外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾管內(nèi)管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進行緩沖液置換,溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *對于不同的需求我們選擇不同的超濾濃縮管系列。崇明區(qū)默克離心濃縮管訂購
特點與優(yōu)點 溫和的磁力攪拌避免發(fā)生聚集和剪切變性 所有型號都可以高壓滅菌 提供 3 種規(guī)格共選擇,用于濃縮 3mL - 400mL 及更大體積樣品 濃度達 10% 的溶液依然可以獲得高流速 應用: 大分子(如蛋白、酶、抗體和***)溶液的濃縮和緩沖液置換 滲濾(Diafiltration)模式 非連續(xù)滲濾是換液的一種操作方法,即先濃縮到一定濃度再稀釋到起始的體積,并多次重復這個操作,直到溶液中的鹽或溶劑被 去除或降到需要的濃度。而連續(xù)滲濾(保持恒定體積)是將超濾杯經(jīng)轉換裝置(目錄號6003)與補液杯(目錄號6028)連接, 使供氣壓和液體流轉。連接有轉換裝置時,不必停下系統(tǒng)的運轉就可以即時進行濃縮和滲濾之間的切換,將兩種操作模式的優(yōu)點 集中在一起,有利于敏感的(蛋白)樣品在**恒定、溫和的條件下高效換液。離心濃縮管聯(lián)系方式超濾濃縮管的優(yōu)勢您了解多少呢?
超濾(UF)常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學性質、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分子大小為**基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa(MW)的分子,鹽和水等小分子會透過,因此在大分子樣品處理中得到了應用。膠狀或微粒狀物質也能夠被截留。UF膜既可以用于透過樣品也用于保留樣品的純化。樣品***小于膜孔徑,則經(jīng)過膜處理可以達到除熱源、澄清和與大分子污染物的分離的效果。如果目的分子遠遠大于膜孔徑,膜處理則可以將小分子污染物去除而目的分子被濃縮。超濾方法相比沉淀法對于樣品更溫和,沒有發(fā)生容易導致生物大分子失活的相變,而且在濃縮的同時可以完成對溶質的除鹽。超濾的應用不限于蛋白樣品的操作,也常用于核酸樣品制備,包括分子克隆和質粒純化。DNA和RNA樣品起始濃度低至5ng/mL也可以被高效地在數(shù)分鐘內(nèi)被濃縮,回收率達到99%以上。
創(chuàng)新的純化 - 濃縮 - 換液一體化系統(tǒng) Amicon? Pro 純化超濾系統(tǒng) 目前的蛋白純化常常包括很多步驟,用到多種器具,卻又因此帶來蛋白降解和損失的問題。為了避免因樣品轉移帶來的各種風險,減少您在樣品孵育、漂洗、洗脫、濃縮及換液各步上耗費的時間,默克密理博的研發(fā)團隊創(chuàng)新地推出了Amicon?Pro一體化純化超濾系統(tǒng)。Amicon?Pro提供了對小量蛋白樣品的標準化操作,使純化濃縮蛋白變得簡便高效,數(shù)據(jù)穩(wěn)定易得。 開放的設計使您可以根據(jù)實際需要靈活使用,Amicon?Pro將成為實驗室小量蛋白純化、濃縮、換液各種操作的多功能工具。根據(jù)您的具體需求選擇不同的超濾濃縮管設計。
這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應用兼容,常常需要用透析或滲濾方法對蛋白樣品進行緩沖液置換。傳統(tǒng)透析方法需要時間很長,多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活,而且***還需要一步濃縮。新產(chǎn)品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新,需一步溫和的滲濾操作即可達到同時對樣品進行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標準 操作步驟的優(yōu)化與簡化往往帶來更好的結果,數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性、可比性和高通量化隨之得以改 善,默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創(chuàng)造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體,減少樣品轉移損失和人為操作的繁瑣和誤差,使蛋白樣品的處理更加標準化,數(shù)據(jù)結果便于評估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。超濾濃縮管的各種系列應用領域還是不一樣的。常州超濾濃縮管報價
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Millipore超濾濃縮管設有反轉離心回收設計使蛋白樣品,特別是小體積樣品回收,避免吸頭吸取造成的樣品丟失或操作錯誤; 其中0.5mL、2mL 和 70mL 超濾管設計為反轉回收模式樣品吸附損失??; 合理的死體積設計,避免樣品離干而降低回收率; 能兼顧高回收率和操作的方便性及標準化,并滿足下游各種應用的要求,使研究者處理樣品時倍感輕松。 有效濃縮同時保證高的蛋白回收率 設計精巧、緊湊,一體化結構確保不會發(fā)生滲漏,即使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作。 崇明區(qū)默克離心濃縮管訂購