曲線軌跡的直線性??焖龠\動精子分析頻閃光源
IVOS具有高分辨率和高靈敏度的特點,能夠捕捉到微小的細節(jié)和變化,進一步提高了精子分析的準確性。廣州山羊精子分析WOB
全自動的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出。可以使用一次性的和可重復的載玻片,深度從10um~100um。每次分析捕捉100幀圖像,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級。IVOS能提供:精確、客觀、具有重復性的結(jié)果。高速分析,在60Hz下半秒掃描30幀,為實驗室節(jié)省成本。[1]主要功能IVOS自動精子活動、濃度、形態(tài)分析系統(tǒng)。HamiltonThorne的CASA系統(tǒng)適用于臨床、研究實驗室、動物繁殖基地、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領(lǐng)域,成為了精液分析業(yè)的金標準。可以應(yīng)用于包括人類、公牛、馬、野豬、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動物。在TOXIVOS上有**的大鼠精液分析軟件。廣州山羊精子分析WOB