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來源: 發(fā)布時間:2024-03-26

例如,磷酸特異性抗體可能只與活化的磷酸化蛋白發(fā)生反應(yīng)。如果您的蛋白定位在胞內(nèi),則必須對細(xì)胞進(jìn)行裂解。流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)可能要選擇識別細(xì)胞表面分子的抗體。如果您的蛋白有三級結(jié)構(gòu),且掩蓋了抗原表位,則必須對樣本進(jìn)行變性,因?yàn)橛行┛贵w無法識別自然狀態(tài)的蛋白。一些抗體只在冷凍或非固定組織中起效,而有些抗體只對經(jīng)抗原修復(fù)后的石蠟切片起效。 目標(biāo)蛋白的物種來源 比較好選擇明確標(biāo)有目標(biāo)蛋白種屬的抗體。參考抗體說明書或網(wǎng)站信息。CST抗體的報價具體是多少呢?徐匯區(qū)Calbiochem抗體抗體聯(lián)系電話

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對您的特定應(yīng)用,增加(和優(yōu)化)試劑濃度和培養(yǎng)時間。 檢查確保檢測試劑按建議的方法正確貯藏和使用。 從抗體緩沖液中除去吐溫。 配制少量工作液(1mL),在暗室中加入HRP偶聯(lián)二抗1mL。 應(yīng)觀察到可見的藍(lán)光。 在再雜交過程中可能有抗原損失。 信號較弱 在凝膠上的蛋白不足 在凝膠上載入更多的蛋白,或在載入之前濃縮樣品,或使用免疫沉淀以增加在凝膠運(yùn)行的中靶蛋白量。 使膜曝光時間延長(1-2小時)。 轉(zhuǎn)移到膜上的蛋白過少--優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件,如轉(zhuǎn)膜緩沖液pH、膜類型和電壓等。寶山區(qū)Abcam抗體抗體銷售買組蛋白抗體哪家專業(yè)?

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在陰性對照(igG或mockIP)樣品中本底較高 抗體過量導(dǎo)致抗體與非靶蛋白結(jié)合∶ 與珠子的非特異性結(jié)合∶ 染色質(zhì)的不完金裂解∶ 試劑污染∶ "無DNA" PCR反應(yīng)顯示信號 DNA的較低回收率 ChIP抗體無效或較低親和力: ChIP抗體不足: 起始樣品不足: 細(xì)胞不完全溶解和無效裂解: 交聯(lián)過度: 交聯(lián)不足: 親和力較低或珠子質(zhì)量較差: PCR引物: 優(yōu)化抗體的濃度。 加入-個殘***步理,以除這些非特異性蛋白或添加珠子的阻斷劑。 優(yōu)化取解過程,以民得介于200-100bp長度的染色質(zhì)。

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如果實(shí)驗(yàn)試劑將用于進(jìn)一步測量,應(yīng)避免直接使用移液管從試劑瓶中移取。(氧化活性污采物可通過非特異性顯色影響費(fèi)底物),檢查所用抗體和陶結(jié)合物的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)稀釋度 檢查確保樣品根據(jù)建議的樣品操作抽提、配制和貯菱(聚丙烯試管,澄清樣品的貯載溫度為-20℃)。配置樣品和標(biāo)準(zhǔn) 品時究分程勻檢查您的移液器,必要時進(jìn)行校準(zhǔn)。在每次移液器移取后更換移液器吸頭。加樣后,充分震蕩微孔板,使試劑混勻 檢查自動微孔板洗板機(jī)能正常工作;在每個洗滌步驟后,必須完全除去殘留液體。科研用抗體保證質(zhì)量-益啟生物公司。浦東新區(qū)鑒定抗體抗體

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問題 可能的原因 處理方法 印跡上出現(xiàn)條紋 在凝膠的蛋白負(fù)荷過量。 準(zhǔn)確測量蛋白濃度,載入較少的蛋白。 印跡有污染或模糊 凝膠平衡不當(dāng),或在實(shí)驗(yàn)過程中收縮 檢查凝膠平衡時間。 采用麗春紅S染色時, 轉(zhuǎn)膜無效 轉(zhuǎn)膜時,小心除去氣泡。 印跡染色較差 確保在電轉(zhuǎn)過程中因?yàn)闇囟冗^高而產(chǎn)生氣泡或凝膠/膜變形 采用麗春紅S染色時, 在轉(zhuǎn)膜過程中蛋白沒有轉(zhuǎn)移 檢查設(shè)備(轉(zhuǎn)膜盒、盒蓋、電源)。 印跡沒有染色 檢查在轉(zhuǎn)膜過程中凝膠和膜的順序是 確保膜位于凝膠的右側(cè)。 否正確徐匯區(qū)Calbiochem抗體抗體聯(lián)系電話

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