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實驗簡介： 藥物研究包括吸收、分配、代謝、排泄和毒性等多個方面，而吸收是第一步。這個實驗在以內(nèi)皮細胞通透性、藥物滲透等為研究方向的課題中很常用。 常見檢測細胞： 人結(jié)腸腺*細胞系 Caco-2、HT-29、Lovo、SW-480，人結(jié)腸上皮細胞 T84，狗腎上皮細胞系 MDCK，豬腎上皮細胞系LLC/PK1 等，主要模型為上皮細胞吸收、血腦屏障。 具體操作： 上皮細胞生長到細胞匯合度達80-90%時開始實驗，不要超過90%，否則會影響到后續(xù)細胞單層的形成。將細胞均勻接種在小室膜上。對于24孔板和96孔板的接種密度見本文圖示。嘉定區(qū)細胞培養(yǎng)聯(lián)系人上海益啟生物的血清詢價公司電話。

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每隔2天用電阻儀測量細胞跨膜電阻值，直到達到平臺，提示細胞已經(jīng)形成致密單層；或者通過檢測熒光染料熒光黃的通過率，以判斷細胞剛好完全匯合。電阻儀測量因不傷害細胞，可以繼續(xù)培養(yǎng)而比熒光黃法更為普遍地被采用。細胞單層匯合后，用DPBS清洗一次細胞，加入含有不同濃度藥物（一般10-200μM）的緩沖液。如果要測藥物從上至下的運輸效果，則上層小室中加藥物，下層培養(yǎng)板孔里只加緩沖液；反之則相反。將培養(yǎng)板在37℃條件下培養(yǎng)（60rpm震蕩或者不震蕩）1-2h，到達時間之后，分別從細胞小室和培養(yǎng)孔里取出一定 體積緩沖液（一般50μL ）轉(zhuǎn)移至新的轉(zhuǎn)運分析板進行LC/MC分析。對于放射性標記藥物，分別取出20μL緩沖液加入100μL閃爍液，通過多孔閃爍讀板儀讀值。上海益啟生物培養(yǎng)小室訂購方便。崇明區(qū)培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)商家

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