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來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-01-06

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等待5至8秒鐘,直到框架完全空了。真空運(yùn)行連續(xù)添加30mL洗滌緩沖液(對于MultiBlot為15mL)。重復(fù)洗滌步驟3次(共3次)4次洗滌)。12.關(guān)閉真空,然后從框架上取下吸墨架。從污點(diǎn)固定器中取出污點(diǎn),并與適當(dāng)?shù)臋z測試劑。如果使用了MultiBlot孔空白,則卸下并清洗。 擴(kuò)展一級(jí)抗體孵育:一小時(shí)至過夜1.執(zhí)行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5mL(對于MultiBlot),5mL(對于Miniblot)或10mL(對于Midiblot)1X一抗(濃縮液)通常在只在運(yùn)行時(shí)將毛坯用于堵塞空腔印跡SNAPi.d.@2.0迷你吸盤座接受多達(dá)7.5倍8.4厘米墨跡SNAP2BHMN0100SNAPi.d.02.0Midi吸筆架接受多達(dá)8.5x13.5厘米的污點(diǎn)。上海WB實(shí)驗(yàn)加速優(yōu)化WB實(shí)驗(yàn)加速器聯(lián)系電話上海益啟生物加速完成封閉到抗體孵育實(shí)驗(yàn)訂購方便。

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至凝膠約 5 cm 高為止。樣品體積少于 10μl 不需灌制積層膠。 4)用另一根已斯德吸管,先從一邊的墊片,再從另一邊墊片往夾層的液面頂部緩緩加入一層水飽和 C4H10O(厚約 1 cm)。讓凝膠在室溫聚合 30 min。聚合后,可見在頂層C4H10O與凝膠的界面間有一清晰的折光線,膠的聚合失敗往往問題在于過硫酸按或 TEMED,或兩者都有。 5)傾去頂層的C4H10O,并以 1×Tris-Cl/SDS, pH8.8 緩沖液沖洗凝膠的頂部表面, 盡量用吸水紙吸干。 6)按表 2 配制積層膠液體,用吸管將液體沿一條墊片加入到玻璃平板夾層,直至夾層的頂部。MerckWB實(shí)驗(yàn)加速器可半天完成WB實(shí)驗(yàn)。

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5微升1微升由于每種抗體都是只有一個(gè)的,并且檢測試劑的靈敏度各不相同,因此可能有必要進(jìn)行調(diào)整抗體或抗原濃度,使用的檢測試劑的類型或靈敏度或印跡X射線曝光時(shí)間。請注意,本指南只作為開發(fā)比較終抗體的起點(diǎn)濃度以獲得所需的性能。表2.封閉,抗體和洗滌的建議體積SNAPi.d.o2.0SNAPi.d.o2.0SNAPi.d.@2.0多印跡框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗體量每孔2.5mL5毫升10毫升洗滌緩沖液*量每孔4x15mL每個(gè)4x30mL每個(gè)4x30mL●Tr上海WB實(shí)驗(yàn)加速優(yōu)化WB實(shí)驗(yàn)加速器聯(lián)系電話