虹口區(qū)Merck超濾濃縮管

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-06-22

Amicon? Ultra 4 mL 超濾管 -離心速度快而保持很高的回收率 4 種不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon? Ultra 4mL 超濾管中濃縮(3kDa 細(xì)胞色素 C, 10kDa 細(xì)胞色素 C,30kDa BSA,100kDa IgG), 測(cè)定在離心一定時(shí)間后的回收率。數(shù)據(jù)顯 示所有樣品在離心 15 分鐘左右回收率均 >95%。 為了方便初次使用者選擇**合適的超 濾管產(chǎn)品,默克密理博生命科學(xué)部網(wǎng) 站上提供選擇指引,您需要按照提 示進(jìn)行選擇,**終會(huì)選出一款產(chǎn)品。 為每次實(shí)驗(yàn)選擇**合適的, 您也能快速成為超濾高手!超濾濃縮管具體報(bào)價(jià)多少呢。虹口區(qū)Merck超濾濃縮管

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加入漂洗緩沖液(體積是樹(shù)脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹(shù)脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹(shù)脂時(shí)2,000×g離心4 min。 4. 使用一個(gè)新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹(shù)脂柱床體積的5倍)與樹(shù)脂混勻并離心。< 500μL樹(shù)脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹(shù)脂時(shí)2,000×g離心4 min?;厥展苤屑醇兓玫牡鞍住? 6. 如果是純化抗體,在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí),可以延長(zhǎng)結(jié)合反應(yīng)時(shí)間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購(gòu)不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時(shí)請(qǐng)使用目錄號(hào)ACS500024。徐匯區(qū)默克15ml超濾濃縮管批發(fā)上海超濾濃縮管代理銷(xiāo)售推薦益啟生物公司。

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提供的超濾管是沒(méi)有經(jīng)過(guò)去內(nèi)***處理的,同時(shí)由于內(nèi)***通常以多聚體的形式存在,大小 在10-1000KD之間不等,在超濾的過(guò)程中是無(wú)法去除的??稍趯?shí)驗(yàn)前通過(guò)先用0.5M NaOH預(yù)清洗,隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內(nèi)***。關(guān)于針對(duì)Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過(guò)的內(nèi)***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜,這種材質(zhì)是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對(duì)于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會(huì)增強(qiáng),對(duì)于這種情況,可以嘗試在實(shí)驗(yàn)前對(duì)超濾管進(jìn)行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra 0.5或2來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),通過(guò)減小膜面積來(lái)降低非特異性吸附。

截留 截留有時(shí)也稱(chēng)為排阻。水合程度、離子和空間位置效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致分子量相近 的分子表現(xiàn)非常不同的截留狀態(tài)。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強(qiáng) 度改變的情況下傾向于聚集或改變構(gòu)象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,從而導(dǎo)致排阻增加。比如,有些蛋白質(zhì)在某些緩沖液條件下 會(huì)發(fā)生多聚化,而另一些則發(fā)生解聚(如血紅素蛋白)成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復(fù)雜。以默克密理博的經(jīng)驗(yàn),我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優(yōu)先,再根據(jù)實(shí)際情況加以調(diào)整。買(mǎi)超濾濃縮管找益啟生物公司。

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用超濾對(duì)分子進(jìn)行分級(jí) 通過(guò)選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切實(shí)際。事實(shí)上,膜的規(guī)格描述是基于截留而非通過(guò) 的性質(zhì)。一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中,采用 100k NMWL 濾膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但這時(shí)比膜孔徑小的分子并不是完全自由地通過(guò)濾膜, 75kDa 的分子截留率為 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留?;旌系? 溶液中的各 種成分通過(guò)膜并不像單一成分的溶液那么簡(jiǎn)單和容易。實(shí) 踐中,如果要分離兩種大分子,它們之間的分子量差異應(yīng)該達(dá)到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 規(guī)格在兩種蛋白之間,則可達(dá)到比較理想的 分離。如果蛋白溶液較為稀釋?zhuān)蛪合虏僮饕灿兄谶_(dá)到更好的效果。上海超濾濃縮管代理銷(xiāo)售哪家好?崇明區(qū)超濾濃縮管

超濾濃縮管的優(yōu)勢(shì)您了解多少呢?虹口區(qū)Merck超濾濃縮管

濃度:當(dāng)需要截留的樣品濃度很低時(shí),通量通常不受濃度影響。操作過(guò) 程中,隨著溶質(zhì)濃度的升高,增加的粘滯性和極化將導(dǎo)致通量降低。 溫度:粗體,作為獲得壓力、濃度一樣的詞條通常增加操作時(shí)的溫度可 以提高超濾效率。每增加 1℃蛋白擴(kuò)散率增加 3-3.5%,同時(shí)溶液粘度降低。 實(shí)踐中一般是以樣品和設(shè)備能耐受的比較高溫度來(lái)操作。 pH:改換溶液和 / 或 pH 常常改變分子結(jié)構(gòu),蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白會(huì)沉淀,產(chǎn)生堵塞和得率損失。 污垢:溶液中除了目的分子造成的濃差極化,還有其它小顆粒和分子會(huì) 在膜上富集和沉淀,逐漸堆積在膜孔上或膜孔結(jié)構(gòu)中,形成結(jié)晶和沉淀。虹口區(qū)Merck超濾濃縮管