植物外泌體熒光標記

雖然系統(tǒng)遞送的外泌體主要在肝臟、腎臟和脾臟中積累，但通過在外泌體的外表面上展示特定的靶向分子。例如，識別靶抗原的肽或抗體片段，可以獲得靶向外泌體；通過在細胞分泌囊泡上展示糖基磷脂酰肌醇（GPI）錨定的納米抗體，可以使細胞分泌囊泡顯示多種蛋白，包括抗體、熒光蛋白和信號分子。自然分泌的外泌體分離純化直接作為藥物的潛力有限，但是，將自然的外泌體分泌所需組分摻入合成脂質(zhì)體或納米顆粒中，并且使用可控程序組裝后的工程化外泌體模擬物在藥學上擁有更大的應用潛力。外泌體作為膜和細胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細胞之間傳遞的載體。植物外泌體熒光標記

由于這些胞外囊泡（EV）與生理和病理狀況之間的關(guān)系，人們對EV的興趣呈指數(shù)增長。EVs對新型診斷和臨床轉(zhuǎn)化有很大希望。近的研究已經(jīng)將這些交流所需的一些任務(wù)歸結(jié)為細胞外囊泡（如外泌體和微泡），主要參與髓鞘膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元之間的相互信號傳遞從而促進神經(jīng)元存活、由小膠質(zhì)細胞介導的免疫應答、突觸組裝和可塑性。這種囊泡也被認為是神經(jīng)變性疾病和腦病擴散的重要因素。這些細胞外囊泡功能為以前無法識別的神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)跨細胞相互作用增加了新方式。干細胞外泌體PKH26外泌體具有良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性，使其在藥物遞送方向大有潛力。

Pascucci等將包含有紫杉醇的間充質(zhì)細胞來源外泌體與胰腺ai細胞共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)裝載紫杉醇的間充質(zhì)細胞外泌體具有很強的抗中流增殖效果。Tian等為降低免疫原性與毒性，采用小鼠未成熟樹突狀細胞所產(chǎn)生外泌體作為藥物載體。同時為實現(xiàn)外泌體運輸?shù)陌邢蛐?，使細胞表達能夠識別乳腺ai細胞的外泌體膜蛋白Lamp2b(lysosomeasso[1]ciatedmembraneglycoprotein2b，溶酶體相關(guān)膜蛋白2)。并采用電穿孔的方法，在純化所得的小鼠未成熟樹突狀細胞外泌體中載入阿霉素。結(jié)果表明該外泌體能夠特異性的將阿霉素傳遞給中流組織，抑制中流生長且無明顯毒性。

在過去十年中，細胞外囊泡已經(jīng)成為細胞間通訊的重要介質(zhì)，參與原核生物和高等真核生物細胞之間的生物信號傳遞，以調(diào)節(jié)不同范圍的生物過程。此外，細胞外囊泡的病理生理作用開始在包括癥狀、傳播性疾病和神經(jīng)變性疾病在內(nèi)的疾病中得到認識，突出了醫(yī)治干預的潛在新靶點。此外，未修飾和工程化的細胞外囊泡可能在大分子藥物遞送中具有應用。該綜述回顧近在理解細胞外膜泡生物學和細胞外囊泡在疾病中的作用方面的進展，討論新出現(xiàn)的醫(yī)治機會并考慮相關(guān)的挑戰(zhàn)。外泌體研究相對困難，需要盡快開發(fā)操作簡單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。

外泌體是具有雙層脂膜的囊泡結(jié)構(gòu),其穩(wěn)定性較好,可保護內(nèi)部生物分子免受體液中各種酶的影響,從而保持其完整性和生物活性。外泌體被提取后一般懸浮于磷酸鹽緩沖液。目前,常用的儲存方法為冷凍保存,但是冷凍保存可能會導致外泌體形狀與物理性質(zhì)的改變,也可能導致多層囊泡的形成和聚集,反復凍融會導致外泌體表面分子的生物特性、含量和標志物組成發(fā)生變化。血清中包含外泌體在內(nèi)的細胞外囊泡DNA在不同儲存環(huán)境可保持穩(wěn)定,血漿存放于4°C時其RNA會明顯降解,在–20°C下長期保存也會導致血漿中外泌體總RNA降解,但miRNA卻十分穩(wěn)定,這也提示了外泌體miRNA作為生物標志物的潛力。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型。湖北外泌體tmt

外泌體本身的惰性相當高，但它們與細胞膜融合可將所攜帶的物質(zhì)和信號傳遞到受體細胞并改變其生物學功能。植物外泌體熒光標記

外泌體富含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸分子，這些分子具有來源細胞的特異性，所以通過分析中流細胞所釋放的外泌體分子特征就可部分反映其來源細胞表型及其生物學作用。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)多種中流外泌體來源的蛋白類分子標志物。例如，乳腺ai、結(jié)腸ai和胰腺ai中均可檢測到磷脂酰肌醇蛋白聚糖1（glypican1，GPC1）的表達，且與乳腺ai和結(jié)腸ai相比，GPC1對胰腺ai的早期診斷尤具價值。前列腺ai患者血漿外泌體中凋亡抑制蛋白的表達增高則提示與中流進展相關(guān)。隨著蛋白組學技術(shù)的發(fā)展，研究發(fā)現(xiàn)中流患者血液外泌體來源的蛋白標志物其診斷特異性和敏感性分別可達到95％和90％。植物外泌體熒光標記