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有關(guān)詳細(xì)信息,請參見表2。●不建議在SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)中剝離印跡。印跡已被剝離可以從阻塞步驟開始在SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)中對遵循標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議的系統(tǒng)進(jìn)行重新探測。●如果不需要剝離(例如,如果使用其他二抗進(jìn)行檢測),則可以重新檢測印跡快速清洗后,立即在SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)中使用。 優(yōu)化準(zhǔn)則抗體已經(jīng)開發(fā)了優(yōu)化指南,以使用戶能夠轉(zhuǎn)換所用抗體的濃度將標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測測定法濃縮至適用于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)的濃度。大多數(shù)用戶會能夠使用相同量的抗體,但與標(biāo)準(zhǔn)品相比,體積更小,濃度更高免疫檢測。但是,當(dāng)使用擴(kuò)展抗體方案(第12頁)時,可以使用相同的方法通常用于標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測的一抗的濃度,體積和時間,其次是較高濃度的二抗,持續(xù)時間較短。表1.如何根據(jù)SNAP i.d.9上海益啟生物樣本制備儀訂購方便。上海Merck超濾杯Merck儀器規(guī)格
utiBlot框架用于在MultiBlot框架中進(jìn)行單點(diǎn)印跡時,放置正確處理一次印跡,然后空白卡在空井。未放入空白卡空井清潔不足確??蚣?*的所有系統(tǒng)墊片和閥門均處于院長,無碎屑或鹽分。清空真空瓶,然后更換串聯(lián)的Milx9-FA過濾器??赡苡捎谝韵略蚨氯宋P座:濃度在補(bǔ)充有緩沖劑的緩沖液中使用0.2-0.5%的干奶脫脂/低脂干0.1%Tweens 20表面活性劑,帶有新的污點(diǎn)固定器。牛奶太高不兼容的封閉液使用新的吸盤固定器更換為強(qiáng)力封閉液。吸墨紙架的重復(fù)使用吸筆座只供一次性使用。請勿重復(fù)使用。低信號或低信號初級和/或次級將抗體濃度增加5到8倍。比標(biāo)準(zhǔn)抗體濃度過低免疫檢測上下顛倒標(biāo)記印跡的蛋白質(zhì)一側(cè),并確保該污點(diǎn)檢測試劑不敏感更換靈敏度更高的檢測試劑,例如足夠的Luminata用Forte虹口區(qū)Merck細(xì)胞計(jì)數(shù)器Merck儀器一級代理采購正規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù)器哪家靠譜?
15分鐘。圖4.擴(kuò)展孵化(過夜):SNAP i.d.8 2.0系統(tǒng)與標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測b。標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)Midi印跡免疫檢測將A431細(xì)胞裂解液和大鼠肝裂解液(12至3 ug)轉(zhuǎn)移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5%NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒,標(biāo)準(zhǔn)印跡為分鎖了1個小時。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2(ErK1 / 2),但是,對于HRP偶聯(lián)的二抗山羊抗兔(AP132P),將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后,將標(biāo)準(zhǔn)印跡孵育1小時。 圖5.擴(kuò)展孵化(1小時):,SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)1小時協(xié)議與SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議與標(biāo)準(zhǔn)免
恢復(fù)正確放置戴姆·貝葉'底部的針腳。 '處理了兩幀首先對一幀施加真空,然后再對另一幀施加真空,以確保同時在每個框架上施加足夠的真空力。MultiBlot框架用于在MuHBlot框架中進(jìn)行單點(diǎn)印跡時,放置正確漢克處理一次印跡,然后空白卡在空井。未放入空白卡空井。 規(guī)格方面底座(長x寬x高)40.6厘米(16英寸)x 32.4厘米(12.751英寸)x 8.9厘米(3.5英寸)體重(大約)1.5kg(3.3磅)帶有Ild(長x寬x高)19.7厘米(7.75英寸)x 14.7厘米(5.8英寸)x 3.6厘米(1.4英寸)的多孔吸墨紙架多色持有人11.4厘米(4.5英寸)x 6.4厘米(2.5英寸)x具有l(wèi)Id的迷你框架(長x寬x高)19.7厘米(7.75英寸)x 14.7厘米(5.8英寸)x 3.益啟生物公司帶您了解微流控細(xì)胞芯片分析儀詳情。
測 注意:所有抗體均使用0.5%NFDM作為封閉劑和Luminata?Forte Western HRP進(jìn)行測試作為化學(xué)發(fā)光試劑的底物。 印跡阻止 ?SNAPi.d.?2.0系統(tǒng)與比較常用的封閉劑兼容,包括脫脂/低脂干燥牛奶,牛血清白蛋白(BSA)和酪蛋白。許多其他市售阻滯劑也兼容(請參閱表5)。?為了確保比較佳的墨量通過吸墨架,必須完全封閉封閉液溶解且不含所有顆粒物質(zhì)。在某些情況下,可能有必要降低封閉劑以達(dá)到所需的流量。?不建議使用濃度高于0.5%的脫脂/低脂干奶。?封閉劑應(yīng)在含有0.1%Tween?20的tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液中制備表面活性劑,以降低表面張力并確保封閉劑在印跡架上均勻分布表面。?為確保抗體在孵育步驟中均勻分布,請?jiān)诜忾]液中稀釋抗體,包含Tween?20表面活性劑。 如何使上海益啟生物細(xì)胞計(jì)數(shù)器的銷售電話。寶山區(qū)MerckAmicon攪拌式過濾器Merck儀器商家
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P i.d.o 2.0SNAP i.d. @ 2.0多印跡框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗體量每孔2.5 mL5毫升10毫升洗滌緩沖液*量每孔4x 15 mL每個4x 30 mL每個4x 30 mL●Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,補(bǔ)充有0.1%Tweene 20表面活性劑在計(jì)算免疫檢測所需的抗體量時,三個要素對于成功檢測出蛋白質(zhì)并獲得了高質(zhì)量的印跡(低背景,高信號):●樣品類型和凝膠上樣濃度●一級和二級抗體濃度●檢測試劑的種類和靈敏度下表中的所有抗體均使用LuminataTM Forte化學(xué)發(fā)光檢測試劑進(jìn)行了測試。對于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng),抗體濃度高于標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測中的濃度,但濃度較低體積。 表3.標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測中一抗稀釋的實(shí)例 SNAPi.d.?2.0免疫檢上海Merck超濾杯Merck儀器規(guī)格
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