中空聚合物微球在涂料中的應(yīng)用
? 遮光性是涂料的一個重要性能指標。 早期涂料工業(yè)中主要
是以TiO 2 作為白色顏料提高涂料的遮光性， 主要是利用
TiO 2 微粒較高的折光率， 但是TiO 2 含量過高時， 會發(fā)生團
聚而嚴重影響光散射性， 從而降低了涂料的遮光性。
遮蓋聚合物主要是利用空氣泡對光線的高散射性來提高涂
層的遮蓋效果， 通過中空結(jié)構(gòu)微球的光線經(jīng)過空腔內(nèi)的空
氣時就會被散射， 經(jīng)過另一端的球殼時會被再次散射， 在
光線穿過涂膜時積累多次散射就會增強涂膜的遮蓋性。
遮蓋聚合物的使用可在部分替代涂料中TiO 2 顏料的添加量，
從而提高涂料的遮蓋力， 并且降低成本。 另外， 對改善涂
料的耐污性、 耐擦洗性和提高涂料的保色性有很好的效果。 使用彩色微球時要注意些什么呢？浙江原裝微球質(zhì)量推薦
獨到之處． （１）制作簡單、 準確， 通過制備芯片全液。 經(jīng)
過簡單的分裝就可以得到很多性質(zhì)完全一樣的芯片． 克服
了基因芯片和蛋白芯片探針點樣時容易發(fā)生點樣錯位、 耗
時、 平行等量加樣困難、 樣本交叉污染、 重復(fù)性差等缺點．
（２）檢測系統(tǒng)對單個球形基質(zhì)進行雙色檢測， 不存在本底影
響檢測的問題， 信嗓比較低， 無需洗脫去除本底。 操作更為
快速． （３）只需要微量的樣品即可進行檢測． 傳統(tǒng)的
甩ＩＳＡ技術(shù)和芯片技術(shù)是對分子**的光學(xué)信號進行檢
測得到結(jié)果， 而液相懸浮芯片技術(shù)是對單個的球形基質(zhì)的
熒光信號進行檢測， 檢測更加準確、 可靠， 用極少量的樣本
就進行檢測． （４）液相環(huán)境更有利于保持蚤白質(zhì)的天然構(gòu)
象， 反應(yīng)條件比較溫和更有利于探針和被檢測物的充分反
應(yīng)， 大多數(shù)反應(yīng)不需要洗滌步驟， 不會破壞反應(yīng)的動態(tài)平
街， 使反應(yīng)更為接近天然狀況．
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反應(yīng)步驟：
1.
用反應(yīng)緩沖液系數(shù)蛋白到 10mg/ml；
2.
用反應(yīng)緩沖液系數(shù)膠乳微球到 1%；
3.
將蛋白溶液加入到膠乳微球溶液中， 10ml 膠乳中加入 1ml 蛋白溶液。 室溫攪拌孵育 2hr；
4.
離心或超濾， 除去未結(jié)合蛋白；
5.
將微球蛋白復(fù)合物用儲存緩沖液溶解。
注意事項：
1.
比較好蛋白標記量影響因素
1）
有效比表面積： 粒徑減小時， 比表面積/mg 微球值得增加；
2）
膠體穩(wěn)定性： 蛋白對膠乳有穩(wěn)定和去穩(wěn)定作用；
3）
免疫反應(yīng)： **近標記量由免疫反應(yīng)需要決定。
2.
膠乳微球中加入蛋白后， 快速攪拌混合， 利于反應(yīng)均衡。 反應(yīng)體積是 1ml 時， 可用移液器吸取蛋白加
入微球中， 并吹打數(shù)次。 如果反應(yīng)體積較大時， 用燒杯， 邊攪拌邊加入蛋白，
1.
每 ml 反應(yīng)混合物加入以下成分：
?
加入 DIW， 定容**終體積為 1ml；
?
0. 1ml 10X 的 MES buffer， ph6. 0~6. 5（10X 的 buffer 通常用 0. 5M） ；
?
0. 1ml 10%的微球(終濃度為 1%) ；
?
0. 23ml NHS 水溶液（50mg/mL） ; 11. 5mg
?
一定體積的 19. 2mg/ml(100mM) 的 EDAC 水溶液；
2.
室溫下攪拌反應(yīng) 15~30min； （Note7）
3.
清洗： MES buffer 或 DIW 清洗 兩次； （Note3） ；
4.
用 DIW 沖懸浮微球到濃度為 1%；
5.
同時， 用包被 buffer 溶解稀釋抗體。 buffer 一般為 ph7~9， 50mM~100mM。 **終的蛋白濃度 1mg/mL;
6.
清洗完微球后， 立即加入一定體積的抗體溶液。 （Note 2） 。 （注意： 此處給出的例子， 微球濃度和
蛋白濃度和 buffer 分別為 0. 5%（w/v） ， 0. 5mg/mL， 25~50mM） ;
7.
室溫下攪拌孵育 2hr；
8.
每 ml 反應(yīng)液中加入 2. 5ml 乙醇胺， 室溫攪拌孵育 10~30min；
9.
清洗： storage buffer 清洗兩次。 （Note 3/4） 彩色微球的日常怎么維護呢？
3.
儲存緩沖液和反應(yīng)緩沖液不同時， 抗體有脫落的可能；
4.
表面活性劑能使得抗體從膠乳中脫落， 所以應(yīng)避免加入。
微球共價結(jié)合抗體方法
一、 一步法
1.
準備 50mM pH 6. 0 的 reaction buffer， 醋酸或 MES buffer 更合適
2.
用 reaction buffer 溶解抗體， 使其濃度為 1mg/mL。
3.
用 reaction buffer 懸浮微球， 使其濃度為 1% w/v
4.
邊攪拌邊將一倍體積的抗體溶液加入到 10 倍體積的微球懸液中， 室溫下持續(xù)攪拌 20 分鐘
5.
準備濃度為 10mg/ml（52umol/mL） 的 EDC 溶液， 用前準備， 現(xiàn)配現(xiàn)用。
6.
將計算需求量的 EDC 溶液加入到上述微球懸液中。 (Note 6) .
7.
室溫下， 立即調(diào)節(jié) pH (Note 7) .
8.
移除未結(jié)合的蛋白， 并將包被微球用 storage buffer 重懸。 (Note 3 and 4) 乳膠微球的日常怎么維護呢？浙江原裝微球質(zhì)量推薦
彩色微球的工作原理是什么？解答來了。浙江原裝微球質(zhì)量推薦
2 有機熒光微球的制備技術(shù)
2. 1 物理化學(xué)接枝法
將有機熒光分子通過物理化學(xué)方法接枝到聚合物微球表面是制備有機熒光微球的
一種較直接的方法， 其優(yōu)點是制備過程簡單方便且不會影響聚合物微球的形態(tài), 單分
散性; 通過控制熒光素的投料量可以控制微球的熒光強度. 其缺點是微球表面的官能團
往往較少, 所以很難制備具有高熒光強度的微球.
采用無皂及種子無皂乳液聚合方法制備了 200～800 nm 粒徑的四個不同
尺寸的單分散聚合物微球, 當(dāng)單體滴速為 1 mL/h 時, 沒有二次成核現(xiàn)象的發(fā)生。 然后
通過擴散合成法在微球表面修飾樹枝狀聚酰胺。 通過微球表面的氨基與四甲基異
硫氰酸羅丹明(TRITC) 鍵合后制備了四種不同尺寸的熒光微球。 浙江原裝微球質(zhì)量推薦
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