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病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色切片常見問題及解決方法:1.切片彎曲且不能形成直帶●原因:①蠟塊上下或左右兩邊不平行。②蠟塊與切片刀刀口不平行。③組織塊外形不整齊。④切片刀各處的鋒利程度不一致?!窠鉀Q方法:①將蠟塊四邊反復(fù)修平對稱。②調(diào)節(jié)蠟塊夾持器,使其與切片刀平行。③修整組織塊時(shí),注意修切整齊。④移動切片刀,更換刀口位置。2.切片上出現(xiàn)裂紋●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②組織中可能含有較硬之物質(zhì),如固定液之結(jié)晶石灰質(zhì)。③包埋時(shí)石蠟凍結(jié)太慢?!窠鉀Q方法:①切片刀某處有缺口,可調(diào)換刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口過多且不平整,可先將刀鋒垂直在磨刀石上輕輕磨數(shù)次,然后按常規(guī)磨刀田。②組織中硬性物質(zhì)太多,則不宜用。③糾正包埋時(shí)的缺點(diǎn)。一般待蠟塊周圍凝結(jié)一層,即可放入冷水中。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測-價(jià)格低-周期短-數(shù)據(jù)清晰。海南推薦的病理實(shí)驗(yàn)外包哪家好
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色組織處理的要求:恰當(dāng)?shù)慕M織處理是做好免疫組化染色的先決條件,也是決定染色成敗的內(nèi)部因素,在組織細(xì)胞材料準(zhǔn)備的過程中,不僅要求保持組織細(xì)胞形態(tài)完整,更要保持組織細(xì)胞的抗原性不受損或彌漫,防止組織自溶。如果出現(xiàn)自溶壞死的組織,抗原已經(jīng)丟失,即使用很靈敏的檢測抗體和高超的技術(shù),也很難檢出所需的抗原,反而往往由于組織的壞死或制片時(shí)的刀痕擠壓,在上述區(qū)域易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。組織及時(shí)取材和固定組織標(biāo)本及時(shí)的取材和固定是做好免疫組化染色的關(guān)鍵第一步,是有效防止組織自溶壞死,抗原丟失的開始,離體組織應(yīng)盡快的進(jìn)行取材,比較好2h內(nèi),取材時(shí)所用的刀應(yīng)銳利,要一刀下去切開組織,不可反復(fù)切拉組織,造成組織的擠壓,組織塊大小要適中,一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm,切記取材時(shí)組織塊寧可面積大,千萬不能厚的原則,(也就是說組織塊的面積可以大到3cm×5cm,但組織塊的厚度千萬不能超過0.2cm,否則將不利于組織的均勻固定)。固定液快速滲透到組織內(nèi)部使組織蛋白能在一定時(shí)間內(nèi)迅速凝固。從而完好的保存抗原和組織細(xì)胞形態(tài)。吉林專業(yè)的病理實(shí)驗(yàn)外包檢測病理實(shí)驗(yàn)外包的條件,南京英瀚斯。
●原因:①組織脫水,透明不夠。②浸蠟時(shí)間過長、浸蠟溫度過高。③組織脫出是由于脫水、透明時(shí)間不夠,或組織中含有乙醇等,石蠟不易滲入組織中故導(dǎo)致石蠟與組織分離。④二甲苯使用時(shí)間過久?!窠鉀Q方法:①必須按組織大小厚薄選擇脫水、透明時(shí)間。②依組織的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)確定浸蠟時(shí)間、控制包埋溫度。一般這種情況難以補(bǔ)救。③脫水,透明滲蠟不夠,應(yīng)重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再進(jìn)行滲蠟包埋。④更換二甲苯。2.切片皺褶太多且不能完全展開●原因:①石蠟太軟或室溫過高。②切片刀上粘有殘余的石蠟,刀口不干凈。③組織浸蠟時(shí)間不夠或脫水、透明不夠。④切片刀不鋒利。●解決方法:①可將蠟塊放入冰箱中冰凍后切片。并在切片時(shí)一邊切片一邊用冰塊冰凍或換蠟。如室溫過高,可開空調(diào)降低室溫。②切片刀不干凈,可用棉花沾少許二甲苯將刀口拭干凈。③組織浸蠟不夠,可重復(fù)浸蠟過程。④將切片刀磨銳利再行切片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹VonKossa染色:簡介:鈣結(jié)節(jié)的形成為成骨細(xì)胞特有,Vonkossa染色法是染色礦化結(jié)節(jié)的經(jīng)典方法,利用硝酸銀與鈣鹽的復(fù)分解反應(yīng)形成可被還原的銀鹽,在強(qiáng)光或紫外光下或者強(qiáng)還原劑作用下使其還原為黑色的金屬銀。簡要流程:石蠟切片/細(xì)胞爬片/冷凍切片→脫蠟至水→硝酸銀滴染→蘇木素染核→伊紅染色→脫水、透明、封片(中性樹膠)→Vonkossa染**(鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,細(xì)胞核呈藍(lán)色,背景呈紅色;或者鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,背景呈紅色)。VonKossa染色利用金屬離子置換反應(yīng)檢測組織中鈣鹽沉積,由硝酸銀溶液中的銀離子置換組織中沉積的鈣離子。該染色可用于血管鈣化的檢測病理實(shí)驗(yàn)外包檢測服務(wù)介紹,醫(yī)學(xué)造模以及評價(jià)。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色HE染色常見問題:Q1:HE染色比較常見的紅藍(lán)失調(diào)答:(1)偏藍(lán)色:蘇木素染色過深,分化不夠;伊紅試劑過期;伊紅染色時(shí)間太短,分化過度。(2)偏紅色:蘇木素染色過淺,分化過度;組織固定不佳,細(xì)胞核不著色;脫蠟不徹底,蘇木素染不上;蘇木素氧化成熟不夠;伊紅染色過深,分化不足。Q2:HE染色后出現(xiàn)的大白色斑塊或斑點(diǎn)答:脫蠟前烤片溫度偏低,時(shí)間過短,蠟未完全融化;切片在脫蠟溶劑中停留時(shí)間過短;脫蠟溶劑使用太久,得更新。病理實(shí)驗(yàn)外包,組織檢測,南京英瀚斯生物科技有限公司。湖北生物病理實(shí)驗(yàn)外包哪家好
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病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹PAS染色:PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。PAS染色利用高碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色,顯示糖原定位。染色步驟1.石蠟切片脫蠟至水(細(xì)胞涂片,冰凍切片直接水洗);2.蒸餾水洗;3.過碘酸酒清夜10min;4.自來水沖洗10min;5.Schiff氏液10min;6.流水沖洗5min;7.用哈瑞蘇木精或邁耶蘇木精染核3min(細(xì)胞核染色過深可用鹽酸酒精分化);8.流水沖洗5min;9.常規(guī)脫水、透明、封固。結(jié)果PAS陽性為紅色,細(xì)胞核藍(lán)色。海南推薦的病理實(shí)驗(yàn)外包哪家好
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