加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時(shí)2,000×g離心4 min。 4. 使用一個(gè)新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時(shí)2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體,在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí),可以延長結(jié)合反應(yīng)時(shí)間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時(shí)請使用目錄號ACS500024。益啟生物公司作為上海一家專業(yè)從事超濾濃縮管代理銷售。金山區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管聯(lián)系人
***的化學(xué)兼容性 ?膜與管壁采用特別的熱封工藝,避免使用膠水 帶來的化學(xué)溶出對樣品的污染 ?Ultracel? 超濾膜和聚丙烯管材性能穩(wěn)定,化學(xué) 兼容性好 ?pH3-10 適用 特別推薦應(yīng)用(提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告作為參考) Amicon? Ultra 離心超濾管: ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 尿液中蛋白質(zhì)的濃縮 ? 游離標(biāo)記物的去除 ? 抗體的快速濃縮 ? 血清多肽生物標(biāo)志物的純化 ? 雙向電泳蛋白樣品制備 ? 樣品去垢劑的去除 操作更安心 ?設(shè)計(jì)精巧、緊湊,一體化結(jié)構(gòu)確保不會發(fā)生滲漏,即 使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作 ?性能穩(wěn)定,數(shù)據(jù)平行性、重現(xiàn)性好,適合精細(xì)操作和 高通量操作金山區(qū)Merck超濾濃縮管批發(fā)超濾濃縮管應(yīng)用領(lǐng)域你知道嗎。
Centrifree?過濾器 Centrifree? 過濾器擁有研究及體外診斷證書(美國適用),是為臨床研究實(shí)驗(yàn)室的樣品制備而設(shè)計(jì)的,能夠快速、高效地通過超濾去除小體積(0.15–1.0 mL)血清、血漿等生物樣品中的蛋白未結(jié)合的小分子溶質(zhì)。數(shù)分鐘之內(nèi)完成精確的分離,樣品終體積約為 10μL;不會發(fā)生樣品稀釋、pH 值變化、離子成分變化或未結(jié)合小分子溶質(zhì)濃縮等情況。這種產(chǎn)品使用的是低吸附的再生纖維素膜,親水膜和 O 型圈,不含增塑劑,確保獲得較好的樣品回收效果。 優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用: 分離血清、血漿等生物學(xué)樣品中未 吸附的小分子物質(zhì) 精確的藥物結(jié)合實(shí)驗(yàn)樣品制備使用 去除生物樣品中的蛋白質(zhì)等大分子 的干擾,減少樣品復(fù)雜性 測 定 游 離 型 智療 藥 物、睪 丸 基素、 甲 狀 腺 素 等,用 于 生 物 活 性 研 究、 藥物結(jié)合分析等新藥評估過程
外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動物實(shí)驗(yàn)前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過濾,這個(gè)時(shí)候考慮到得率,應(yīng)該采用離心法處理,以減少過濾時(shí)的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進(jìn)行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾管內(nèi)管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進(jìn)行緩沖液置換,溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *超濾濃縮管直銷公司。
濃度:當(dāng)需要截留的樣品濃度很低時(shí),通量通常不受濃度影響。操作過 程中,隨著溶質(zhì)濃度的升高,增加的粘滯性和極化將導(dǎo)致通量降低。 溫度:粗體,作為獲得壓力、濃度一樣的詞條通常增加操作時(shí)的溫度可 以提高超濾效率。每增加 1℃蛋白擴(kuò)散率增加 3-3.5%,同時(shí)溶液粘度降低。 實(shí)踐中一般是以樣品和設(shè)備能耐受的比較高溫度來操作。 pH:改換溶液和 / 或 pH 常常改變分子結(jié)構(gòu),蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白會沉淀,產(chǎn)生堵塞和得率損失。 污垢:溶液中除了目的分子造成的濃差極化,還有其它小顆粒和分子會 在膜上富集和沉淀,逐漸堆積在膜孔上或膜孔結(jié)構(gòu)中,形成結(jié)晶和沉淀。超濾濃縮管的系列有很多種。靜安區(qū)Merck離心濃縮管銷售
益啟生物公司的超濾濃縮管系列有很多。金山區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管聯(lián)系人
樣品的澄清、過濾和除菌 Ultrafree?-MC和Ultrafree?-CL微濾管 Ultrafree?-MC(0.5mL)和Ultrafree?-CL(2mL)是一次性使用的微濾離心管,可以用于各種水性樣品和在某些溶劑中的樣品除顆粒物、除沉淀的處理。提供兩種體積及多種膜孔徑以及已經(jīng)經(jīng)過無菌處理的產(chǎn)品供選擇。Ultrafree?微濾離心管操作簡便、樣品回收率高且重復(fù)性很好,是蛋白和核酸樣品處理的理想選擇。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn) 有0.1-5.0μm五種膜孔徑供選擇 采用高回收率的親水Durapore? (PVDF)膜和親水PTFE膜 提供無菌包裝和非無菌包裝形式產(chǎn)品 過濾速度快,數(shù)據(jù)穩(wěn)定、重現(xiàn)性好 上樣體積為0.5mL (MC)或2mL (CL) 配合1.5mL離心管固定轉(zhuǎn)子(MC)或15mL離心管轉(zhuǎn)子使用 頂蓋顏色標(biāo)識易于區(qū)分膜孔徑金山區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管聯(lián)系人